【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子生物，具体涉及一种在家蚕中同时表达bfgf和egf且便于蛋白快速纯化的方法。
技术介绍
1、人碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，简写bfgf)和人表皮细胞生长因子(epidermal growth factor，简写egf)是两种具有调节和促进细胞的生长和增殖等多种生物学功能的生长因子。bfgf临床上可用于治疗外科创伤(烧伤、烫伤等)、皮肤溃疡、角膜损伤、组织修复等，而egf可通过促进表皮细胞增殖、分化和迁移，进而加快细胞新陈代谢，达到滋润皮肤和延缓衰老的目的，因而被化妆品和医美行业等所喜爱，被称为“美丽因子”。
2、目前bfgf和egf都是通过基因工程的方法，利用体外表达系统分别在原核(如大肠杆菌)和真核细胞(酵母细胞、昆虫细胞和人源细胞等)表达而获得重组蛋白。利用家蚕杆状病毒表达系统构建重组杆状病毒表达重组蛋白具有周期短、成本较低、重组蛋白活性较好等优点而广受好评。但由于家蚕细胞本身含有大量蛋白质，从家蚕中分离纯化重组蛋白十分困难。
【技术保护点】
1.一种在家蚕中同时表达bFGF和EGF且便于蛋白快速纯化的方法，其特征在于，方法步骤如下：
2.根据权利要求1所述的一种在家蚕中同时表达bFGF和EGF且便于蛋白快速纯化的方法，其特征在于：所述步骤(1)中，设计后的人碱性成纤维生长因子bFGF和人表皮生长因子EGF两个基因的基因序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2。
3.根据权利要求1所述的一种在家蚕中同时表达bFGF和EGF且便于蛋白快速纯化的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，在融合后设置TEV酶切位点，在两端分别添加BamHI和HindIII限制性内切酶位点。>
4.根据权利...
【技术特征摘要】
1.一种在家蚕中同时表达bfgf和egf且便于蛋白快速纯化的方法，其特征在于，方法步骤如下：
2.根据权利要求1所述的一种在家蚕中同时表达bfgf和egf且便于蛋白快速纯化的方法，其特征在于：所述步骤(1)中，设计后的人碱性成纤维生长因子bfgf和人表皮生长因子egf两个基因的基因序列分别为seq id no.1和seq id no.2。
3.根据权利要求1所述的一种在家蚕中同时表达bfgf和egf且便于蛋白快速纯化的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，在融合后设置tev酶切位点，在两端分别添加bamhi和hindiii限制性内切酶位点。
4.根据权利要求3所述的一种在家蚕中同时表达bfgf和egf且便于蛋白快速纯化的方法，其特征在于：所述tev酶切位点的序列为seq id no.3。
5.根据权利要求1所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴小锋，王星洋，许裕敬，杨恬，朱新宇，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：
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