用于治疗TNF-*相关病症的人抗体的制剂制造技术

描述了一种液体含水药物制剂，它具有高蛋白浓度，ｐＨ为大约４－８，并且具有增强的稳定性。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

技术介绍
肿瘤坏死因子α(TNFα)是由多种类型的细胞产生的细胞因子，包括单核细胞和巨噬细胞，最初是根据它们诱导某些小鼠肿瘤坏死的能力鉴定的(例如，参见，Old，L.(1985)Science 230630-632)。随后，证实了与恶病质相关的被称为恶病质蛋白的因子是与TNFα相同的分子。业已证实了TNFα与介导休克相关(例如，参见，Beutler，B.和Cerami，A.(1988)Annu.Rev.Biochem.57505-518；Beutler，B.and Cerami，A.(1989)Annu.Rev.Immunol.7625-655)。另外，业已证实了TNFα与多种其他人类疾病和失调的病理生理学相关，包括脓毒症，感染，自身免疫性疾病，移植排斥和移植物抗宿主病(例如，参见，Moeller，A.，等(1990)Cytokine 2162-169；Moeller等的美国专利5,231,024；Moeller，A.等的欧洲专利公开260 610 B1，Vasilli，P.(1992)Annu.Rev.Immunol.10411-452；Tracey，K.J.和Cerami，A.(1994)Annu.Rev.Med.45491-503)。由于人TNFα(hTNFα)在多种人类疾病中的有害作用，业已设计了治疗方案，以抑制或抵消hTNFα活性。具体地讲，业已寻求能结合并且中和hTNFα的抗体，作为抑制hTNFα活性的手段。所述抗体中的一些最早的抗体是由杂交瘤分泌的小鼠单克隆抗体(mAbs)，所述杂交瘤是用hTNFα免疫的小鼠的淋巴细胞制备的(例如，参见，Hahn T；等，(1985)Proc Natl Acad Sci USA 823814-3818；Liang，C-M.，等(1986)Biochem.Biophys.Res.Commun.137847-854；Hirai，M.，等(1987)J.Immunol.Methods 9657-62；Fendly，B.M.，等(1987)Hybridoma 6359-370；Moeller，A.，等(1990)Cytokine 2162-169；Moeller等的美国专利5,231,024；Wallach，D.的欧洲专利公开186 833 B1；Old等的欧洲专利申请公开218 868 A1；Moeller，A.等的欧洲专利公开260 610 B1)。尽管这些小鼠抗-hTNFα抗体通常表现出对hTNFα的高的亲和力(例如，Kd≤10-9M)，并且能够中和hTNFα活性，它们在体内的应用可能会受到与将小鼠抗体用于人类相关的问题的制约，如短的血清半衰期，不能够诱导某些人效应物功能，并且在人体内引发不希望的对所述小鼠抗体的免疫反应(″人抗-小鼠抗体″(HAMA)反应)。为了克服与将全鼠抗体用于人体相关的问题，业已通过遗传工程方法使鼠抗-hTNFα抗体更“人样”。例如，业已制备了嵌合抗体，其中，所述抗体链的可变区是源于鼠的，而所述抗体链的恒定区是源于人的(Knight，D.M，等(1993)Mol.Immunol.301443-1453；Daddona，P.E.，等的PCT公开WO 92/16553)。另外，业已制备了人源化抗体，其中，所述抗体可变区的高变区是源于鼠的，而所述可变区的其余部分和抗体恒定区是源于人的(Adair，J.R.等的PCT公开WO 92/11383)。不过，由于所述嵌合的和人源化抗体仍然保持了某些鼠序列，它们仍然会诱导不希望的免疫反应，所述人抗-嵌合抗体(HACA)反应，特别是在长期施用时的反应，例如，用于慢性疾病，如类风湿关节炎时更是如此(例如，参见，Elliott，M.J.，等(1994)Lancet 3441125-1127；Elliot，M.J.，等(1994)Lancet 3441105-1110)。对鼠mAbs或其衍生物(例如，嵌合的或人源化抗体)的优选的hTNFα抑制剂将是全人的抗hTNFα抗体，因为这种试剂不会引起HAMA反应，即使是长期使用时也是如此。业已利用杂交瘤技术制备了抗hTNFα的人单克隆自身抗体(Boyle，P.，等(1993)Cell.Immunol.152556-568；Boyle，P.，等(1993)Cell.Immunol.152569-581；Boyle等的欧洲专利申请公开614 984 A2)。不过，据报导，所述杂交瘤衍生的单克隆自身抗体对hTNFα的亲和力太低，以至于不能通过常规方法计算，这种抗体不能结合可溶性hTNFα，并且不能中和hTNFα-诱导的细胞毒性(参见Boyle，等；同上)。另外，人杂交瘤技术的成功取决于产生对hTNFα特异的自身抗体的淋巴细胞在人外周血中的天然存在。某些研究业已检测到了人类受试者中抗hTNFα的血清自身抗体(Fomsgaard，A.，等(1989)Scand.J.Immureol.30219-223；Bendtzen，K.，等(1990)Prog.Leukocyte Biol.10B447-452)，而其他研究没有(Leusch，H-G.，等(1991)J.Imunol.Methods 139145-147)。作为天然存在的人抗-hTNFα抗体的替代，可以使用重组hTNFα抗体。业已披露了能以较低的亲和力(即，Kd约10-7M)和快的解离速度(即，Koff约10-2秒-1)结合hTNFα的重组人抗体(Griffiths，A.D.，等(1993)EMBOJ.12725-734)。不过，由于它们较快的解离动力学，这种抗体可能不适合治疗用途。另外，业已披露了重组人抗-hTNFα不能中和hTNFα活性，相反能促进hTNFα与细胞表面的结合，并且促进hTNFα的内化(Lidbury，A.，等(1994)Biotechnol.Ther.527-45；Aston，R.等的PCT公开WO 92/03145)。另外，业已披露了能够以高的亲和力和慢的解离动力学结合可溶性hTNFα，并且具有中和hTNFα活性的能力的重组人抗体，包括hTNFα-诱导的细胞毒性(体外和体内)和hTNFα-诱导的细胞活化(参见美国专利6,090,382)。专利技术概述需要具有长的保质期的稳定的含水药物制剂，它包括适合治疗用途的抗体，以便抑制或抵消有害的hTNFα活性。还需要具有长的保质期的稳定的含水药物制剂，它包括适合治疗用途的抗体，这种药物制剂便于施用，并且含有高蛋白浓度。本专利技术提供了液体含水药物制剂，由存在于缓冲液中的治疗有效量的抗体组成，形成了pH大约4-大约8的制剂，并且保质期至少为18个月。本专利技术还包括含水药物制剂，包括存在于缓冲液中的治疗有效量的抗体，形成了pH大约为4-8的制剂，并且在液体状态下的保质期至少为18个月。在一种实施方案中，所述药物制剂具有增强了的稳定性。在另一种实施方案中，本专利技术的制剂在经过至少3次冻/融循环之后是稳定的。在另一种实施方案中，所述抗体针对TNFα。在另一种实施方案中，所述抗体针对人TNFα。在另一种实施方案中，所述抗体是D2E7。本专利技术还提供了液体含水药物制剂，包括存在于缓冲液中的治疗有效量的抗体，形成了pH为4-8的制剂，并且在2-8℃下具有至少12个月的增强了本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种选自下组的药物制剂：　　　　（ａ）液体含水药物制剂，包括存在于缓冲液中的治疗有效量的抗体，该制剂的ｐＨ为大约４－８，并且保质期至少为１８个月；　　　　（ｂ）含水药物制剂，包括存在于缓冲液中的治疗有效量的抗体，该制剂的ｐＨ为大约４－８，并且在液体状态下的保质期至少为１８个月；　　　　（ｃ）液体含水药物制剂，包括存在于缓冲液中的治疗有效量的抗体，该制剂的ｐＨ为大约４－８，所述制剂能在至少３次冻／融循环之后保持稳定性；和　　　　（ｄ）液体含水药物制剂，包括存在于缓冲液中的治疗有效量的抗体，该制剂的ｐＨ为４－８，并且在２－８℃的温度下具有至少１２个月的增强的稳定性。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：HJ克劳泽，L鲍斯特，M迪克斯，
申请(专利权)人：艾博特生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：BM[百慕大]