一种从石油污染土壤中分离优势解磷菌的方法技术

本发明专利技术涉及一种从石油污染土壤中分离优势解磷菌的方法，所述方法包括以下步骤：采集石油污染土壤；测定石油污染土壤有效磷含量、磷酸酶活性以及pH值；分析石油污染土壤解磷微生物群落组成，确定石油污染土壤中优势解磷微生物种类；建立优势解磷微生物种类与石油污染土壤有效磷含量以及磷酸酶活性的相关关系，筛选与石油污染土壤有效磷含量以及磷酸酶活性正相关的假单胞菌属的优势解磷菌；利用改良后的选择性培养基分离所述与石油污染土壤有效磷含量以及磷酸酶活性正相关的假单胞菌属的优势解磷菌<subgt;。</subgt;该方法可以快速、简单、有效地筛选出石油污染环境中优势解磷菌，显著提高解磷菌株在石油污染环境中的适应性和竞争能力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物分离培养，特别涉及一种从石油污染土壤中分离优势解磷菌的方法。

技术介绍

1、利用微生物修复石油污染土壤是一种低成本、环境友好的技术方法。自然界中广泛分布着大量可以降解石油烃类物质的菌，通过这类微生物生长繁殖及新陈代谢过程利用石油烃类物质的特性，使有毒有害污染物转化为无毒化合物或气体进而被环境所接受。由于微生物生长繁殖过程中遗传物质的合成等过程需要磷元素，这将导致环境中磷有效性直接影响微生物的修复成效。

2、在传统的修复技术方法中，往往通过添加外源的磷肥来要调节污染环境中磷的含量。微生物对施入环境中磷肥利用效率极低，这将需要施入更大量的含磷外源物质来促进石油污染环境中的微生物的生长。大量磷营养物质的添加增加了修复成本，同时也势必会影响区域的生态环境系统安全。

3、解磷菌是一类在自然界中分布广泛的微生物，可以将土壤中难溶性磷酸盐转化为能被植物和微生物吸收利用的有效磷。先前研究发现石油污染土壤中存在大量的解磷微生物，且具有解磷功能的放线菌纲(actinomycetia)、嗜热油菌纲(thermoleophilia)和红本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种从石油污染土壤中分离优势解磷菌的方法，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述石油污染土壤解磷微生物群落组成分别采用phoD基因、phoC基因的通用引物phoD-F733/phoD-R1083、phoC-A-F1/phoC-A-R1通过高通量测序技术分析得到。

3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述通用引物phoD-F733的引物序列为5′-TGGGAYGATCAYGARGT-3′；所述通用引物phoD-R1083的引物序列为5′-CTGSGCSAKSACRTTCCA-3′；所述通用引物phoC-A-F1的引物序列为5′-CGGC...

【技术特征摘要】

1.一种从石油污染土壤中分离优势解磷菌的方法，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述石油污染土壤解磷微生物群落组成分别采用phod基因、phoc基因的通用引物phod-f733/phod-r1083、phoc-a-f1/phoc-a-r1通过高通量测序技术分析得到。

3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述通用引物phod-f733的引物序列为5′-tgggaygatcaygargt-3′；所述通用引物phod-r1083的引物序列为5′-ctgsgcsaksacrttcca-3′；所述通用引物phoc-a-f1的引物序列为5′-cggctcctatccgtccgg-3′；所述通用引物phoc-a-r1的引物序列为5′-caacatcgctttgccagtg-3′。

4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述石油污染土壤中优势解磷微生物种类包括假单胞菌属、鞘脂单胞菌属、链霉菌属和寡养单胞菌属。

5.根据权利要求4所述的方法，其中，建立优势解磷微生物种类与石油污染土壤有效磷含量以及磷酸酶活性的相关关系，筛选与石油污染土壤有效磷含量以及磷酸酶活性正相关的假单胞菌属的优势解磷菌包括：利用pearson相关性分析，...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜显元，李丹丹，李兴春，郑瑾，陈宏坤，王清威，宋权威，谢加才，
申请(专利权)人：中国石油天然气股份有限公司，
类型：发明
国别省市：