【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及确定细胞群体(例如皮肤细胞群体)中线粒体dna(mtdna)损伤水平的方法。本专利技术进一步涉及确定测试试剂防止或修复细胞群体中的mtdna损伤的能力的方法,以及用于监测细胞群体中的mtdna损伤进展的方法。本专利技术还涉及用于在本专利技术方法中使用的试剂盒,以及专利技术人鉴定的对由环境因素如uvr和/或污染引起的损伤特别敏感的mtdna片段的用途。
技术介绍
1、线粒体在细胞能量提供中起中心作用。这些细胞器含有具有修饰的遗传密码的其自身基因组。人线粒体dna(mtdna)是16,569个碱基对(bp)的双链环状分子并且含有编码两个rrna,22个trna和13个蛋白的37个基因。mtdna编码的蛋白质都是氧化磷酸化系统的酶复合物的亚基。该过程借助于线粒体内膜中四种酶(其中三种是质子泵)之间的电子流进行。
2、mtdna对氧化性损伤是高度敏感的,这是因为它未被压紧在组蛋白周围并且定位在电子传递链附近,该电子传递链是活性氧物质(ros)的主要来源。此外,mtdna具有很少的非编码区,这增加了编码区中诱变的可能性。
...【技术保护点】
1.一种确定细胞群体中线粒体DNA(mtDNA)损伤水平的方法,所述方法包括:
2.一种确定测试试剂防止或修复细胞群体中mtDNA损伤的能力的方法,所述方法包括:
3.一种监测细胞群体中mtDNA损伤进展的方法,所述方法包括:
4.一种用于确定细胞群体中线粒体DNA(mtDNA)损伤水平的试剂盒,所述试剂盒包含用于扩增包含来自位于核苷酸4412至7069之间的mtDNA区域的至少约200个碱基的mtDNA片段的引物组。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的方法或根据权利要求4所述的试剂盒,其中所述细胞群体是皮肤细胞群体。
6.根...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种确定细胞群体中线粒体dna(mtdna)损伤水平的方法,所述方法包括:
2.一种确定测试试剂防止或修复细胞群体中mtdna损伤的能力的方法,所述方法包括:
3.一种监测细胞群体中mtdna损伤进展的方法,所述方法包括:
4.一种用于确定细胞群体中线粒体dna(mtdna)损伤水平的试剂盒,所述试剂盒包含用于扩增包含来自位于核苷酸4412至7069之间的mtdna区域的至少约200个碱基的mtdna片段的引物组。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的方法或根据权利要求4所述的试剂盒,其中所述细胞群体是皮肤细胞群体。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法或根据权利要求4或5所述的试剂盒,其中mtdna损伤是由氧化应激引起的。
7.根据权利要求6所述的方法或试剂盒,其中所述氧化应激是由暴露于uvr暴露和/或污染物引起的,可选地其中所述污染物是城市灰尘。
8.根据权利要求1至3或5至7中任一项所述的方法或根据权利要求4至7中任一项所述的试剂盒,其中片段来自位于核苷酸4512至6969之间的mtdna区域。
9.根据权利要求1至3或5至8中任一项所述的方法或根据权利要求4至8中任一项所述的试剂盒,其中片段包含至少约200个碱基。
10.根据权利要求9所述的方法或试剂盒,其中所述片段包含至少约500个碱基。
11.根据权利要求10所述的方法或试剂盒,其中所述片段包含至少约650个碱基。
12.根据权利要求11所述的方法或试剂盒,其中所述片段包含至少约1000个碱基。
13.根据权利要求12所述的方法或试剂盒,其中所述片段包含至少约1200个碱基。
14.根据权利要求13所述的方法或试剂盒,其中所述片段包含至少2000个碱基。
15.根据权利要求13所述的方法或试剂盒,其中所述片段包含至少约2400个碱基,可选地其中所述片段包含2457个碱基或由2457个碱基组成。
16.根据权利要求7所述的方法或试剂盒,其中暴露于uvr是慢性的或其中暴露于污染是急性的。
17.根据权利要求16所述的方法或试剂盒,其中片段来自位于核苷酸4512至5744之间的mtdna区域。
18.根据权利要求17所述的方法或试剂盒,其中所述片段为至少约200个碱基。
19.根据权利要求18所述的方法或试剂盒,其中所述片段为至少约500个碱基。
20.根据权利要求19所述的方法或试剂盒,其中所述片段为至少约650个碱基。
21.根据权利要求20所述的方法或试剂盒,其中所述片段为至少约1000个碱基。
22.根据权利要求21所述...
【专利技术属性】
技术研发人员:马克·安东尼·伯奇梅钦,鲁瓦森·布里奇特·斯托特,
申请(专利权)人:泰恩河畔纽卡斯尔大学,
类型:发明
国别省市:
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