一种蛋白质等电聚焦电泳等电点的检测方法技术

本发明专利技术属于蛋白质的等电聚焦电泳等电点检测技术领域，具体地说，涉及一种蛋白质等电聚焦电泳等电点的检测方法。所述的蛋白质等电聚焦电泳等电点的检测方法，包括配制泡胶液、泡胶、供试品和对照品处理、电泳、固定及染色、结果扫描及分析，其中，所述的电泳包括预电泳、上样、等电聚焦和条带聚焦，其中所述的等电聚焦在电压800～1500V下维持150～210min；所述的条带聚焦在电压1300～2000V下维持40～90min。本发明专利技术方法操作简单，重复性好，可分次使用不造成浪费，检测结果不拖尾，蛋白不扩散。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于蛋白质的等电聚焦电泳等电点检测，具体地说，涉及一种蛋白质等电聚焦电泳等电点的检测方法。

技术介绍

1、等电聚焦电泳法(isoelectric focusing(ief)，also known aselectrofocusing)是两性电解质在电泳场中形成一个ph梯度，由于蛋白质为两性化合物，其所带的电荷与介质的ph值有关，带电的蛋白质在电泳中向极性相反的方向迁移，当达到其等电点时，电流达到最小，不再移动。从而达到检测蛋白质和多肽类供试品等电点的电泳方法。其优点是：有很高的分辨率，可将等电点相差0.01-0.02ph单位的蛋白质分开；一般电泳由于受扩散作用的影响，随着时间和所走的距离加长，区带越走越宽，而电聚焦能抵消扩散作用，使区带越走越窄；由于这种电聚焦作用，不管样品加在什么部位，都可聚焦到其等电点，很稀的样品也可进行分离；可直接测出蛋白质的等电点，其精确度可达0.01ph单位。ief技术应用广泛可用于蛋白质的定性鉴别，等电点测定、限度检查以及定量测定。

2、《中国药典》0541电泳法介绍了水平板电泳法。然而该方法配胶面积固定，如本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种蛋白质等电聚焦电泳等电点的检测方法，包括配制泡胶液、泡胶、供试品和对照品处理、电泳、固定及染色、结果扫描及分析，其特征在于，所述的电泳包括预电泳、上样、等电聚焦和条带聚焦，其中所述的等电聚焦在电压800～1500V下维持150～210min；所述的条带聚焦在电压1300～2000V下维持40～90min。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的电泳按如下电泳程序进行：

3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述的供试品和对照品处理包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，处理后的对照品和供试品的终浓...

【技术特征摘要】

1.一种蛋白质等电聚焦电泳等电点的检测方法，包括配制泡胶液、泡胶、供试品和对照品处理、电泳、固定及染色、结果扫描及分析，其特征在于，所述的电泳包括预电泳、上样、等电聚焦和条带聚焦，其中所述的等电聚焦在电压800～1500v下维持150～210min；所述的条带聚焦在电压1300～2000v下维持40～90min。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的电泳按如下电泳程序进行：

3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述的供试品和对照品处理包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，处理后的对照品和供试品的终浓度均为0.5～5mg/ml，优选2mg/ml。

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【专利技术属性】
技术研发人员：赵丽民，张静，王瑞玲，王建刚，吴明远，
申请(专利权)人：康立泰生物医药青岛有限公司，
类型：发明
国别省市：