【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于中草药组织培养繁殖，具体涉及一种从刺五加外植体出发的快速扩繁方法。
技术介绍
1、刺五加(eleutherococcus senticosus(rupr.&maxim.)maxim.)属于五加科五加属多年生灌木，多生于森林或灌丛中，喜温暖湿润气候，耐寒、耐微荫蔽；其分枝较多，植株密生刺，刺直而细长，针状，脱落后遗留圆形刺痕，掌状复叶，叶有5枚小叶，叶柄常疏生细刺，果实球形或卵球形，有5棱；刺五加果实采收后不能直接用于播种，需要经过一个冬季完成生理成熟过程后，种子才能发芽。
2、刺五加主要分布在我国东北地区，尤其是黑龙江的小兴安岭、伊春等地，是黑龙江省重点道地药材；其嫩茎和鲜叶含胡萝卜素、核黄素、抗坏血酸及丰富的维生素，可用于食用；其叶可作茶饮，具有良好的抗疲劳效果；其根茎入药可益气健脾、补肾安神，用于治疗脾肺气虚、体虚乏力、食欲不振、肺肾两虚，以及久咳虚喘、肾虚、腰膝酸痛、心脾不足、失眠多梦等症状。由于其具有较高的药用价值和营养价值，以刺五加为原料的药品和食品深受国内外的欢迎，因而造成的过度采挖使得刺五加的天然资源遭到严重破坏，刺五加资源严重告急。
3、自然条件下，刺五加种子需经变温层积处理后才能播种，并且刺五加种子质量差、出苗率低，导致其有性生殖效果不佳。为了实现刺五加的大规模生产，有学者以刺五加刚萌发的外芽作为外植体，消毒处理后将其接种在不同的培养基上，实现从芽到完整植株的繁育，虽然提高了刺五加的出苗率，但其材料的获得受到严格的时间限制，只有在春季到来之际才能获得相应的外植体材料
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种从刺五加外植体出发的组织培养快速扩繁方法，从而更快速高效的从刺五加种子出发来获得具有健壮根系的刺五加幼苗。
2、本专利技术所提供的从刺五加外植体出发的快速扩繁方法，包括如下的步骤：
3、(1)将经过低温处理，并去掉外种皮的刺五加种子进行消毒处理，然后将刺五加种子进行切割，然后接种在愈伤组织培养基中进行培养；
4、所述的低温处理，是将种子在-25℃温度下处理20-25天；
5、所述的愈伤培养基添加有30g/l蔗糖、7g/l琼脂、1.0mg/l 2,4-d、0.5mg/l6-ba和0.5mg/l naa的ms培养基；
6、所述的培养，其中培养环境为22℃±2℃，日光灯光源，光照强度3000lux，昼夜节律为16h光照/8h黑暗。
7、(2)将愈伤组织接种在生芽培养基中培养，每三至四周更换一次培养基，直至新长出的刺五加嫩芽长至3cm以上；
8、所述的生芽培养基为添加有30g/l蔗糖、7g/l琼脂、1.0mg/l 6-ba、0.5mg/l naa的ms培养基；
9、所述的生芽培养基的培养环境为22℃±2℃，日光灯光源，光照强度3000lux，昼夜节律为16h光照/8h黑暗。
10、(3)将刺五加幼芽从外植体基部切下，转移至生根培养基中，继续培养至芽的基部长出健壮的根系；
11、所述的生根培养基为添加有30g/l蔗糖、7g/l琼脂、1.0mg/l naa、1.0mg/l iaa的1/2ms培养基；
12、所述的生根培养基的培养环境为22℃±2℃，日光灯光源，光照强度3000lux，昼夜节律为16h光照/8h黑暗。
13、本专利技术以刺五加种子作为外植体，通过消毒、切割措施及激素配比，促使刺五加种子在无菌环境下长出健壮的愈伤组织，而后诱导芽的产生，再对芽进行生根诱导，进而获得完整的无菌植株。本专利技术方法克服了传统播种低效、耗时长、受限于季节的问题；能在任意时间在室内实现大量、快速扩繁刺五加种苗。
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1.一种从刺五加外植体出发的快速扩繁方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的所述的低温处理，是将种子在-25℃温度下处理20-25天。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的愈伤培养基是添加有30g/L蔗糖、7g/L琼脂、1.0mg/L 2,4-D、0.5mg/L 6-BA和0.5mg/L NAA的MS培养基。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的1)中的培养环境为22℃±2℃，日光灯光源，光照强度3000lux，昼夜节律为16h光照/8h黑暗。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的生芽培养基为添加有30g/L蔗糖、7g/L琼脂、1.0mg/L 6-BA、0.5mg/L NAA的MS培养基。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的生芽培养基的培养环境为22℃±2℃，日光灯光源，光照强度3000lux，昼夜节律为16h光照/8h黑暗。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的所述的生根培养基为添加有30g/L蔗糖、7g
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的生根培养基的培养环境为22℃±2℃，日光灯光源，光照强度3000lux，昼夜节律为16h光照/8h黑暗。
...【技术特征摘要】
1.一种从刺五加外植体出发的快速扩繁方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的所述的低温处理，是将种子在-25℃温度下处理20-25天。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的愈伤培养基是添加有30g/l蔗糖、7g/l琼脂、1.0mg/l 2,4-d、0.5mg/l 6-ba和0.5mg/l naa的ms培养基。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的1)中的培养环境为22℃±2℃，日光灯光源，光照强度3000lux，昼夜节律为16h光照/8h黑暗。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的生...
【专利技术属性】
技术研发人员：金晓霞，刘妍，马玉芳，张欣欣，徐俊彬，武宇琦，史元强，王舸力，
申请(专利权)人：哈尔滨师范大学，
类型：发明
国别省市：
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