一种微量法测定口蹄疫灭活疫苗聚乙二醇6000残留量的方法技术

技术编号:43350923 阅读:41 留言:0更新日期:2024-11-15 20:51
本发明专利技术涉及一种微量法测定口蹄疫灭活疫苗聚乙二醇6000残留量的方法,该方法包括以下步骤:⑴采用正戊醇对口蹄疫灭活疫苗样品进行破乳,即得水相抗原;水相抗原用三氯乙烯和去离子水进行除脂和稀释处理后,即得处理后的水相抗原;⑵精密量取10μg/ml~90μg/ml聚乙二醇6000系列对照品溶液和处理后的水相抗原,加高氯酸溶液混匀,室温放置15分钟后离心;取离心后各浓度聚乙二醇6000系列对照品溶液和处理后的水相抗原的上清液加至96孔平底酶标板中,加氯化钡溶液和碘溶液混匀,室温孵育后放入酶标仪读取各OD值;⑶建立直线回归方程;⑷计算口蹄疫灭活疫苗中的聚乙二醇6000残留量。本发明专利技术快速、高效、准确。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及口蹄疫灭活疫苗生产领域,尤其涉及一种微量法测定口蹄疫灭活疫苗聚乙二醇6000残留量的方法


技术介绍

1、在口蹄疫灭活疫苗生产中,纯化口蹄疫灭活抗原时,需要用聚乙二醇6000除去中间品中的杂蛋白,以提高口蹄疫灭活疫苗的146s抗原的含量,因此也产生了口蹄疫灭活疫苗聚乙二醇6000残留问题。如果聚乙二醇6000残留量偏高,可导致口蹄疫灭活疫苗产生沉淀,在对口蹄疫灭活疫苗稳定性产生严重影响的同时,也会对免疫动物产生一定的副反应等问题。

2、目前,口蹄疫灭活疫苗国家标准没有规定测定聚乙二醇6000残留量的方法。


技术实现思路

1、本专利技术所要解决的技术问题是提供一种快速、高效、准确的微量法测定口蹄疫灭活疫苗聚乙二醇6000残留量的方法。

2、为解决上述问题,本专利技术所述的一种微量法测定口蹄疫灭活疫苗聚乙二醇6000残留量的方法,包括以下步骤:

3、⑴采用正戊醇对口蹄疫灭活疫苗样品进行破乳,即得水相抗原;所述水相抗原用三氯乙烯和去离子水进行除脂和稀释处理后,即得处本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种微量法测定口蹄疫灭活疫苗聚乙二醇6000残留量的方法,包括以下步骤:

2.如权利要求1所述的一种微量法测定口蹄疫灭活疫苗聚乙二醇6000残留量的方法,其特征在于:所述步骤⑴中水相抗原按下述方法制得:量取3mL口蹄疫灭活疫苗样品于10mL的一次性离心管中,加入正戊醇0.3mL(正戊醇:疫苗=1:10),振摇混合4~5min,2~8℃静置半小时,待分层完全破乳后,用带平头针头的2mL一次性注射器吸取下层水相1.0~1.3mL于2mL一次性离心管,即得水相抗原。

3.如权利要求1所述的一种微量法测定口蹄疫灭活疫苗聚乙二醇6000残留量的方法,其特征在于:所述步骤...

【技术特征摘要】

1.一种微量法测定口蹄疫灭活疫苗聚乙二醇6000残留量的方法,包括以下步骤:

2.如权利要求1所述的一种微量法测定口蹄疫灭活疫苗聚乙二醇6000残留量的方法,其特征在于:所述步骤⑴中水相抗原按下述方法制得:量取3ml口蹄疫灭活疫苗样品于10ml的一次性离心管中,加入正戊醇0.3ml(正戊醇:疫苗=1:10),振摇混合4~5min,2~8℃静置半小时,待分层完全破乳后,用带平头针头的2ml一次性注射器吸取下层水相1.0~1.3ml于2ml一次性离心管,即得水相抗原。

3.如权利要求1所述的一种微量法测定口蹄疫灭活疫苗聚乙二醇6000残留量的方法,其特征在于:所述步骤⑴中除脂按下述方法进行:在水相抗原中加入三氯乙烯300μl,用力振摇4min;4℃ 3000g离心15分钟,吸取离心管的上清液约1ml于一支新的2ml离心管;所述三氯乙烯与所述水相抗原的体积比为1:4。

4.如权利要求1所述的一种微量法测定口蹄疫灭活疫苗聚乙二醇6000残留量的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员:马志鹏王赛措郭建荣张昊朱琳杨晶晶杨进才王富强张芳芳李杨刘洋任芳瑶黄立军王静蔺芳英麻红霞俞宗佑刘元鹏杨文龙王妤欣
申请(专利权)人:中农威特生物科技股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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