一种高通量获取实验动物胚胎心脏三维结构的成像方法技术

本发明专利技术公开了一种高通量获取实验动物胚胎心脏三维结构的成像方法，包括以下步骤：(1)收集实验动物的胚胎心脏，使用固定液进行固定；(2)步骤(1)固定后的胚胎心脏进行脱水或脱脂后再进行透明化处理；(3)将透明化处理后的胚胎心脏放入透明管中，然后放入内部灌注有折射率为1.41～1.47的透明溶液的成像室中，进行荧光成像。本发明专利技术优化了样本固定及透明化方法，可以实现快速处理，实现高通量获取胚胎心脏三维结构的目的。固定方法及透明化方法均未使胚胎心脏发生明显形变，可以放置较长时间。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于实验动物成像，具体涉及一种高通量获取实验动物胚胎心脏三维结构的成像方法。

技术介绍

1、先天性心脏病(chd)是常见的先天性疾病之一，影响大约0.8％到1.2％的胎儿。因小鼠与人类心脏发育的高度相似性，科学家们常常用小鼠作为研究chd机制的模型，在机制研究方面，识别心脏发育过程中的表型缺陷是关键的第一步。

2、现有识别胚胎心脏表型的方法包括：

3、(1)扫描激光荧光显微技术如共聚焦显微镜、光片成像和双光子成像([1]esteban,i.,schmidt,p.,desgrange,a.,raiola,m.,s.,meilhac,s.m.,kobbelt,l.,and torres,m.(2022).pseudodynamic analysis of heart tube formation in themouse reveals strong regional variability and early left–right asymmetry.natcardiovasc res 1,504–517.10.1038/s4本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高通量获取实验动物胚胎心脏三维结构的成像方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述高通量获取实验动物胚胎心脏三维结构的成像方法，其特征在于，若胚胎心脏没有表达外源荧光蛋白，则使用增强组织自发荧光的方法成像；

3.根据权利要求2所述高通量获取实验动物胚胎心脏三维结构的成像方法，其特征在于，若胚胎心脏没有表达外源荧光蛋白，则使用增强组织自发荧光的方法成像，此时：

4.根据权利要求3所述高通量获取实验动物胚胎心脏三维结构的成像方法，其特征在于，使用甲醛溶液固定时，固定时间不小于2h；使用戊二醛溶液固定时，固定时间不小于2h。

...

【技术特征摘要】

1.一种高通量获取实验动物胚胎心脏三维结构的成像方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述高通量获取实验动物胚胎心脏三维结构的成像方法，其特征在于，若胚胎心脏没有表达外源荧光蛋白，则使用增强组织自发荧光的方法成像；

3.根据权利要求2所述高通量获取实验动物胚胎心脏三维结构的成像方法，其特征在于，若胚胎心脏没有表达外源荧光蛋白，则使用增强组织自发荧光的方法成像，此时：

4.根据权利要求3所述高通量获取实验动物胚胎心脏三维结构的成像方法，其特征在于，使用甲醛溶液固定时，固定时间不小于2h；使用戊二醛溶液固定时，固定时间不小于2h。

5.根据权利要求2所述高通量获取实验动物胚胎心脏三维结构的成像方法，其特征在于，若胚胎心脏没有表达外源荧光蛋白，则使用增强组织自发荧光的方法成像，此时：

6.根据权利要求5所述高通量获取实验动物胚胎心脏三维结构的成像方法，其特征在于，脱水使用浓度依次提高直到纯酒精的酒精溶液进行梯度脱水时，设置酒精的体积浓度梯度依次为50％、75％、90...

【专利技术属性】
技术研发人员：施红军，刘向阳，
申请(专利权)人：西湖大学，
类型：发明
国别省市：

全部详细技术资料下载 我是这个专利的主人