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用于检测羊肉的环介导等温扩增技术的引物组和试剂盒及其应用和检测方法技术

技术编号:43498032 阅读:19 留言:0更新日期:2024-11-29 17:04
本发明专利技术提供一种用于检测羊肉的环介导等温扩增技术的引物组和试剂盒及其应用和检测方法,检测简单、快速、成本低、灵敏可靠,该方法灵敏度可以达到10‑4ng/μl。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及食品安全与监督管理领域,特别是涉及用于检测羊肉的环介导等温扩增技术的引物组和试剂盒及其应用和检测方法


技术介绍

1、基于食品安全问题,尤其动物源性食品中的肉类掺杂和掺假事件频发,肉类检测技术的研究成为人们关注的焦点。目前,肉类检测技术主要包括聚合酶链式反应(pcr)技术、免疫学技术、分子生物学方法等。这些技术具有高灵敏度、高特异性、简便快速等特点,逐渐成为肉类检测的主流技术。因此我们选择基于环介导等温扩增技术(lamp)的检测方法,以期更好地完善肉类相关规定与标准,确保肉类品质的优良,保障人们肉食的安全性。

2、环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,lamp)即在等温条件下以高效、快速和高特异性扩增dna。采用dna聚合酶和四条到六条特异性引物,可识别靶dna上不同的序列,相较于传统pcr,其速度更快,且温度恒定。在环介导等温扩增中加入可视化染料,如钙黄绿素、羟基萘酚蓝(hnb)等,可使检测结果可视化。

3、羟基萘酚蓝(hnb)是一种金属指示剂,hnb染料法本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于检测羊肉的环介导等温扩增技术的引物组,其特征在于:由正向外引物F3、反向外引物B3、正向内引物FIP、反向内引物BIP和反向环引物LB组成;各引物序列如下:

2.根据权利要求1所述的引物组在检测羊源性组织中的应用。

3.一种用于检测羊肉的环介导等温扩增技术的试剂盒,其特征在于:包括权利要求1所述的引物组和染料羟基萘酚蓝。

4.根据权利要求3所述的用于检测羊肉的环介导等温扩增技术的试剂盒,其特征在于:还包括甜菜碱、PCR扩增缓冲液、MgSO4、dNTPs、DNA聚合酶和超纯水。

5.根据权利要求4所述的用于检测羊肉的环介导等温扩增...

【技术特征摘要】

1.一种用于检测羊肉的环介导等温扩增技术的引物组,其特征在于:由正向外引物f3、反向外引物b3、正向内引物fip、反向内引物bip和反向环引物lb组成;各引物序列如下:

2.根据权利要求1所述的引物组在检测羊源性组织中的应用。

3.一种用于检测羊肉的环介导等温扩增技术的试剂盒,其特征在于:包括权利要求1所述的引物组和染料羟基萘酚蓝。

4.根据权利要求3所述的用于检测羊肉的环介导等温扩增技术的试剂盒,其特征在于:还包括甜菜碱、pcr扩增缓冲液、mgso4、dntps、dna聚合酶和超纯水。

5.根据权利要求4所述的用于检测羊肉的环介导等温扩增技术的试剂盒,其特征在于:pcr扩增缓冲液为10x thermopol reaction buffer。

6.根据权利要求5所述的用于检测羊肉的环介导等温扩增技术的试剂盒,其特征在于:10x thermopol reaction buffer 为2.5μl, 8u/ μl 的bst dna为0.9μl ,100mm 的mgso4为0.8μl ,10mm的dntps为1.6μl,fip、bip、f3、b3、lb 的浓度均为10mm ,fip/bip:f3/b3体积比...

【专利技术属性】
技术研发人员:徐霞李静张楠屈凌波魏勇军
申请(专利权)人:郑州大学
类型:发明
国别省市:

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