CMB磁珠试剂盒及其在半胱氨酸修饰蛋白组学分析中的应用制造技术

本申请涉及生物检测技术领域，具体而言涉及CMB磁珠试剂盒及其在半胱氨酸修饰蛋白组学分析中的应用。CMB磁珠试剂盒，由CMB磁珠；N‑乙基马来酰亚胺；游离巯基选择性还原剂；硫醇类还原剂；含有4% SDS的PBS缓冲液；PBS缓冲液构成。在用于半胱氨酸修饰蛋白组学分析时，操作方法如下：待测蛋白经硫醇类还原剂还原、NEM封闭，丙酮法沉淀得B；B用4% SDS‑PBS复溶，与CMB磁珠孵育后，洗涤反应得特异性蛋白溶液，用于质谱分析/沉淀B酶解、脱盐后，与CMB磁珠孵育，得特异性氧化还原肽段，用于质谱分析。本申请利用CMB磁珠直接结合自由巯基，省略生物素标记步骤，简化流程、缩短时间，利于大样本队列研究，保持高通量稳定检测。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及生物检测，具体而言涉及cmb磁珠试剂盒及其在半胱氨酸修饰蛋白组学分析中的应用。

技术介绍

1、蛋白质作为细胞、组织的重要成分，是生命过程中生理功能的重要执行者和生命现象的直接体现者，对蛋白质功能活性的研究将有助于阐明其对生理或病理过程的调控机制，蛋白质组学能够分析获取生命过程中成千上万种蛋白功能活性的信息，可以在大规模水平上鉴定蛋白质的表达水平、修饰水平、相互作用等。

2、半胱氨酸是存在于多数蛋白质中频次较低的氨基酸，但由于其侧链巯基的化学活泼性使其展现出较强的内在活性，也成为多种蛋白质的功能活性位点。蛋白质半胱氨酸残基作为细胞内的还原性物质和与小分子介质作用的重要主体，对于维持和调控细胞内的氧化还原内环境起着重要作用。它们参与调控细胞识别、信号转导等多种生理过程，并与生物体内还原性物质变化的相关疾病有着密切的联系。

3、ros与rns可与半胱氨酸反应，形成几种氧化还原修饰（s-亚硝基化、s-谷胱甘肽化、分子间和分子内二硫键和s-巯基化）。在蛋白质组学领域中以生物素置换法对蛋白质半胱氨酸翻译后修饰进行检测的应用较为广泛，其本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.CMB磁珠试剂盒，其特征在于，所述磁珠试剂盒由:CMB磁珠，用量0.1-0.2ml/ml样品；N-乙基马来酰亚胺，用量0.8-1ml/ml样品；游离巯基选择性还原剂，用量0.6-0.8ml/ml样品；硫醇类还原剂，用量20-25μl/ml样品；含有百分比浓度为4% SDS的PBS缓冲液；PBS缓冲液构成。

2.根据权利要求1所述的CMB磁珠试剂盒，其特征在于，所述CMB磁珠为活化巯基磁珠，该活化巯基磁珠为表面结合有2-吡啶基二硫化物的超顺磁性球体，其中每克CMB磁珠结合25-35μmol的2-吡啶基二硫化物。

3.根据权利要求1所述的CMB磁珠试剂盒，其特征在...

【技术特征摘要】

1.cmb磁珠试剂盒，其特征在于，所述磁珠试剂盒由:cmb磁珠，用量0.1-0.2ml/ml样品；n-乙基马来酰亚胺，用量0.8-1ml/ml样品；游离巯基选择性还原剂，用量0.6-0.8ml/ml样品；硫醇类还原剂，用量20-25μl/ml样品；含有百分比浓度为4% sds的pbs缓冲液；pbs缓冲液构成。

2.根据权利要求1所述的cmb磁珠试剂盒，其特征在于，所述cmb磁珠为活化巯基磁珠，该活化巯基磁珠为表面结合有2-吡啶基二硫化物的超顺磁性球体，其中每克cmb磁珠结合25-35μmol的2-吡啶基二硫化物。...

【专利技术属性】
技术研发人员：呼建文，戴捷，
申请(专利权)人：上海拜谱生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：