具有优化的表型的STAR-T细胞及其应用制造技术

本发明专利技术涉及免疫治疗领域，具体地，本发明专利技术涉及具有优化的表型的合成型T细胞抗原受体T细胞(Synthetic T‑Cell Antigen Receptor T‑Cell,STAR‑T)，例如，所述STAR‑T涉及一个或多个T细胞内源基因的敲除或敲低，例如，所述STAR‑T可作为通用型STAR‑T(USTAR‑T)使用。此外，本发明专利技术还涉及所述STAR‑T的制备方法及其用途。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及免疫治疗领域，具体地，本专利技术涉及具有优化的表型的合成型t细胞抗原受体t细胞(synthetic t-cell antigen receptor t-cell,star-t)，例如，所述star-t涉及一个或多个t细胞内源基因的敲除或敲低，例如，所述star-t可作为通用型star-t(ustar-t)使用。此外，本专利技术还涉及所述star-t的制备方法及其用途。

技术介绍

1、目前，car-t(chimeric antigen receptor t-cell immunotherapy)细胞治疗在白血病和淋巴瘤中取得显著的治疗进展，但car-t细胞治疗过程当中容易引起不良免疫反应，包括细胞因子释放综合征(crs)、神经毒性、肿瘤溶解综合征(tls)甚至靶上脱瘤毒性(on-target off-tumor toxicity)。此外，异体移植由于受者tcr可识别同种异型mhc分子并产生免疫应答，移植物抗宿主病(gvhd)是供体淋巴细胞输注的一个主要限制。t细胞疗法未能在实体瘤治疗中取得较好疗效有多重因素，其中一个重要原因是car-t细胞在肿本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.表达特异性结合肿瘤相关抗原的合成型T细胞抗原受体(STAR)的工程T细胞，其中，所述工程T细胞包含插入在内源TRAC基因座的外源核酸分子，所述插入导致所述内源TRAC基因表达沉默；并且，所述外源核酸分子包含编码STAR的核苷酸序列以及编码靶向一个或多个T细胞内源基因的shRNA的核苷酸序列；

2.权利要求1的工程T细胞，其中，针对所述一个或多个T细胞内源基因中的任意一个内源基因，所述外源核酸分子包含编码靶向其的一种或多种shRNA的核苷酸序列；其中，每一种所述shRNA的编码核苷酸序列各自独立地含有一个或多个拷贝；

3.权利要求1或2的工程T细胞，其中，所述s...

【技术特征摘要】

1.表达特异性结合肿瘤相关抗原的合成型t细胞抗原受体(star)的工程t细胞，其中，所述工程t细胞包含插入在内源trac基因座的外源核酸分子，所述插入导致所述内源trac基因表达沉默；并且，所述外源核酸分子包含编码star的核苷酸序列以及编码靶向一个或多个t细胞内源基因的shrna的核苷酸序列；

2.权利要求1的工程t细胞，其中，针对所述一个或多个t细胞内源基因中的任意一个内源基因，所述外源核酸分子包含编码靶向其的一种或多种shrna的核苷酸序列；其中，每一种所述shrna的编码核苷酸序列各自独立地含有一个或多个拷贝；

3.权利要求1或2的工程t细胞，其中，所述shrna包含与其所靶向的内源基因中的靶序列互补的第一区域，与所述第一区域呈反向且互补的第二区域，以及，茎环区域；

4.权利要求1-3任一项的工程t细胞，其中，所述shrna为mir-shrna；

5.权利要求1-4任一项的工程t细胞，其中，所述shrna的表达由所述t细胞内源trac基因的内源启动子所启动；

6.权利要求1-5任一项的工程t细胞，其中，所述第一肽链和/或所述第二肽链各自独立地进一步包含共刺激因子ox40；

7.权利要求1-6任一项的工程t细胞，其中，所述shrna靶向一个或多个选自以下的t细胞内源基因：

8.权利要求1-7任一项的工程t细胞，其中，所述shrna靶向pd-1、tim3、lag-3、tigit、nr4a1、bcor、tet2、regnase1、roquin、rasa2中的一个或其任意组合(例如，两两组合)；

9.权利要求1-8任一项的工程t细胞，其中，所述shrna靶向pd-1，nr4a1或其任意组合；

10.权利要求1-9任一项的工程t细胞，其具备选自以下特征的一项或多项：

11.权利要求1-10任一项的工程t细胞，其中，所述shrna包含：靶向pd-1的第一靶序列的第一shrna，靶向pd-1的第二靶序列的第二shrna；其中，

12.权利要求1-10任一项的工程t细胞，其中，所述shrna包含：靶向nr4a1的第一靶序列的第一shrna，靶向nr4a1的第二靶序列的第二shrna；

13.权利要求1-10任一项的工程t细胞，其中，所述shrna包含：靶向pd-1的第一shrna，靶向nr4a1的第二shrna；

14.权利要求1-10任一项的工程t细胞，其中，所述shrna包含：靶向pd-1的第一靶序列的第一shrna，靶向pd-1的第二靶序列的第二shrna，靶向nr4a1的第一靶序列的第三shrna，靶向nr4a1的第二靶序列的第四shrna；

15.权利要求1-14任一项的工程t细胞，其中，所述shrna的编码核苷酸序列包含如seqid no:31-54、56-66任一项所示的序列。

16.权利要求1-15任一项的工程t细胞，其中，所述star能够与所述工程t细胞内源的cd3亚基(例如，ε,δ,γ,ζ亚基中的一个或多个)形成复合体。

17.权利要求1-16任一项的工程t细胞，其具备选自以下特征的一项或多项：

18.权利要求1-17任一项的工程t细胞，其中，所述第一恒定区是天然t细胞受体α链恒定区的变体，其相对于天然t细胞受体α链恒定区包含半胱氨酸取代；

19.权利要求1-18任一项的工程t细胞，其中，所述第二恒定区是天然t细胞受体β链恒定区的变体，其相对于天然t细胞受体β链恒定区包含半胱氨酸取代；

20.权利要求1-19任一项的工程t细胞，其中，所述肿瘤相关抗原选自cd19、egfr、cd20、c...

【专利技术属性】
技术研发人员：兰玲，马文博，王嘉盛，林欣，
申请(专利权)人：北京昌平实验室，
类型：发明
国别省市：