本申请属于异种移植领域，具体涉及工程化细胞系的构建方法及在猪细胞内表达人CD64t基因的方法。本申请提供一种工程化细胞系的构建方法，包括在猪细胞的Hipp11位点敲入人CD64t基因。本申请通过在现有常规基因修饰策略中通过加入人CD64t分子，构建多种包含人CD64t分子的多基因修饰策略，以降低异种器官移植之后发生的抗体介导免疫排斥反应。利用包含人CD64t在内的多种多基因修饰策略构建可用于异种移植用的模型猪将降低甚至消除异种移植中面临的抗体介导的免疫排斥反应，早日推动异种移植进入临床。
【技术实现步骤摘要】
本申请属于异种移植领域，具体涉及工程化细胞系的构建方法及在猪细胞内表达人cd64t基因的方法。
技术介绍
1、器官移植是很多终末期器官衰竭患者的有效方法，也是临床上最常使用的治疗方式。异种器官移植是目前公认的解决人类器官供需严重不平衡的有效途径。相比于其他动物，猪被认为是最适合进行异种器官移植的供体动物。
2、实现猪到人的异种器官移植必须解决的问题是猪和人之间免疫学的不相容性，主要体现为免疫排斥反应与凝血障碍。根据排斥反应发生时间的先后，免疫排斥分为超急性排斥反应（hyperacute rejection，har）、急性血管排斥反应（acute vascular rejection，avr）、慢性排斥反应（chronic rejection，cr）。har是由人体内天然存在的异源性抗体与猪细胞表面的特异性α-gal抗原表位相结合激活补体系统导致的，通常发生在移植后数分钟到数小时内。avr主要是由于激活的内皮细胞和促炎症因子募集先天免疫细胞（自然杀伤细胞、中性粒细胞、巨噬细胞等）引起的，通常发生在移植后数周到数月。
>3、在此发生过程中本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种工程化细胞系的构建方法，其特征在于，包括在猪细胞的Hipp11位点敲入人CD64t基因；
2.根据权利要求1所述的工程化细胞系的构建方法，其特征在于，通过基因编辑的方式在猪细胞的Hipp11位点敲入人CD64t基因。
3.根据权利要求2所述的工程化细胞系的构建方法，其特征在于，基因编辑的方式包括采用CRISPR/Cas9系统；
4.根据权利要求1~3任一项所述的工程化细胞系的构建方法构建得到的工程化细胞。
5.权利要求4所述的工程化细胞在制备降低异种移植免疫排斥药物中的应用。
6.一种在猪细胞内表达人CD64t基因的方法...
【技术特征摘要】
1.一种工程化细胞系的构建方法，其特征在于，包括在猪细胞的hipp11位点敲入人cd64t基因；
2.根据权利要求1所述的工程化细胞系的构建方法，其特征在于，通过基因编辑的方式在猪细胞的hipp11位点敲入人cd64t基因。
3.根据权利要求2所述的工程化细胞系的构建方法，其特征在于，基因编辑的方式包括采用crispr/cas9系统；
4.根据权利要求1~3任一项所述的工程化细胞系的构建方法构建得到的工程化细胞。
5.权利要求4所述的工程化细胞在制备降低异种移植免疫排斥药物中的应用。
6.一种在猪细胞内表达人cd64t基因的方法，其特征在于...
【专利技术属性】
技术研发人员：赖良学，吴涵，连萌，夏聪，
申请(专利权)人：中国科学院广州生物医药与健康研究院，
类型：发明
国别省市：
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