一种血小板超微结构的全自动免疫荧光染色方法及系统技术方案

本发明专利技术公开了一种血小板超微结构全自动免疫荧光染色方法及系统，方法具体流程包括：打孔、封闭、一抗标记、一抗漂洗、二抗标记、二抗漂洗、再固定、PBS漂洗和封片。本发明专利技术的一种血小板超微结构全自动免疫荧光染色方法，能够全自动的实现各步骤对血小板样本的反应处理，能让技师从繁重且重复的工作脱离出来，解放了生产力，降低了血小板超微结构免疫荧光染色的成本，也避免了因人员操作水平不一、缺少标准化操作、实验随机性较大的弊端，进而减少了实验差异，极大提升了血小板免疫荧光染色质量的均一性，并满足使得检测操作符合可追溯的实验要求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医疗检测，更具体地，涉及一种血小板超微结构的全自动免疫荧光染色方法及系统。

技术介绍

1、血小板是血液的重要组成部分，蕴含着丰富的信息和复杂的抗原系统，如abo血型系统抗原、人类白细胞抗原以及血小板特异性抗原等。血小板的超微结构会受到疾病状态的显著影响。一项关于脑梗发病后的研究发现，24小时内，血小板的超微结构将发生包括伪足增多、片状聚集、α颗粒明显减少、线粒体显著减少，以及血小板膜多处破裂等显著改变。

2、通过超分辨荧光显微成像技术对血小板超微结构进行分析，开发构建健康人群血小板信息库、肿瘤液体活检血液标本专题库、不良心血管事件动态监测库等专有信息平台，具有速度快、成本低、灵敏度和特异度高等优点，对未来医疗液体活检领域具有十分重要的意义。在通过超分辨荧光显微成像技术对血小板超微结构进行分析之前，血小板样本需经历免疫荧光染色。免疫荧光染色技术利用了抗原与抗体高度特异性结合的原理，将某种可测定的物质偶联到抗体或者抗原上，通过检测标记物的有无和含量，对样品中待检抗原或抗体进行定性、定位和定量检测。

3、然而，目前血小板超微本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种血小板超微结构全自动免疫荧光染色方法，其特征在于，具体流程包括打孔、封闭、一抗标记、一抗漂洗、二抗标记、二抗漂洗、再固定、PBS漂洗和封片；

2.根据权利要求1所述的一种血小板超微结构全自动免疫荧光染色方法，其特征在于，所述打孔步骤采用的打孔液的成分为含0.05～0.2％TritonX-100的PBS溶液，吸取打孔液的体积为300～600μL，打孔液铺展在血小板样本上的反应时间为10～30min。

3.根据权利要求1所述的一种血小板超微结构全自动免疫荧光染色方法，其特征在于，所述封闭步骤采用的封闭液的成分为2～8％牛血清白蛋白和2～8％山羊血清的PBS溶液...

【技术特征摘要】

1.一种血小板超微结构全自动免疫荧光染色方法，其特征在于，具体流程包括打孔、封闭、一抗标记、一抗漂洗、二抗标记、二抗漂洗、再固定、pbs漂洗和封片；

2.根据权利要求1所述的一种血小板超微结构全自动免疫荧光染色方法，其特征在于，所述打孔步骤采用的打孔液的成分为含0.05～0.2％tritonx-100的pbs溶液，吸取打孔液的体积为300～600μl，打孔液铺展在血小板样本上的反应时间为10～30min。

3.根据权利要求1所述的一种血小板超微结构全自动免疫荧光染色方法，其特征在于，所述封闭步骤采用的封闭液的成分为2～8％牛血清白蛋白和2～8％山羊血清的pbs溶液，吸取封闭液的体积为300～600μl，封闭液铺展在血小板样本上的反应时间为0.5～2h。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的一种血小板超微结构全自动免疫荧光染色方法，其特征在于，所述一抗标记步骤采用的试剂的成分为按0.05～0.2％稀释的兔抗-vwf抗体/兔抗-α-tubulin抗体，吸取一抗试剂的体积为10～50μl，一抗试剂铺展在血小板样本上的反应时间为2～6h。

5.根据权利要求1-3中任一项所述的一种血小板超微结构全自动免疫荧光染色方法，其特征在于，所述一抗/二抗漂洗步骤采用的洗涤液的成分为含0.1％tween 20的pbs溶液，泵入洗涤液的体积为2～10ml，血小板样本在洗涤液中浸泡的时间为3～5min，洗涤的往复次数为3～5...

【专利技术属性】
技术研发人员：马严，郑婕，沈钢，刘智勇，廖广兰，蒋倩，胡潇雨，戴丽花，王强，
申请(专利权)人：武汉血液中心，
类型：发明
国别省市：