产抗氧化人参三肽衍生物的重组枯草芽孢杆菌及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种产抗氧化人参三肽衍生物的重组枯草芽孢杆菌及应用，该产抗氧化人参三肽衍生物的重组枯草芽孢杆菌，利用同源重组将人参肽基因构建于枯草芽孢杆菌表达载体pMA5中，在融合蛋白SUMO以及P<subgt;43</subgt;‑P<subgt;HpaII</subgt;双启动子串联作用下，充分利用结合融合蛋白的多倍体串联对目的基因表达的促进作用，以及串联启动子的转录促进作用，实现抗氧化人参三肽衍生物在枯草芽孢杆菌中的高效表达。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程，具体涉及产抗氧化人参三肽衍生物的重组枯草芽孢杆菌及应用。

技术介绍

1、人参为五加科植物，自古就被作为食品与药物来服用，2012年卫生部将其正式列入药食同源中药。人参的化学成分主要有皂苷、多糖、多肽、挥发油、有机酸等，其中人参皂苷、多糖、多肽等为生物活性成分。人参肽是从人参或人参蛋白分解产物中获得的具有生物功能的肽段。人参肽在人体内不需经过消化即可直接吸收，能够减轻人体肠胃功能负担，同时可以显著增加其生理调节作用。其使用价值引起了人们的广泛关注，已逐渐成为各界研发的重点，并应用于药品、饮品、健康食品及化妆品等产业。

2、人参肽的制备主要有以下几种途径获得：自然界中分离提取、人工化学合成和生物重组表达。分离提取法比较原始，存在操作较为复杂，耗时长，成本昂贵以及提取效率低等缺陷；化学合成法可以得到较高纯度的人参肽，但是化学合成存在成本昂贵、副产物较多，分离纯化难以及造成污染等缺陷；生物重组表达具有培养周期短、培养成本低、表达量高等显著优势，成为目前研究的热点。

3、枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种产抗氧化人参三肽衍生物的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述重组枯草芽孢杆菌为Bacillus subtilis WB600/pMA5-SA，保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，保藏编号为CGMCC NO：29802，保藏日期为2024年01月29日。

2.根据权利要求1所述的产抗氧化人参三肽衍生物的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述重组枯草芽孢杆菌的重组质粒包括用含融合蛋白和抗氧化人参三肽衍生物基因和串联启动子P43-PHPaII构建的重组质粒。

3.根据权利要求2所述的产抗氧化人参三肽衍生物的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述抗氧化人参三肽衍生物为由抗氧化...

【技术特征摘要】

1.一种产抗氧化人参三肽衍生物的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述重组枯草芽孢杆菌为bacillus subtilis wb600/pma5-sa，保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，保藏编号为cgmcc no：29802，保藏日期为2024年01月29日。

2.根据权利要求1所述的产抗氧化人参三肽衍生物的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述重组枯草芽孢杆菌的重组质粒包括用含融合蛋白和抗氧化人参三肽衍生物基因和串联启动子p43-phpaii构建的重组质粒。

3.根据权利要求2所述的产抗氧化人参三肽衍生物的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述抗氧化人参三肽衍生物为由抗氧化人参三肽重复40次所组成的功能肽，所述融合蛋白为sumo蛋白，所述sumo蛋白的n末端连接有用于纯化蛋白的亲和层析标签。

4.根据权利要求3所述的产抗氧化人参三肽衍生物的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述抗氧化人参三肽衍生物的核苷酸序列如seq id no.1所示。

5.一种产抗氧化人参三肽衍生物的方法，其特征在于，包括：将权利要求1～4任一权利要求所述的产抗氧化人参三肽衍生物的重组枯草芽孢杆菌进行发酵培养。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述发酵培养包括：将重组枯草芽孢杆菌划线于含卡那霉素的lb固体培养基上，于37℃倒置过夜培养，挑选菌落接种于lb液体培养基中，于37℃，200～220rpm转速下过夜培养，随后按1～2％的接种比例，接种至含卡那霉素的tb培养基中，于37℃培养72h，收取菌液...

【专利技术属性】
技术研发人员：惠俊峰，高云芳，范代娣，王盼，刘铭涵，郑晓燕，陈希，
申请(专利权)人：西北大学，
类型：发明
国别省市：