高癸酸耐受性的达托霉素高产工程菌株及其构建和应用制造技术

本发明专利技术公开了一株高癸酸耐受性的达托霉素高产工程菌株及其构建和应用。本发明专利技术基于DptE蛋白经氨基酸突变获得了DptE突变蛋白，DptE突变蛋白包括DptE突变蛋白DptE::K454I、DptE突变蛋白DptE::K454R和DptE突变蛋白DptE::K454I::Q420N::K184Q中的一种；本发明专利技术通过将玫瑰孢链霉菌中的DptE蛋白编码基因替换为DptE突变蛋白编码基因，并敲除TagR蛋白编码基因构建了达托霉素高产工程菌株。本发明专利技术避免了传统诱变育种周期长，人力物力消耗大的缺点，且大大降低了达托霉素的生产成本，在工业化生产过程中有重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药物生物，具体涉及高癸酸耐受性的达托霉素高产工程菌株及其构建和应用。

技术介绍

1、达托霉素是治疗耐药革兰氏阳性菌感染的新型脂肽类抗生素，于2003年首次被美国fda批准上市，由cubist公司生产，主治多重耐药菌的重症感染，具有广谱的抗革兰氏阳性菌活性，在临床上应用非常广泛。

2、脂肽类抗生素在工业上通常使用微生物发酵纯化获取。脂肪酸前体(如癸酸)是脂肽类抗生素的起始生物合成元件，最终形成脂肽类抗生素的具有高度生物活性的脂肪酸尾链。因此，脂肪酸前体对于脂肽类抗生素的生物合成及其药物活性的发挥都至关重要。但脂肪酸前体的高毒性和低利用率限制了脂肽类抗生素高产策略的开发。达托霉素作为脂肽类抗生素家族重要成员，其工业生产也受限于生物合成直接前体癸酸的高细胞毒性和低利用率，一直很难通过提高直接前体浓度来提高产量。

技术实现思路

1、针对现有技术中达托霉素的生产菌种对脂肪酸前体低耐受性的不足，本专利技术提供了一株高癸酸耐受性的达托霉素高产工程菌株及其构建和应用。本专利技术通过改造达托霉素生物合本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种DptE突变蛋白，其特征在于：所述DptE突变蛋白包括DptE突变蛋白DptE::K454I、DptE突变蛋白DptE::K454R和DptE突变蛋白DptE::K454I::Q420N::K184Q中的一种；所述DptE突变蛋白DptE::K454I是由DptE蛋白的第454位赖氨酸突变为异亮氨酸而得；所述DptE突变蛋白DptE::K454R是由DptE蛋白的第454位赖氨酸突变为精氨酸而得；所述DptE突变蛋白DptE::K454I::Q420N::K184Q是由DptE蛋白的第454位赖氨酸突变为异亮氨酸、第420位谷氨酰胺突变为天冬酰胺以及第184位赖氨酸突变为谷氨酰胺...

【技术特征摘要】

1.一种dpte突变蛋白，其特征在于：所述dpte突变蛋白包括dpte突变蛋白dpte::k454i、dpte突变蛋白dpte::k454r和dpte突变蛋白dpte::k454i::q420n::k184q中的一种；所述dpte突变蛋白dpte::k454i是由dpte蛋白的第454位赖氨酸突变为异亮氨酸而得；所述dpte突变蛋白dpte::k454r是由dpte蛋白的第454位赖氨酸突变为精氨酸而得；所述dpte突变蛋白dpte::k454i::q420n::k184q是由dpte蛋白的第454位赖氨酸突变为异亮氨酸、第420位谷氨酰胺突变为天冬酰胺以及第184位赖氨酸突变为谷氨酰胺而得。

2.根据权利要求1所述的一种dpte突变蛋白，其特征在于：所述dpte蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示；所述dpte突变蛋白dpte::k454i的氨基酸序列如seq id no.4所示；所述dpte突变蛋白dpte::k454r的氨基酸序列如seq id no.6所示；所述dpte突变蛋白dpte::k454i::q420n::k184q的氨基酸序列如seq id no.8所示。

3.一种用于编码如权利要求1或2所述dpte突变蛋白的dpte突变蛋白编码基因，其特征在于：所述dpte突变蛋白编码基因包括dpte突变蛋白编码基因k454i、dpte突变蛋白编码基因k454r、dpte突变蛋白编码基因k454i::q420n::k184q中的一种；所述dpte突变蛋白编码基因k454i用于编码所述dpte突变蛋白dpte::k454i，碱基序列如seq id no.3所示；所述dpte突变蛋白编码基因k454r用于编码所述dpte突变蛋白dpte::k454r，碱基序列如seq idno.5所示；所述dpte突变蛋白编码基因k454i::q420n::k184q用于编码所述dpte突变蛋白dpte:...

【专利技术属性】
技术研发人员：李永泉，马烈，高文丽，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：