快速检测尿液中大肠埃希菌的荧光定量PCR试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种快速检测尿液中大肠埃希菌的荧光定量ＰＣＲ试剂盒，涉及一种泌尿道感染病原体基因检测技术，适用于尿液中大肠埃希菌定性定量检测。本发明专利技术由荧光定量ＰＣＲ反应液、标准阳性模板、阴性质控标准品组成；荧光定量ＰＣＲ反应液含有正向引物、反向引物和荧光染料。本发明专利技术定量准确；检测速度快；特异性好，灵敏度高；步骤简单，可重复性高；可同时进行高通量的样品检测。不仅可对尿液中大肠埃希菌进行定量检测，并可替代一直沿用的传统的培养法的诊断方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种泌尿道感染性疾病病原体基因检测技术，尤其涉及一种快速检测尿液中大肠埃希菌(Escherichia coli，E.coli)的荧光定量PCR(聚合酶链式反应)试剂盒，适用于大肠埃希菌定性定量检测。
技术介绍
泌尿道感染是一种常见的细菌性感染疾病。在我国的医院感染中，泌尿道感染仅次于肺部感染，位于第2位。大肠埃希菌(大肠埃希菌)是泌尿道感染分离率最高的病原菌。大肠埃希菌是一种条件致病菌，正常情况下定植于人体下消化道，属于肠道正常菌群，一定条件下易逆行至尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎及周围组织炎症等多种感染性疾病。临床表现为尿频、尿急、尿痛、尿浑浊；严重病人有发热、寒战、恶心、呕吐、腹痛甚至可以发展为败血症等。大肠埃希菌导致的泌尿道感染一般起病较急，应及时治疗，否则可反复发作，迁延不愈而转为慢性感染。近年来发展起来的荧光定量PCR(Fluorescence Quantitative PCR，FQ-PCR)技术以其灵敏度高、速度快、特异性强等优点在基因表达水平分析(Nellemann C，Vinggaard AM，Dalgaard M，et al.Quantification 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速检测尿液中大肠埃希菌的荧光定量ＰＣＲ试剂盒，其特征在于：　由荧光定量ＰＣＲ反应液、标准阳性模板、阴性质控标准品组成；　荧光定量ＰＣＲ反应液含有正向引物、反向引物和ＳＹＢＲ　Ｇｒｅｅｎ　Ｉ荧光染料；　正向引物为５′－ ｔｇｔｇｇｃａａｃａｇｇｇａｔｃａａｇａ－３′；　反向引物为５′－ｔｔｃａｇｃｇａｔｔｔｇａｃｇｇａｔｔｇ－３′；　标准阳性模板是从大肠埃希菌细菌标准菌株中提取的大肠埃希菌细菌组ＤＮＡ；　所述的ＰＣＲ即聚合酶链式反应。

【技术特征摘要】
1、一种快速检测尿液中大肠埃希菌的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于：由荧光定量PCR反应液、标准阳性模板、阴性质控标准品组成；荧光定量PCR反应液含有正向引物、反向引物和SYBR Green I荧光染料；正向引物为5′-tgtggcaacagggatcaaga-3′；反向引物为5′-ttcagcgatttgacggattg-3′；标准阳性模板是从大肠埃希菌细菌标准菌株中提取的大肠埃希菌细菌组DNA；所述的PCR...

【专利技术属性】
技术研发人员：李艳，汪明，潘小平，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]