一种5-羟色氨酸生产菌株及其构建方法与应用技术

本发明专利技术提供了一种5‑羟色氨酸生产菌株及其构建方法与应用，所述菌株遗传背景清晰，在5‑羟基色氨酸生产菌E.coli HTP11的基础上异源引入枯草芽孢来源的purF<subgt;bsu</subgt;<supgt;K316Q</supgt;突变基因，上调了菌株E.coli HTP11的guaB、guaA、gmk、ndk基因的转录水平，异源引入了谷氨酸棒杆菌来源的gapX基因，缺失了芳香族氨基酸内转运蛋白serB、tnaB、aroP基因，上调了内膜外排转运蛋白yhjV基因的转录水平，并电转入pTm‑serB质粒，能够稳定的提供5‑羟基色氨酸的直接前体物5‑羟色氨酸，具有高效的5‑羟基色氨酸输出能力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及化合物生物技术生产领域，尤其是一种5-羟色氨酸生产菌株及其构建方法与应用。

技术介绍

1、5-羟基色氨酸(5-hydroxytryptophan，5-htp)，化学名称为5-羟基-3-吲哚基-α-氨基丙酸，是神经递质5-羟色胺生物合成的前体，可有效治疗多种疾病，如抑郁症、纤维肌痛、肥胖、失眠和慢性头痛等。近年来，随着5-htp功能的挖掘，5-htp成为最具商业价值的小品种氨基酸之一。

2、我国是5-htp的主要生产国，且天然产物合成法仍是5-htp的主要生产方法，该方法利用非洲植物加纳的种子作为原料，经一系列复杂工序处理，最终得到5-htp纯品。虽然能得到纯度较高的5-htp产品，但其原料成本较高，植物提取环保压力较大；酶催化法由于需要添加前体物色氨酸，且酶催化过程需要辅酶参与，成本较高。

3、现阶段，微生物直接发酵法因其具有成本低廉、过程简单、易于工业化等优势，成为替代目前生产方法的首选，有待进一步开发利用。

技术实现思路

1、本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种5本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种5-羟色氨酸生产菌株，其特征在于：是在菌株E.coli HTP11基因组中异源引入枯草芽孢来源的purFbsuK316Q 突变基因，上调了菌株E.coli HTP11的guaB、guaA、gmk、ndk基因的转录水平，异源引入了谷氨酸棒杆菌来源的gapX基因，缺失了serB基因、tnaB基因、aroP基因，上调了内膜外排转运蛋白yhjV基因的转录水平，并电转入pTm-serB质粒得到的。

2.根据权利要求1所述的5-羟色氨酸生产菌株，其特征在于：将枯草芽孢来源的purFbsuK316Q 突变基因整合至基因组上，并利用trc启动子强化表达；将谷氨酸棒杆菌来源的gapX基...

【技术特征摘要】

1.一种5-羟色氨酸生产菌株，其特征在于：是在菌株e.coli htp11基因组中异源引入枯草芽孢来源的purfbsuk316q 突变基因，上调了菌株e.coli htp11的guab、guaa、gmk、ndk基因的转录水平，异源引入了谷氨酸棒杆菌来源的gapx基因，缺失了serb基因、tnab基因、arop基因，上调了内膜外排转运蛋白yhjv基因的转录水平，并电转入ptm-serb质粒得到的。

2.根据权利要求1所述的5-羟色氨酸生产菌株，其特征在于：将枯草芽孢来源的purfbsuk316q 突变基因整合至基因组上，并利用trc启动子强化表达；将谷氨酸棒杆菌来源的gapx基因整合至基因组上，并利用trc启动子强化表达；将guab基因、guaa基因、yhjv基因过表达至基因组上，并利用trc启动子强化表达；将gmk基因、ndk基因过表达至基因组上，并利用lac启动子强化表达；敲除了菌株基因组上的serb基因、tnab基因、arop基因。

3.根据权利要求2所述的5-羟色氨酸生产菌株，其特征在于：所述lac启动子的核苷酸序列如序列表seq id no.1所示，所述trc启动子的核苷酸序列如序列表seq id no.2所示，所述purfbsuk316q 突变基因的核苷酸序列如序列表seq id no.3所示，所述gapx基因的核苷酸序列如序列表seq id no.4所示，所述guab基因的核苷酸序列如序列表seq id no.5所示，所述guaa基因的核苷酸序列如序列表seq id no.6所示，所述gmk基因的核苷酸序列如序列表seq id no.7所示，所述ndk基因的核苷酸序列如序列表seq id no.8所示，所述yhjv基因的核苷酸序...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐庆阳，余子辰，白玉，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：