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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及多样本处理,具体为凝血测试仪多样本处理方法。
技术介绍
1、凝血测试仪是一种在医学领域中广泛应用的重要仪器,用于评估人体血液的凝血功能,凝血是一个复杂而关键的生理过程,涉及众多凝血因子的相互作用,以防止过度出血并保持血管的完整性,凝血测试仪的出现使得对这一过程的精确评估成为可能,凝血测试仪的工作原理基于多种技术,常见的有光学检测法,它通过监测血液凝固过程中光的散射、透射或吸收的变化来确定凝血时间和相关参数,还有电化学检测法,利用电极表面的电化学反应来检测凝血过程中的物质变化,这些测试仪通常能够测量多个凝血相关的指标,如凝血酶原时间(pt)、部分活化凝血活酶时间(aptt)、纤维蛋白原含量等,这些指标对于诊断各种出血性和血栓性疾病具有重要意义;
2、现有的凝血测试仪多样本处理技术在时间效率上存在显著的缺陷,在处理多个样本时,整个流程缺乏系统性的优化,导致每个环节都耗费过多的时间,使得多样本处理耗时严重,不仅浪费了时间,还增加了检测成本,并且,现有的凝血测试仪在多样本检测结果的准确性方面表现欠佳,影响检测结果的准确性,为此,我们提出凝血测试仪多样本处理方法。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供凝血测试仪多样本处理方法。
2、以解决上述
技术介绍
中提出的问题,本专利技术提供如下技术方案:凝血测试仪多样本处理方法,所述凝血测试仪多样本处理方法的具体操作步骤如下:
3、步骤一:采集多个凝血样本,将其置于特定的无菌样本容器中,对样本进行外
4、步骤二:将初步筛选后的样本转移至具备温度控制功能的离心设备中,随后启动离心设备进行离心操作,使样本分离为血浆层和血细胞层;
5、步骤三:缓慢吸取分离出的血浆,将其转移至新的无菌容器中,向血浆中加入表面修饰有特异性识别杂质和干扰物质配体的磁珠,在23℃~28℃环境中孵育30min~35min,孵育过程中伴随搅拌,通过外部磁场吸附磁珠,从而去除血浆中的杂质和干扰物质;
6、步骤四:将经过磁珠处理的血浆通过超滤装置,使用孔径为0.22μm的超滤膜,在0.1mpa的压力下进行超滤,以去除血浆中分子量大于100kda的大分子和分子量小于1kda的小分子干扰物;
7、步骤五:向超滤后的血浆中加入质量分数为10%的三氯乙酸溶液,在ph值为4.5~5.0、温度为37℃~40℃的条件下反应18min~22min,使微量杂质形成沉淀,置于离心机中去除沉淀,离心机转速为3000rpm~3200rpm,离心8min~12min;
8、步骤六:使用分光光度计测定处理后血浆中目标物质的浓度,根据凝血测试的需求,当浓度超过5.0mg/ml时,则采用0.9%的生理盐水以1:1的比例进行稀释,当浓度低于0.5mg/ml时,则通过真空旋转蒸发浓缩的方法进行浓缩,使血浆浓度保持在0.5mg/ml~5.0mg/ml之间,随后将经过处理的样本投入凝血测试仪中进行检测。
9、作为本专利技术的进一步方案:所述步骤二中,使用的离心设备具备温度控制功能,以3000rpm~3200rpm的转速进行离心处理,离心时间为13min~16min,离心温度保持在4℃~6℃,这一温度低温能够降低血液中酶的活性,减少生化反应的发生,从而保持样本中各种成分的原始状态。
10、作为本专利技术的进一步方案:所述步骤三中,孵育磁珠时伴随轻微的搅拌,搅拌速度为90rpm~110rpm,可以促进磁珠在血浆中的均匀分布,避免磁珠局部聚集,提高磁珠与杂质结合的机会和效率。
11、作为本专利技术的进一步方案:所述步骤四中,超滤过程中定期监测超滤膜的通量,当通量下降到初始通量的50%时,需要立刻更换超滤膜。
12、作为本专利技术的进一步方案:所述步骤五中,化学沉淀离心反应结束后,使用高效液相色谱法(hplc)检测沉淀去除的效果,确保血浆经过预处理后满足凝血测试的质量要求。
13、作为本专利技术的进一步方案:所述步骤六中,稀释和浓缩后的血浆需再次进行混匀处理,混匀方式为漩涡混匀2min~4min,确保打破浓度梯度,使其充分混合。
14、作为本专利技术的进一步方案:所述步骤一至步骤六的每一步骤完成后,均使用75%的乙醇溶液对容器和操作工具进行清洗,以去除残留的样本和处理试剂,清洗操作应遵循严格的操作规程,确保乙醇溶液与容器和工具充分接触,并在清洗后进行彻底的冲洗和干燥,以去除乙醇残留,避免对后续样本处理造成影响。
15、作为本专利技术的进一步方案:所述容器和工具在清洗后需经过60℃~80℃烘干处理25min~30min,确保容器和工具的干燥和无菌状态。
16、作为本专利技术的进一步方案:所述步骤一至步骤六中,整个样本预处理过程在洁净度为100级的环境中进行,操作人员需穿戴符合卫生标准的一次性无菌防护服、手套和口罩,确保每次操作的无菌性和安全性。
17、采用上述技术方案,与现有技术相比,本专利技术的有益效果在于:
18、1.本专利技术通过在凝血测试仪检测前对样本进行预处理,包括离心步骤,控制离心设备的温度、转速和时间,能够快速且有效地分离出血浆层和血细胞层,为后续的处理节省了时间,加入表面修饰有特异性配体的磁珠并进行孵育,配合搅拌,能迅速且有效地去除血浆中的杂质和干扰物质,超滤过程中使用特定孔径的超滤膜和适当的压力,能快速去除大分子和小分子干扰物,化学沉淀步骤则能快速使微量杂质形成沉淀并通过离心去除,后续对血浆浓度的调整也能够快速完成,使得处理后的样本能够迅速投入凝血测试仪中进行检测,与传统的处理方法相比,本方法大大缩短了样本检测的时间,提高了整个检测流程的效率;
19、2.本专利技术通过严格的外观检查标准排除了血量不足、凝固和严重污染的样本,这些样本若进入检测流程,极有可能导致检测结果出现偏差,离心操作在特定的温度条件下进行,保持了样本中各种成分的原始状态,避免了因温度不当引起的生化反应,从而减少了对检测结果的影响,磁珠孵育过程中的搅拌以及合理的孵育条件,确保了磁珠与杂质和干扰物质充分结合,最大限度地去除了这些影响检测准确性的因素,超滤步骤能够精准地去除特定分子量范围的干扰物,进一步提高了血浆的纯度,化学沉淀步骤在严格控制的 ph值、温度和反应时间条件下进行,使得微量杂质得以有效沉淀并去除,提高了血浆的质量,在处理后的浓度调整环节,准确地将血浆浓度控制在适宜范围内,保证了检测结果的准确性;
20、3.本专利技术通过严格的样本筛选步骤在初始阶段就排除了不符合要求的样本,避免了对这些样本进行后续无用的处理操作,节省了试剂和时间成本,离心、磁珠处理、超滤等步骤的优化,使得在达到相同处理效果的前提下,减少了试剂的使用量和设备的运行时间,通过对容器和工具的规范清洗和烘干处理,延长了其使用寿命,降低了更换频率,从而节约了采购成本,总体上降低了因处理失败而产生的间接成本本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.凝血测试仪多样本处理方法,其特征在于,所述凝血测试仪多样本处理方法的具体操作步骤如下:
2.根据权利要求1所述的凝血测试仪多样本处理方法,其特征在于:所述步骤二中,使用的离心设备具备温度控制功能,以3000rpm~3200rpm的转速进行离心处理,离心时间为13min~16min,离心温度保持在4℃~6℃,这一温度能够降低血液中酶的活性,减少生化反应的发生,从而保持样本中各种成分的原始状态。
3.根据权利要求1所述的凝血测试仪多样本处理方法,其特征在于:所述步骤三中,孵育磁珠时伴随轻微的搅拌,搅拌速度为90rpm~110rpm,可以促进磁珠在血浆中的均匀分布,避免磁珠局部聚集,提高磁珠与杂质结合的机会和效率。
4.根据权利要求1所述的凝血测试仪多样本处理方法,其特征在于:所述步骤四中,超滤过程中定期监测超滤膜的通量,当通量下降到初始通量的50%时,需要立刻更换超滤膜。
5.根据权利要求1所述的凝血测试仪多样本处理方法,其特征在于:所述步骤五中,化学沉淀离心反应结束后,使用高效液相色谱法(HPLC)检测沉淀去除的效果,确保血浆经过
6.根据权利要求1所述的凝血测试仪多样本处理方法,其特征在于:所述步骤六中,稀释和浓缩后的血浆需再次进行混匀处理,混匀方式为漩涡混匀2min~4min,确保打破浓度梯度,使其充分混合。
7.根据权利要求1所述的凝血测试仪多样本处理方法,其特征在于:所述步骤一至步骤六的每一步骤完成后,均使用75%的乙醇溶液对容器和操作工具进行清洗,以去除残留的样本和处理试剂,清洗操作应遵循严格的操作规程,确保乙醇溶液与容器和工具充分接触,并在清洗后进行彻底的冲洗和干燥,以去除乙醇残留,避免对后续样本处理造成影响。
8.根据权利要求7所述的凝血测试仪多样本处理方法,其特征在于:所述容器和工具在清洗后需经过60℃~80℃烘干处理25min~30min,确保容器和工具的干燥和无菌状态。
9.根据权利要求1所述的凝血测试仪多样本处理方法,其特征在于:所述步骤一至步骤六中,整个样本预处理过程在洁净度为100级的环境中进行,操作人员需穿戴符合卫生标准的一次性无菌防护服、手套和口罩,确保每次操作的无菌性和安全性。
...【技术特征摘要】
1.凝血测试仪多样本处理方法,其特征在于,所述凝血测试仪多样本处理方法的具体操作步骤如下:
2.根据权利要求1所述的凝血测试仪多样本处理方法,其特征在于:所述步骤二中,使用的离心设备具备温度控制功能,以3000rpm~3200rpm的转速进行离心处理,离心时间为13min~16min,离心温度保持在4℃~6℃,这一温度能够降低血液中酶的活性,减少生化反应的发生,从而保持样本中各种成分的原始状态。
3.根据权利要求1所述的凝血测试仪多样本处理方法,其特征在于:所述步骤三中,孵育磁珠时伴随轻微的搅拌,搅拌速度为90rpm~110rpm,可以促进磁珠在血浆中的均匀分布,避免磁珠局部聚集,提高磁珠与杂质结合的机会和效率。
4.根据权利要求1所述的凝血测试仪多样本处理方法,其特征在于:所述步骤四中,超滤过程中定期监测超滤膜的通量,当通量下降到初始通量的50%时,需要立刻更换超滤膜。
5.根据权利要求1所述的凝血测试仪多样本处理方法,其特征在于:所述步骤五中,化学沉淀离心反应结束后,使用高效液相色谱法(hplc)检测沉淀去除的效果,确保...
【专利技术属性】
技术研发人员:牛守伟,郭小光,王志辉,
申请(专利权)人:北京众驰伟业科技发展有限公司,
类型:发明
国别省市:
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