重组大肠杆菌及其在检测布鲁氏菌病中的应用制造技术

本发明专利技术公开一种重组大肠杆菌及其在检测布鲁氏菌病中的应用。基于来源于小肠结肠炎耶尔森菌O:9的OPS与牛布鲁氏菌的OPS表位相似的特点，本发明专利技术在大肠杆菌内表达并合成来源于小肠结肠炎耶尔森菌O:9的OPS与SEQ ID NO:4的蛋白质的多糖‑蛋白偶联物。将该多糖‑蛋白偶联物作为抗原，可实现对布鲁氏菌病的血清抗体检测。根据本发明专利技术提供的重组大肠杆菌制备抗原，具备生产步骤简单、成本低、生物安全风险低的特点，在布鲁氏菌病检测中具备应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及免疫诊断，尤其涉及一种重组大肠杆菌及其在检测布鲁氏菌病中的应用。

技术介绍

1、布鲁氏菌病(又称布鲁菌病，简称布病)是由布鲁氏菌感染引起的一种人畜共患病，世界动物卫生组织(oie)将布病设为必须通报的动物疫病。患病的羊、牛等病畜是布病的主要传染源，布鲁氏菌可以通过破损的皮肤黏膜、消化道和呼吸道等途径传播，对畜牧业生产和人类健康造成严重的危害。及时、有效、可靠、准确的鉴定布病，在保障畜牧养殖、维护民众健康、控制布病传播等方面都至关重要。

2、布鲁氏菌是短小杆状、为兼性胞内寄生，感染动物和人后潜伏期长。血清学检测其中igg抗体是布病诊断的常用办法。常用的血清学检测方法主要是虎红平板凝集试验、试管凝集试验和酶联免疫吸附试验，这些方法均使用布鲁氏菌全菌或脂多糖(lipopolysaccharide，lps)作为抗原。

3、布鲁氏菌是二级生物安全危害病原体，全菌体或lps抗原的制备需要布鲁氏菌的大量发酵培养，需要在生物安全三级实验室完成，存在很大的生物安全风险，容易成为感染源。因此，如何更安全的制备用于布病血清学检测的抗原成为本本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌含有或合成多糖-蛋白偶联物；所述多糖-蛋白偶联物包括偶联至蛋白质上的来源于小肠结肠炎耶尔森菌O:9的O-抗原多糖；

2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌还含有或表达糖基转移酶。

3.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌含有OPS基因簇，所述OPS基因簇包括manC、manB、galU、galF、gmd、per、wzm、wzt、wbcT、wbcU、wbcV和wbcW基因；

4.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌不含有或不表达O...

【技术特征摘要】

1.重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌含有或合成多糖-蛋白偶联物；所述多糖-蛋白偶联物包括偶联至蛋白质上的来源于小肠结肠炎耶尔森菌o:9的o-抗原多糖；

2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌还含有或表达糖基转移酶。

3.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌含有ops基因簇，所述ops基因簇包括manc、manb、galu、galf、gmd、per、wzm、wzt、wbct、wbcu、wbcv和wbcw基因；

4.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌不含有或不表达o-抗原连接酶和/或与所述小肠结肠...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕宇飞，王恒樑，张艳，朱力，王东澍，李淑磊，潘超，刘先凯，郭艳，余淑娟，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：