工程化大肠杆菌及其应用制造技术

本公开提供了一种工程化大肠杆菌及其应用，涉及生物技术领域，本公开所提供的工程菌敲除了天然I型菌毛，在不改变工程菌生长情况和形态太小的情况下可有效降低工程菌的非特异性靶向黏附率，可通过替换工程菌人工合成黏附素(intimin或YeeJ)胞外的单域抗体序列，实现灵活靶向各种目的细胞，有潜力成为精准治疗工具包。使抗原抗体的结合在细胞层面可视化，且方便省时，为抗体筛选工作中抗体亲和力的评估提供了有力工具。本公开所提供的工程菌能够特异性的在肿瘤内部定植，具有一定肿瘤生长抑制效应，且具有较高的生物安全性。进一步地，在靶向粘附的基础上增加细胞毒性分子，能够加速诱导肿瘤细胞凋亡，具有显著的抗癌作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及一种工程化大肠杆菌及其应用。

技术介绍

1、癌症相关成纤维细胞(cancer-associatedfibroblast,caf)作为肿瘤微环境中最丰富的基质成分之一，能够提高肿瘤免疫逃逸、远端迁移和局部耐药的能力，已经是被广泛研究的肿瘤治疗靶细胞。针对caf表面高特异性表达的成纤维细胞激活蛋白(fibroblastactivated protein,fap)生物标志物,目前靶向癌症相关成纤维细胞的策略有fap抗体、fap抑制剂、靶向fap的脂质体颗粒(fap-lnps)、fap疫苗、靶向fap的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,car)t细胞等。理想的靶向cafs的策略应该要具备安全性高，能够持续有效消除cafs的促肿瘤功能并激活体内抗肿瘤免疫反应的双重效果，并且成本适宜等条件。现有策略中，脂质体的体内应用存在着潜在的全身毒性的问题；car-t的个性化制备及应用存在时间及资金的高消耗且持久性不强、临床效果较差的问题；针对fap的dna疫苗和病毒载体疫苗虽具备持续性免疫潜力，但效率较低所需剂量较大，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种工程化大肠杆菌，所述工程化大肠杆菌被敲除了I型菌毛fimA～fimH操纵子中的一个或多个编码基因，且

2.根据权利要求1所述的工程化大肠杆菌，其特征在于，所述工程化大肠杆菌的基因组具有如SEQ ID NO:25或26所示的核苷酸序列，或与其具有至少65％同一性的核苷酸序列。

3.根据权利要求1所述的工程化大肠杆菌，其特征在于，所述工程化大肠杆菌选自BL21、MG1655、DH5α、Transetta、RosettaBlue、Origami、Rosetta或Trans5α。

4.根据权利要求1所述的工程化大肠杆菌，其特征在于，所述膜锚定结构域包括...

【技术特征摘要】

1.一种工程化大肠杆菌，所述工程化大肠杆菌被敲除了i型菌毛fima～fimh操纵子中的一个或多个编码基因，且

2.根据权利要求1所述的工程化大肠杆菌，其特征在于，所述工程化大肠杆菌的基因组具有如seq id no:25或26所示的核苷酸序列，或与其具有至少65％同一性的核苷酸序列。

3.根据权利要求1所述的工程化大肠杆菌，其特征在于，所述工程化大肠杆菌选自bl21、mg1655、dh5α、transetta、rosettablue、origami、rosetta或trans5α。

4.根据权利要求1所述的工程化大肠杆菌，其特征在于，所述膜锚定结构域包括紧密粘附素或紧密粘附素样黏附素的全长或其片段。

5.根据权利要求1所述的工程化大肠杆菌，其特征在于，所述膜锚定结构域包括如seqid no:1或2所示的氨基酸序列，或与其具有至少85％序列一致性的氨基酸序列。

6.根据权利要求1所述的工程化大肠杆菌，其特征在于，所述靶向结构域包括特异性结合肿瘤细胞的抗体或其抗原结合片段。

7.根据权利要求1所述的工程化大肠杆菌，其特征在于，所述靶向结构域包括抗成纤维细胞激活蛋白的单域抗体。

8.根据权利要求1所述的工程化大肠杆菌，其特征在于，所述大肠杆菌还包括细胞毒性分子或其活性片段。

9.根据权利要求8所述的工程化大肠杆菌，其特征在于，所述细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁卓斌，徐梦迪，
申请(专利权)人：深圳湾实验室，
类型：发明
国别省市：