【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及水产，特别涉及一种蓝色大斑石斑鱼促雄发育及成熟配子产生的方法。
技术介绍
1、石斑鱼为先雌后雄的雌雄同体的鱼类，大多数石斑鱼在5龄左右时才首先成熟为雌性，然后一些石斑鱼的性别逆转为雄性。而传统的选择育种需要对目的性状进行多代的选育，因此远缘杂交对石斑鱼新品种的开发具有重要意义。近年来，杂交育种作为鱼类新品种培育方法被广泛应用于石斑鱼杂交育种。其中，蓝身大斑石斑鱼生长速度较快，且肉质鲜美，是重要的海水经济鱼类。
2、蓝身大斑石斑鱼（ epinephelus tukula）属鲈形目、鮨科、石斑鱼亚科、石斑鱼属，俗名金钱斑，是石斑鱼中大型品种之一，广泛分布于印度—太平洋区域，以及我国南部海域及澎湖湾海域。蓝身大斑石斑鱼生长速度快、肉味鲜美，是重要的海水经济鱼类。具有生长速度快的优点，属中大型鱼类，因此常作为父本用于与其他石斑鱼进行杂交。然而蓝身大斑石斑鱼的研究尚处于起步阶段，有关资料甚少，国内外文献中均未见有关种类的系统描述。蓝身大斑石斑鱼性成熟时间较晚，一般需要3~4年龄鱼才能达到初次性成熟，精子自然成熟时间长，在实际生产中，经常会遇到雄鱼精液量不足等问题，严重制约了养殖产业的发展。大多石斑鱼类为多批产卵鱼类。卵巢内同时具有不同时相的卵母细胞。雌鱼在一个繁殖期内。卵子分批成熟。如青石斑鱼( e.awoara)、点带石斑鱼( e.malabaricus)和云纹石斑鱼( e.moara)等。因此经常出
技术实现思路
1、鉴以此，本专利技术提出一种蓝色大斑石斑鱼促雄发育及成熟配子产生的方法，来解决上述问题。
2、本专利技术的技术方案是这样实现的：一种蓝色大斑石斑鱼促雄发育及成熟配子产生的方法，包括以下步骤：
3、步骤一、实验亲鱼预备
4、（1）雄性亲本：选择不同年龄健康的蓝身大斑石斑鱼作为雄性亲本；
5、（2）雌性亲本：选择3年龄以上健康的棕点石斑鱼（ epinephelus fuscoguttatus）作为雌性亲本；
6、步骤二、亲鱼暂养
7、（1）暂养环境：工厂化水泥养殖池环境培育；
8、（2）亲本投喂
9、隔1-2天投喂一餐，投喂食物为冰冻鱼料，喂到不吃为止，在埋植前1-2天停止投喂；
10、步骤三、药物配置、埋植
11、（1）使用质量比为1:2:3的酮基睾酮、来曲唑和海藻多糖，在常温下加入超纯水揉搓成长条状制成药条，放入烘箱烘干，保存；
12、（2）埋植药物为烘干后的步骤三中（1）所配药条，在埋植前，进行麻醉，麻醉后擦干泄殖孔周围，埋植部位为头后背部两侧肌肉；
13、步骤四、亲鱼成熟判断
14、每周对雄性亲鱼进行成熟度检查，生殖孔微红，轻压腹部，能挤出乳白色的精液，即达到性成熟；
15、步骤五、精液采集
16、（1）选取经过药条埋植、生长良好、精巢发育成熟的雄鱼，通过人工挤压的方式取精，在采集前，进行麻醉，麻醉后擦干泄殖孔周围，轻压腹部至泄殖孔，待流出乳白色、干净无污染的精液，收集其精液至ep管中；
17、（2）采集到的所有精液混合处理；
18、（3）统计能人工挤压出精子的亲本数量；
19、（4）将所述ep管先用锡箔纸包裹避光，再包裹脱脂棉，最外层纱布裹紧，放入含冰袋的冰盒内，温度为2-6℃；
20、步骤六、人工授精、受精卵孵化
21、（1）采用人工挤压的方法从雌性亲本获取卵子，将步骤五采集的精子加入装有卵子的容器中，搅拌静置2-3min，使其完全受精，用海水冲洗受精卵；
22、（2）采用孵化桶进行微流水孵化得到仔鱼。
23、进一步的，一种蓝色大斑石斑鱼促雄发育及成熟配子产生的方法，包括以下步骤：
24、步骤一、实验亲鱼预备
25、（1）雄性亲本：选择4-7年龄健康的蓝身大斑石斑鱼作为雄性亲本；
26、（2）雌性亲本：选择3年龄以上健康的棕点石斑鱼作为雌性亲本；
27、步骤二、亲鱼暂养
28、（1）暂养环境：工厂化水泥养殖池环境培育，光线为自然光，设置遮阳网，晚上不加灯，温度为23±0.5℃，养殖池规格为长4.7m，宽4.7m，高1.8m；
29、（2）亲本投喂
30、隔天投喂一餐，投喂食物为冰冻鱼料，喂到不吃为止，在埋植前1-2天停止投喂；
31、步骤三、药物配置、埋植
32、（1）称量质量比1:2:3的酮基睾酮、来曲唑和海藻多糖；在常温下加入超纯水揉搓成长条状制成药条，放入35-38℃烘箱中烘干6-9小时，2-5℃下保存使用，保存时间为25-35天；
33、（2）埋植药物为烘干后的步骤三中（1）所配药条，在埋植前，进行麻醉，麻醉后用干毛巾擦干泄殖孔周围，埋植部位为头后背部两侧肌肉；
34、步骤四、亲鱼成熟判断
35、每周对雄性亲鱼进行成熟度检查，生殖孔微红，轻压腹部，能挤出乳白色的精液，即达到性成熟；
36、步骤五、精液采集
37、（1）选取经过药条埋植、生长良好、精巢发育成熟的雄鱼，通过人工挤压的方式取精，在采集前，进行麻醉，麻醉后用干毛巾擦干泄殖孔周围，轻压腹部至泄殖孔，待流出乳白色、干净无污染的精液后，使用移液枪立即吸取，并打入无任何液体的5ml无菌ep管底部；
38、（2）采集到的所有精液混合处理，初始活力大于90%；
39、（3）统计能人工挤压出精子的亲本数量；
40、（4）将所述ep管先用锡箔纸包裹避光，目的是防止光激活，再包裹脱脂棉，最外层纱布裹紧，放入含冰袋的冰盒内，温度为4℃；
41、步骤六、人工授精、受精卵孵化
42、（1）采用人工挤压的方法从雌性亲本获取卵子，采用干式受精法进行受精，将步骤五采集的精子加入装有卵子的容器中，一边加入海水一边搅拌，静置2-3min，使其完全受精，用海水冲洗受精卵；
43、（2）采用孵化桶进行微流水孵化得到仔鱼。
44、进一步的，所述步骤二（1）的培育条件：溶解氧8mg/l、水流交换量1.4米水排到0.5m，换水量0.9m，每天4次。
45、进一步的，所述步骤三（1）的药物长条状规格：长1.8cm，宽0.3cm，重量为0.1g±0.008。
46、进一步的，所述步骤三（1）放入37℃烘箱中烘干8小时，4℃下保存使用，保存时间为30天。
47、进一步的，所述步骤三（1）放入37℃烘箱中烘干8小时，4℃下保存使用，保存时本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种蓝色大斑石斑鱼促雄发育及成熟配子产生的方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的一种蓝色大斑石斑鱼促雄发育及成熟配子产生的方法，其特征在于：包括以下步骤：
3.如权利要求1或2所述的一种蓝色大斑石斑鱼促雄发育及成熟配子产生的方法，其特征在于：所述步骤二（1）的培育条件：溶解氧8mg/L、水流交换量1.4米水排到0.5m，换水量0.9m，每天4次。
4.如权利要求1或2所述的一种蓝色大斑石斑鱼促雄发育及成熟配子产生的方法，其特征在于：所述步骤三（1）的药物长条状规格：长1.8cm，宽0.3cm，重量为0.1g±0.008。
5.如权利要求1或2所述的一种蓝色大斑石斑鱼促雄发育及成熟配子产生的方法，其特征在于：所述步骤三（1）放入37℃烘箱中烘干8小时，4℃下保存使用，保存时间为30天。
6.如权利要求1或2所述的一种蓝色大斑石斑鱼促雄发育及成熟配子产生的方法，其特征在于：所述步骤三（2）的埋植剂量药条/鱼体重为20mg/kg。
7.如权利要求1或2所述的一种蓝色大斑石斑鱼促雄发育及成熟配子
...【技术特征摘要】
1.一种蓝色大斑石斑鱼促雄发育及成熟配子产生的方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的一种蓝色大斑石斑鱼促雄发育及成熟配子产生的方法，其特征在于：包括以下步骤：
3.如权利要求1或2所述的一种蓝色大斑石斑鱼促雄发育及成熟配子产生的方法，其特征在于：所述步骤二（1）的培育条件：溶解氧8mg/l、水流交换量1.4米水排到0.5m，换水量0.9m，每天4次。
4.如权利要求1或2所述的一种蓝色大斑石斑鱼促雄发育及成熟配子产生的方法，其特征在于：所述步骤三（1）的药物长条状规格：长1.8cm，宽0.3cm，重量为...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈有铭，文鑫，郑良涛，
申请(专利权)人：海南蓝粮科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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