具有高活性的USP14突变体及其用途制造技术

本申请提供了一种具有高活性的USP14突变体及其用途，所述突变体包含一种基于参考序列的突变，所述参考序列的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本申请所述的突变体的活性高，并具有剂量依赖性，所述突变体可以作为唯一靶点进行药物筛选，在细胞内表达该突变体可以制备肿瘤细胞系、肿瘤模型或神经退行性疾病模型。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及生物工程，具体涉及一种具有高活性的usp14突变体及其用途。

技术介绍

1、泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-26s proteasome system，ups)对于维持真核细胞胞内蛋白质稳态至关重要。26s蛋白酶体是一种超大分子机器，由19s调节颗粒(regulatory particle，rp)和20s核心颗粒(core particle，cp)构成，其中19s调节颗粒负责将底物蛋白去泛素化、去折叠成线性多肽链并转运至20s核心颗粒中；而20s核心颗粒通过atp水解活性将去折叠的蛋白降解。泛素化修饰是指通过e1活化酶、e2结合酶和e3连接酶的级联反应将泛素链以异肽键的形式共价连接到底物蛋白上。去泛素化是泛素化的逆过程，由去泛素化酶(deubiquitinase,dub)催化完成。dubs可以水解泛素羧基末端的酯键、肽键或异肽键，将泛素分子从泛素化的蛋白质或者前体蛋白上水解下来，维持泛素和蛋白的稳态。泛素化和去泛素化两个可逆过程的相互协调，可精细调控蛋白质的泛素化类型及程度，影响相应蛋白质的功能及命运，在细胞分裂分化及信号传递等众多生命活本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种USP14突变体，所述突变体包含一种基于参考序列的突变，所述参考序列的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.根据权利要求1所述的USP14突变体，其中，所述突变体的氨基酸包含对应于SEQ IDNO:1的R293和E335中的至少一个位点的氨基酸突变，优选包含对应于SEQ ID NO:1的R293或E335位点的氨基酸突变。

3.一种USP14突变体，其包含如SEQ ID NO:2或4所示的氨基酸序列或者如SEQ ID NO:2或4所示的氨基酸序列。

4.一种核酸分子，其包含编码权利要求1-3中任一项所述的USP14突变体的序列。

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【技术特征摘要】

1.一种usp14突变体，所述突变体包含一种基于参考序列的突变，所述参考序列的氨基酸序列如seq id no:1所示。

2.根据权利要求1所述的usp14突变体，其中，所述突变体的氨基酸包含对应于seq idno:1的r293和e335中的至少一个位点的氨基酸突变，优选包含对应于seq id no:1的r293或e335位点的氨基酸突变。

3.一种usp14突变体，其包含如seq id no:2或4所示的氨基酸序列或者如seq id no:2或4所示的氨基酸序列。

4.一种核酸分子，其包含编码权利要求1-3中任一项所述的usp14突变体的序列。

5.根据权利要求4所述的核酸分子，其中，所述核酸分子包含seq id no:3或5所示的序列或者如seq id no:3...

【专利技术属性】
技术研发人员：王丰，古冬金，王燕峰，冯思宁，高宇，吴尊道，李熙昌，
申请(专利权)人：北京理工大学，
类型：发明
国别省市：