一株人工改造基因的产糖化酶酿酒酵母、其构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了一株人工改造基因的产糖化酶酿酒酵母、其构建方法和应用，所述酿酒酵母为酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae HGL206，于2024年5月17日保藏于中国微生物菌种典型培养物保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO.30661。所述酵母导入了一种外源突变的扣囊覆膜酵母新型糖化酶基因，使得其具有自我产生糖化酶的能力，能高效降解发酵体系中的糊精和多糖，部分替代发酵过程添加糖化酶，提高酒精发酵效率、降低成本。本发明专利技术的酿酒酵母用于乙醇生产，过程更加高效、环保。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一株人工改造基因的产糖化酶酿酒酵母、其构建方法和应用，属于生物工程。

技术介绍

1、糖化酶，又被称为葡萄糖淀粉酶，它是由一系列微生物分泌的，具有外切酶活性的一种胞外酶，以不同形式存在于不同的菌中。它能把淀粉从非还原性的末端水解α-1,4-糖苷键或缓慢水解α-1，6-糖苷键，从而产生葡萄糖。

2、面粉加工副产物，在生产中占小麦面粉总量的10％-20％左右，成分主要为淀粉b型颗粒、及少量细胞壁物质、面筋碎片、戊聚糖及色素。由于淀粉粒径大及含有相对较多的杂质，导致其在利用中产生困难。经过测定，面粉副产物中的淀粉质含量在72％左右，而淀粉质在生产上拥有着比其它生物质更低的生产成本及发酵条件。故相比而言，将面粉生产副产物作为淀粉质源转化乙醇更有利用前景。

3、传统的乙醇发酵过程中，需要外源性添加淀粉酶和糖化酶长时间酶解淀粉质原料，这不仅增加了生产成本，而且糖化酶的质量和添加量难以精确控制，影响了乙醇发酵的稳定性和效率。因此，开发一种能自我产生高效糖化酶的酿酒酵母，对于提高乙醇生产效率、降低成本具有重要意义。</p>
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【技术保护点】

1.一株人工改造基因的产糖化酶酿酒酵母，其特征在于，所述酿酒酵母为酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae HGL206，于2024年5月17日保藏于中国微生物菌种典型培养物保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.30661。

2.一种基于权利要求1所述的人工改造基因的产糖化酶酿酒酵母的构建方法，其特征在于，所述构建方法用到的糖化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，具体步骤包括：

4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)中所述BamHI-上游同源臂...

【技术特征摘要】

1.一株人工改造基因的产糖化酶酿酒酵母，其特征在于，所述酿酒酵母为酿酒酵母saccharomyces cerevisiae hgl206，于2024年5月17日保藏于中国微生物菌种典型培养物保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.30661。

2.一种基于权利要求1所述的人工改造基因的产糖化酶酿酒酵母的构建方法，其特征在于，所述构建方法用到的糖化酶的氨基酸序列如seq id no.1所示。

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，具体步骤包括：

4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)中所述bamhi-上游同源臂-stui的核苷酸序列如seq id no.3所示，asci-下游同源臂-nsii的核苷酸序列如seq idno.4所示。

5.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)中用于扩增含bamhi、nsii酶切位点的质粒骨架区域的引物的核苷酸序列如seq id no.16～17所示。

6.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，步骤(2)中用于扩增paci-kanmx-asci抗性基因片段的引物的核苷酸序列如seq id no.18～19所示。

7.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：李相前，张圣韬，邓泽琛，李雪，陈逸菲，严福伟，王立志，王虎威，
申请(专利权)人：淮阴工学院，
类型：发明
国别省市：