用于人血浆中18-OHB及其干扰物鉴定并准确定量的液相色谱串联质谱方法技术

本发明专利技术涉及医学指标定量分析技术领域，尤其涉及一种用于人血浆中18‑OHB及其干扰物鉴定并准确定量的液相色谱串联质谱方法。本发明专利技术识别并鉴定了影响人血浆中18‑OHB准确定量的内源性干扰物质，确认内源性激素代谢物20α‑DHE对18‑OHB存在定量干扰，并首次建立了同步测定人血浆中18‑OHB与20α‑DHE的LC‑MS/MS定量方法。该方法性能优良，具有良好的回收率和检测精密度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医学指标定量分析，尤其涉及一种用于人血浆中18-ohb及其干扰物鉴定并准确定量的液相色谱串联质谱方法。

技术介绍

1、类固醇激素是一类经类固醇生成组织和/或器官合成分泌的具有环戊烷多氢菲母核的小分子物质，相对分子质量在200~400da。依据发挥的生物学效应差异，可以分为盐皮质激素、糖皮质激素、性激素（雄激素、雌激素和孕激素）三大类。其中，18-羟皮质酮（18-hydrocorticosterone，18-ohb）作为典型的盐皮质激素醛固酮的重要合成中间物质，在维持人体水盐平衡和正常血压方面具有重要生理意义，同时在高血压诊断和分型中发挥作用。

2、原发性醛固酮增多症（praimary aldosteronism，pa）作为最常见的继发性高血压类型，依据对治疗手段的有效性差异可大致区分为醛固酮腺瘤（aldosterone-producingadenoma，apa）和双侧肾上腺增生（bilateral adrenal hyperplasia，bah）。前者对肾上腺切除术敏感而后者对螺内酯等降压药物治疗有效（funder jw, car本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.用于人血浆中18-OHB和20α-DHE准确定量的液相色谱串联质谱方法，其特征在于，包括：在液相色谱过程中，选用含有0.025±0.005mM氟化铵的去离子水作为流动相A，选用乙腈作为流动相B，利用梯度洗脱分离人血浆样品中的18-OHB和20α-DHE，对分离后的18-OHB和20α-DHE进行同步定量。

2.根据权利要求1所述用于人血浆中18-OHB和20α-DHE准确定量的液相色谱串联质谱方法，其特征在于，洗脱梯度为：0-1min, 16% B, 1-6min, 16%-20% B, 6-9min, 20%-95%B, 9-10min, 95%B, 10min, 16...

【技术特征摘要】

1.用于人血浆中18-ohb和20α-dhe准确定量的液相色谱串联质谱方法，其特征在于，包括：在液相色谱过程中，选用含有0.025±0.005mm氟化铵的去离子水作为流动相a，选用乙腈作为流动相b，利用梯度洗脱分离人血浆样品中的18-ohb和20α-dhe，对分离后的18-ohb和20α-dhe进行同步定量。

2.根据权利要求1所述用于人血浆中18-ohb和20α-dhe准确定量的液相色谱串联质谱方法，其特征在于，洗脱梯度为：0-1min, 16% b, 1-6min, 16%-20% b, 6-9min, 20%-95%b, 9-10min, 95%b, 10min, 16% b。

3.根据权利要求1或2所述用于人血浆中18-ohb和20α-dhe准确定量的液相色谱串联质谱方法，其特征在于，色谱柱选用waters acquity uplc beh c8 column ；

4.根据权利要求1-3任意一项所述用于人血浆中18-ohb和20α-dhe准确定量的液相色谱串联质谱方法，其特征在于，还包括：对分离后的内源性干扰物20α-dhe进行分离和定量。

5.根据权利要求1-4任意一项所述用于人血浆中18-ohb和20α-dhe准确定量的液相色谱串联质谱方法，其特征在于，18-ohb在质谱中所产生的检测信号的母离子具有363.160±0.5的质荷比；包含质荷比为146.990±0.5、269.075±0.5的子离子；驻留时间为0.025±0.01msec；锥孔电压为40±2 v；碰撞能为16±2 ev。

6.根据权利要求1-5任意一项所述用于人血浆中18-ohb和20α-dhe准确定量的液相色谱串联质谱方法，其特征在于，20α-dhe在质谱中所产生的检测信号的母离子具有363.170±0.5的质荷比；包含质荷比为163.130±0.5、267.140±0.5的子离子；驻留时间为0.025±0.01msec；锥孔电压为6.0±2.0 v；碰撞能为...

【专利技术属性】
技术研发人员：禹松林，邱玲，钟健，马晓丽，
申请(专利权)人：中国医学科学院北京协和医院，
类型：发明
国别省市：