基于T7表达系统的Nissle 1917工程菌、其制备方法及应用技术方案

本发明专利技术提供了一种基于T7表达系统的Nissle 1917工程菌、其制备方法及应用。所述Nissle 1917工程菌适用于以IPTG或乳糖诱导表达外源蛋白，表达效率高，并且不含有内毒素，简化了产业化生产过程中目标产物的纯化，提高了目标产物的使用安全性，适合在工业生产中应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程，更具体地，本专利技术涉及一种基于t7表达系统的nissle 1917工程菌、其制备方法及应用。

技术介绍

1、大肠杆菌(escherichia coli，e.coli)作为一种原核表达的经典的基因工程宿主，被本领域广泛应用与表达外源基因。e.coli是一种呈短杆状的革兰氏阴性菌，是目前实验室及工业生产中应用最广泛的原核表达宿主，主要包括k-12系和b系菌株。大肠杆菌蛋白表达系统主要有以下优点：1、遗传背景清楚，经全基因组测序发现共有4405个开放性读码框；2、大肠杆菌配套的分子生物学操作元件系统成熟完善；3、易于培养和控制、转化操作简单且效率高、蛋白表达水平高、成本低、周期短等。

2、但是，作为原核表达宿主的e.coli在培养过程中会产生一类脂多糖(lipopolysaccharide，lps)结构的细菌内毒素，其会引起宿主毒性反应。细菌内毒素分子量小、对热和化学试剂稳定性强，目前主要采用离子交换、吸附、超滤和表面活性剂等方法来去除样品中的内毒素，但上述方法仍然存在效率低、特异性差、过程中所用试剂有毒性不易去除及纯化成本本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种改造大肠杆菌Nissle 1917的方法，包括：

2.一种Nissle 1917工程菌，其改造自大肠杆菌Nissle 1917，且为具有以下特征的菌株：(a)包含外源的T7 RNA聚合酶表达框；(b)其隐秘质粒被去除。

3.如权利要求1所述的方法或权利要求2所述的工程菌，其特征在于，(a)中，所述T7RNA聚合酶表达框包括操作性连接的(5’-3’)：表达驱动元件、改造的核糖体结合位点以及T7 RNA聚合酶编码基因；

4.如权利要求1所述的方法或权利要求2所述的工程菌，其特征在于，还包括：

5.如权利要求1或4所述的方法或工程菌，其特...

【技术特征摘要】

1.一种改造大肠杆菌nissle 1917的方法，包括：

2.一种nissle 1917工程菌，其改造自大肠杆菌nissle 1917，且为具有以下特征的菌株：(a)包含外源的t7 rna聚合酶表达框；(b)其隐秘质粒被去除。

3.如权利要求1所述的方法或权利要求2所述的工程菌，其特征在于，(a)中，所述t7rna聚合酶表达框包括操作性连接的(5’-3’)：表达驱动元件、改造的核糖体结合位点以及t7 rna聚合酶编码基因；

4.如权利要求1所述的方法或权利要求2所述的工程菌，其特征在于，还包括：

5.如权利要求1或4所述的方法或工程菌，其特征在于，

6.一种外源蛋白的重组...

【专利技术属性】
技术研发人员：许本宏，王晨舒，迮晓雷，
申请(专利权)人：汤臣倍健股份有限公司，
类型：发明
国别省市：