【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及天然产物提取，具体涉及黄晶果鲜果皮多酚提取物的制备方法及其在乙酰胆碱酯酶抑制剂中的应用。
技术介绍
1、乙酰胆碱酯酶抑制剂主要用于治疗阿尔茨海默病、运动失调、重症肌无力等多种神经系统疾病。现有的已上市应用于临床上的乙酰胆碱酯酶抑制剂包括多奈哌齐、他克林、溴新斯的明等，然而这些抑制剂大多为合成或半合成药物，长期或大量服用会出现明显的毒副作用，从而使其应用受到了一定的限制。而天然产物因其种类丰富、化学成分多样，毒副作用小且安全性高，适合天然酶抑制剂的筛选与开发。
2、巴西民间医学文献早已记了黄晶果果皮的药用用途，现代研究也表明黄晶果果皮具有调节肠道、抗菌、降血糖等诸多功效，但因黄晶果果皮为黄金果的副产物质地坚韧，不可食用，故日常生产中除少量发酵后用作肥料，大多将其废弃，对环境造成污染。因此，合理利用黄晶果果皮并开发其药用价值，有助于实现天然产物的可持续发展和生态环境的优化。而黄晶果果皮中活性成分尤其是多酚的提取分离工艺是黄晶果鲜果皮药用研究中不可缺少的环节。然而，由于多酚类化合物化学结构不稳定，使遇光、热和氧气易被氧化破坏，故在提取过程中保护多酚类物质不被破坏具有一定难度。此外，黄晶果鲜果皮内含有的多酚氧化酶会催化酚类化合物的氧化反应，将多酚氧化成醌类化合物。因此，在提高黄晶果鲜果皮多酚提取率的同时，最大程度地保留多酚活性是亟待解决的问题。
技术实现思路
1、本专利技术要解决的技术问题在于提供黄晶果鲜果皮多酚的制备方法及应用，本专利技术提供了提取效率高且最大程
2、为了实现本专利技术目的，本专利技术采用的具体技术方案为：
3、一种黄晶果鲜果皮多酚提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
4、(1)取新鲜黄晶果果皮，放入保鲜袋中除氧、封口、钝烫。冷冻后切碎、混匀；
5、(2)将黄晶果果皮碎粒与溶液a混合，得到混合液；
6、(3)将混合液超声浸提1～5次，抽滤，合并滤液，浓缩，得到浓缩液；
7、(4)将浓缩液经大孔树脂，乙醇溶液洗脱纯化，即得黄晶果鲜果皮多酚提取物。
8、优选的，步骤(1)中所述黄晶果鲜果皮除氧操作涉及到抽真空、充氦气、充氩气、充氮气；钝烫时间为1～10min。
9、优选的，步骤(2)所述溶液a由亚硫酸钠、焦亚硫酸钠、谷氨酸钠、l-半胱氨酸、抗坏血酸和乙醇组成，按质量百分数计，所述溶液a由0～1.5％的亚硫酸钠、0～2％的焦亚硫酸钠、0～0.5％谷氨酸钠，0～0.8％的l-半胱氨酸、0～3.5％的抗坏血酸和0～65％的乙醇组成，所述黄晶果鲜果皮与溶液a的质量体积比为1∶5～60(w/v)。
10、优选的，步骤(3)中所述超声的温度为30～60℃，超声功率为160～480w，每次超声时间为10～60min。所述浓缩为低温减压浓缩，浓缩温度为45～50℃。
11、优选的，步骤(4)中所述大孔树脂树脂型号包括ab-8、xda-7、hpd100和d101。
12、优选的，步骤(4)中所述纯化的步骤包括：采用湿法上样的方法，先用蒸馏水洗脱1～2个柱体积，弃去洗脱液，然后用乙醇溶液洗脱2～3个柱体积，收集洗脱液，浓缩，干燥，即得黄晶果鲜果皮多酚提取物，所述乙醇溶液的质量浓度为60～100％。
13、优选的，步骤(4)中所述的干燥为冷冻干燥，冷冻干燥的具体步骤为：于-20～-40℃预冻4h，保持冷阱温度-40～-55℃、真空度110000.0pa条件下，冷冻干燥12～36h；于20～30℃二次干燥，时间为1～3h。
14、本专利技术还涉及上述制备方法制备的黄晶果鲜果皮多酚提取物。
15、优选地，所述黄晶果鲜果皮多酚提取物的总多酚含量为180～400mg没食子酸当量(gae)/g·干重(dw)，总黄酮含量为30～70mg芦丁当量(re)/g·干重(dw)。
16、本专利技术还涉及上述黄晶果鲜果皮多酚在制备乙酰胆碱酯酶抑制剂中的应用。
17、本专利技术与现有技术相比，其有益效果为：
18、(1)本专利技术在样品前处理方面采用了隔绝氧气后钝烫去除多酚氧化酶的方法，最大程度的消除多酚氧化酶在黄晶果鲜果皮多酚提取过程中的影响；
19、(2)本专利技术在提取过程中添加焦亚硫酸钠和谷氨酸钠等抗氧化剂，避免提取过程中黄晶果鲜果皮多酚接触到氧气而发生氧化反应；
20、(3)本专利技术提取工艺简单，使用超声辅助提取法，设备方便、成本低、乙醇可回收循环利用、不存在溶剂残留问题，符合绿色环保概念，满足工业化大规模生产的需求；
21、(4)本专利技术制得的黄晶果鲜果皮多酚提取率高，多酚活性保持良好；
22、(5)本专利技术制得的黄晶果鲜果皮多酚具有优异的乙酰胆碱酯酶抑制活性。
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1.一种黄晶果鲜果皮多酚提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2. 根据权利要求1所述的黄晶果鲜果皮多酚提取物制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述黄晶果鲜果皮除氧操作涉及到抽真空、充氦气、充氩气和充氮气；钝烫时间为1~10min。
3. 根据权利要求1所述的黄晶果鲜果皮多酚提取物制备方法，其特征在于，步骤（2）所述溶液A由亚硫酸钠、焦亚硫酸钠、谷氨酸钠、L-半胱氨酸、抗坏血酸和乙醇组成按质量百分数计，所述溶液A由0~1.5 %的亚硫酸钠、0~2 %的焦亚硫酸钠、0~0.5 %谷氨酸氨、0~0.8 %的L-半胱氨酸、0~3.5 %的抗坏血酸和0~65 %的乙醇组成，所述黄晶果鲜果皮与溶液A的质量体积比为1∶5～60 (w/v)。
4. 根据权利要求1所述的黄晶果鲜果皮多酚提取物制备方法，其特征在于，步骤（3）中所述超声的温度为30~60 ℃，超声功率为160w~480 w，每次超声时间为10~60 min。所述浓缩为低温减压浓缩，浓缩温度为45~50 ℃。
5. 根据权利要求1~5所述的黄晶果鲜果皮多酚提取物制备方法，其特征
6. 根据权利要求5所述的黄晶果鲜果皮多酚提取物制备方法，其特征在于，所述的干燥为冷冻干燥，冷冻干燥的具体步骤为：于-20 ~ -40 ℃预冻4 h，保持冷阱温度-40 ~ -55℃、真空度110000.0 Pa条件下，冷冻干燥12~36 h；于20~30 ℃二次干燥，时间为1~3 h。
7.权利要求1~6任意一项所述的黄晶果多酚提取物的制备方法制得的黄晶果鲜果皮多酚提取物。
8. 根据权利要求7所述的黄晶果鲜果皮多酚提取物，其特征在于，所述黄晶果鲜果皮多酚提取物的总多酚含量为180~400 mg GAE/g·DW。
9.权利要求7所述的黄晶果鲜果皮多酚提取物在制备乙酰胆碱酯酶抑制剂中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种黄晶果鲜果皮多酚提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2. 根据权利要求1所述的黄晶果鲜果皮多酚提取物制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述黄晶果鲜果皮除氧操作涉及到抽真空、充氦气、充氩气和充氮气；钝烫时间为1~10min。
3. 根据权利要求1所述的黄晶果鲜果皮多酚提取物制备方法，其特征在于，步骤（2）所述溶液a由亚硫酸钠、焦亚硫酸钠、谷氨酸钠、l-半胱氨酸、抗坏血酸和乙醇组成按质量百分数计，所述溶液a由0~1.5 %的亚硫酸钠、0~2 %的焦亚硫酸钠、0~0.5 %谷氨酸氨、0~0.8 %的l-半胱氨酸、0~3.5 %的抗坏血酸和0~65 %的乙醇组成，所述黄晶果鲜果皮与溶液a的质量体积比为1∶5～60 (w/v)。
4. 根据权利要求1所述的黄晶果鲜果皮多酚提取物制备方法，其特征在于，步骤（3）中所述超声的温度为30~60 ℃，超声功率为160w~480 w，每次超声时间为10~60 min。所述浓缩为低温减压浓缩，浓缩温度为45~50 ℃。
5. 根据权利要求1~5所述的黄晶果鲜果...
【专利技术属性】
技术研发人员：李姣姣，姜筝，李欣欣，许瑞波，刘强，沈金阳，高珣，
申请(专利权)人：江苏海洋大学，
类型：发明
国别省市：
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