一种用于自动细胞收获仪的羊水染色体核型胰酶收获法制造技术

本发明专利技术公开一种用于自动细胞收获仪的羊水染色体核型胰酶收获法，包括以下步骤：S1、在培养瓶中加入培养液和羊水细胞，培养7～8天；S2、当羊水细胞培养物在瓶底贴壁长出细胞克隆后，加入低浓度的秋水仙素及5‑溴脱氧尿嘧啶核苷，进行细胞同步化处理；S3、倒出上清，加入胰蛋白酶，进行消化；S4、吹打培养瓶瓶底的羊水细胞培养物，将培养物吸出到离心管中，并加入步骤S3中倒出的上清液到离心管中混匀，对胰酶作用进行中止；S5、将离心管放入自动细胞收获仪中进行处理。本发明专利技术通过加入低浓度的秋水仙素和5‑溴脱氧尿嘧啶核苷，从而能够在自动细胞收获仪内实现染色体核型的收获，并能够得到大量优质核型，从而便于核型提取和核型分析。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞培养，更具体地，涉及一种用于自动细胞收获仪的羊水染色体核型胰酶收获法。

技术介绍

1、羊水细胞培养及核型分析是产前诊断的关键技术，该技术需要历经羊水细胞贴壁、收获(低渗、预固定、固定)、制片(染色体分散)、显微镜下拍取核型及核型分析等诸多步骤，以完成最终的临床报告。

2、羊水染色体核型收获原理：细胞中心粒的微管会在分裂中期与染色体的动粒相连，而微管是由a亚单位和beta亚单位组成的管状结构，而秋水仙素作用于a和beta亚单位之间，让其微管的结构不稳定，不能牵拉染色体，从而使细胞的核分裂无法完成，停留在分裂中期，得到染色体核型。

3、目前的羊水染色体核型在收获羊水细胞后得到核型的总数较少，带型多、分散好的优质染色体核型数量更少，导致优质核型提取困难、核型分析困难，容易产生检测失败及误差，因此急需对此进行改进。

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于克服上述现有技术的不足，提供一种用于自动细胞收获仪的羊水染色体核型胰酶收获法，通过加入低浓度的秋水仙素和5-溴脱氧尿嘧啶核苷本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于自动细胞收获仪的羊水染色体核型胰酶收获法，其特征在于：包括以下步骤：

2.如权利要求1所述一种用于自动细胞收获仪的羊水染色体核型胰酶收获法，其特征在于：在步骤S2中，加入的秋水仙素浓度为5ug/ml～7ug/ml，加入量为20ul～40ul，使培养液中的秋水仙素终浓度为0.06ug/ml～0.10ug/ml。

3.如权利要求2所述一种用于自动细胞收获仪的羊水染色体核型胰酶收获法，其特征在于：所述秋水仙素浓度为6ug/ml，加入量为30ul。

4.如权利要求3所述一种用于自动细胞收获仪的羊水染色体核型胰酶收获法，其特征在于：5-溴脱氧尿嘧啶核...

【技术特征摘要】

1.一种用于自动细胞收获仪的羊水染色体核型胰酶收获法，其特征在于：包括以下步骤：

2.如权利要求1所述一种用于自动细胞收获仪的羊水染色体核型胰酶收获法，其特征在于：在步骤s2中，加入的秋水仙素浓度为5ug/ml～7ug/ml，加入量为20ul～40ul，使培养液中的秋水仙素终浓度为0.06ug/ml～0.10ug/ml。

3.如权利要求2所述一种用于自动细胞收获仪的羊水染色体核型胰酶收获法，其特征在于：所述秋水仙素浓度为6ug/ml，加入量为30ul。

4.如权利要求3所述一种用于自动细胞收获仪的羊水染色体核型胰酶收获法，其特征在于：5-溴脱氧尿嘧啶核苷浓度是1mg/ml，加入量为20ul～40ul，使培养液中的5-溴脱氧尿嘧啶核苷终浓度为6.7ug/ml～13ug/ml，细胞同步化处理时间为17h～19h之间。

5.如权利要求4所述一种用于自动细胞收获仪的羊水染色体核型胰酶收获法，其特征在于：5-溴脱氧尿嘧啶核苷加入...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾艳，范佳鸣，张建军，康迈，金欣，童海江，吴俊朴，陈欣燕，张怀驰，李响，
申请(专利权)人：绍兴市妇幼保健院，
类型：发明
国别省市：