硅胶键合双手性活性中心色谱填料、制备方法及其应用属于色谱柱填料领域。制备方法步骤：（１）硅胶活化：（２）微晶纤维素６－位羟基保护；（３）羧酸酰氯化；（４）微晶纤维素２，３－位羟基衍生化和６－位羟基去保护；（５）硅胶键合２，３－位键合６－位去保护微晶纤维素反应和活化硅胶未反应硅羟基钝化得到键合型手性固定相。应用上述双手性键合型手性固定相分离不对称合成手性化合物，以正己烷－异丙醇作为流动相，对苯乙醇，硫代乙酸酯，进行分离，获得色谱图。本发明专利技术具有柱效高、分离时间短、对手性化合物分离效果好。该填料在溶剂中也不会发生溶胀，渗透性能好，柱压低，在１００％正己烷，流速１ｍｌ／ｍｉｎ，色谱柱：１５０ｘ４．６ｍｍ ｉ．ｄ条件下，柱压仅为３．３ＭＰａ。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及色谱柱填料的制备，尤其涉及键合于硅胶基质上微晶纤维素 类衍生物双手性高效液相色谱手性色谱填料的制备。
技术介绍
分离柱是色谱技术的核心，而固定相的研究则是各种高效液相色谱法赖 以建立和发展的基础。面对科研和生产中对高纯度物质的需求，开发更有效 的制备分离技术、制备色谱的新型填料和手性化合物分离填料是至关重要的。 研究开发与手性化合物相适应的分离效率高、选择性好、活性回收和质量回 收好、寿命长的固定相是人们始终追求的目标。目前己开发出很多用于液相 色谱的手性固定相，主要有多糖衍生物、环糊精和蛋白质等。最常用的手性 固定相是多糖衍生物，与其它手性固定相相比，它具有适用范围广、稳定性 好和柱容量高等显著优点。因此对该类手性固定相的研究具有重要的意义。HPLC-CSP法之所以能拆分对映体，是因为在CSP与外消旋体相互作用时，其中 一个对映体与CSP生成不稳定的短暂的对映体复合物，造成柱淋洗时保留时间 不同，从而达到拆分的目的。目前，国内外对HPLC手性色谱柱的研究大多为 涂敷型固定相，该类固定相寿命短，流动相种类少，合成新型键合型手性固 定相尤为重要。与涂敷型固定相相比，键合型手性固定流动相选择范围更广。 国外Okamoto的研究组在手性CSP的研究是最具代表性和贡献性的，我们跟踪 其在高效液相色谱纤多糖类手性固定相的研究进展，发现目前研究的多糖类 手性固定相大多数是涂敷型的，虽然有键合的手性固定相合成，但商品化的 键合型手性固定相很少，并且衍生化试剂存在手性中心的很少，只有多糖类 本身有手性中心，国外有简单介绍涂覆型双手性色谱填料的报道，但未有键 合型双手性色谱填料报道，国内对双手性色谱填料没有报道。
技术实现思路
本专利技术目的是提供一种硅胶基质上键合微晶纤维素类衍生物高效液相色 谱手性色谱填料及其制备。硅胶键合双手性活性中心色谱填料，其结构式为；<formula>formula see original document page 5</formula>(1) 硅胶活化按盐酸与硅胶体积质量比2-6ml/g，将体积百分比为20% 盐酸与30nm-300nm孔径硅胶配制成混合物，加热至90-100。C反应回流2-6小 时，抽滤、用去离子水洗涤至中性，105i:烘4-8小时，并于5(TC真空干燥4-6 小时，得活化硅胶备用；(2) 微晶纤维素6—位羟基保护将微晶纤维素与三苯基氯甲垸按质量比 1: 4混合，再加无水吡啶，无水吡啶的加入量为反应容器体积的1/3-2/3 ; 在80-IO(TC、机械搅拌、通N2的反应条件下回流18-24小时后用甲醇抽滤、 洗涤，得6—位羟基保护微晶纤维素；反应式n=40-400(3)羧酸酰氯化DL-2-苯基丙酸和DL-2-苯基丙酸摩尔量1_3倍的氯化亚 砜于50。C、机械搅拌、回流18-24小时，得到DL-2-苯基丙酰氯。反应式<formula>formula see original document page 6</formula>(4)微晶纤维素2， 3—位羟基衍生化和6—位羟基去保护称取上述6 —位羟基保护微晶纤维素，再加入与6 —位羟基保护微晶纤维素质量体积比为1:5 — 1: 15 g /ml的DL-2-苯基丙酰氯，以无水甲苯和吡啶体积比为3: 1的混 合液为溶剂，60 —IO(TC、机械搅拌、回流18-34小时后，反应完成后先用 无水甲苯抽滤、洗涤，再用甲醇和盐酸反复抽滤、洗涤，产物在40-8(TC下干 燥4h，再真空干燥4-8h。得到2， 3—位键合6—位去保护微晶纤维素。 反应式；<formula>formula see original document page 6</formula>(5)硅胶键合2， 3 —位键合6—位去保护微晶纤维素反应和活化硅胶未反应硅羟基钝化得到键合型手性固定相称取上述反应得到的2， 3—位键合6—位去保护微晶纤维素和活化硅胶按照质量比l: 2 — 1: 5混合，加入吡啶和甲苯体积比为1: 3的混合液体作 为溶剂，再加入六亚甲基二异氰酸酯反应，六亚甲基二异氰酸酯体积和活化硅胶质量比为l: l一Hg/ml， 80 — 9(TC、机械搅拌、回流24—48小时后， 冷却至30—6(TC，加入三甲基氯硅烷，三甲基氯硅烷体积和硅胶质量比为1: l一h 4g /ml，机械搅拌、回流8 — 24时后，冷却至室温。反应完成后先用 无水甲苯抽滤、洗涤，再用甲醇反复抽滤、洗涤，产物在8(TC下干燥4h， 60 。C真空干燥8h。n=40-400应用上述双手性键合型手性固定相分离不对称合成手性化合物，以正己 烷一异丙醇作为流动相，对苯乙醇，硫代乙酸酯，进行分离，获得五个色谱 图。液相色谱仪安捷伦-LC2000;检测波长254nm。本专利技术与现有技术相比，具有柱效高、分离时间短、对手性化合物分离 效果好。本实验的研究不仅在双手性中心上进行研究，并且也合成柱效更高 的键合型手性固定相。该种新型填料在溶剂中也不会发生溶胀，渗透性能好， 柱压低，在100。/。正己烷，流速lml/min，色谱柱150x4.6mm i. d条件下，柱压 仅为3. 3MPa，因此能适应高溶剂流速下的快速洗脱分离。附图说明图1为对戊氧基异苯乙醇样品液相色谱图样品RS-对戊氧基异苯乙醇样品流动相正己烷-异丙醇；等度条件体积比9: 1图2为对戊氧基异苯乙醇样品液相色谱图样品R-对戊氧基异苯乙醇样品流动相正己烷-异丙醇；等度条件体积比9: 1 图3为DL-苯乙醇进样的液相色谱图 样品DL-苯乙醇流动相正己垸-异丙醇；等度条件体积比8: 2图4为(±) —3-对氯苯基一4一硝基硫代乙酸丁酯样品液相色谱图样品(±) —3-对氯苯基一4一硝基硫代乙酸丁酯样品流动相正己垸-异丙醇；等度条件体积比9: 1图5 ( ± ) —2-对氯苯基一3 —硝基硫代乙酸丙酯进样的液相色谱图 样品2-对氯苯基一3 —硝基硫代乙酸丙酯样品流动相正己烷-异丙醇； 等度条件体积比8: 2色谱柱150x4.6ram i. d.硅胶键合填料，流动相A:正己烷溶液，B: 异丙醇溶液，流速1.5ml/min， UV-256nm.具体实施例方式实施例1:(1) 硅胶活化按盐酸与硅胶体积质量比2ml/g，将体积百分比为20%盐酸 与硅胶30nm孔径配制成混合物，加热9(TC反应回流6小时，抽滤、用去离子 水洗涤至中性，105。C烘4小时，并5(TC真空干燥6小时，得活化硅胶备用；(2) 微晶纤维素6—位羟基保护1.6g微晶纤维素、7.0g三苯基氯甲垸、， 再加入50ml无水吡啶于100ml的三口烧瓶中反应，在80。C、机械搅拌、通N2 的反应条件下回流24小时，反应完成用甲醇抽滤、洗涤，得6-位羟基保护微 晶纤维素；(3) 羧酸酰氯化10mlDL-2-苯基丙酸和6ml氯化亚砜于5(TC、机械搅拌、 通N2反应条件下回流18小时，得到DL-2-苯基丙酰氯。(4) 微晶纤维素2， 3—位羟基衍生化和6—位羟基去保护称上述6—位 羟基保护微晶纤维素0. 8g和10ml DL-2-苯基丙酰氯混合加入无水甲苯和吡啶 体积比为3: 1的40ml溶液中，60本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种硅胶键合双手性活性中心色谱填料，其结构式为； ＊＊＊ 其中 ＊＊＊ ｎ＝４０－４００，ｎ为聚合度。
【技术特征摘要】
1. 一种硅胶键合双手性活性中心色谱填料，其结构式为；其中n＝40-400，n为聚合度。2.制备权利要求1所述的硅胶键合双手性活性中心色谱填料，其特征在于 包括以下步骤(1)硅胶活化按盐酸与硅胶体积质量比2-6ml/g，将体积百分比为20% 盐酸与30nm-300nm孔径硅胶配制成混合物，加热至90-10(TC反应回流2-6小 时，抽滤、用去离子水洗涤至中性，105t:烘4-8小时，并于50。C真空干燥4-6 小时，得活化硅胶备用；(2)微晶纤维素6—位羟基保护将微晶纤维素与三苯基氯甲烷按质量比l: 4 混合，再加无水吡啶，无水吡啶的加入量为反应容器体积的1/3-2/3 ;在 80-100°C、机械搅拌、通N2的反应条件下回流18-24小时后用甲醇抽滤、洗涤， 得6—位羟基保护微晶纤维素；(3)羧酸酰氯化DL-2-苯基丙酸和DL-2-苯基丙酸摩尔量1-3倍的氯化亚 砜于5(TC、机械搅拌、回流18-24小时，得到DL-2-苯基丙酰氯；(4)微晶纤维素2， 3—位羟基衍生化和6—位羟基去保护称取上述6 —位羟基保护微晶纤维素，再加入与6 —位羟基保护微晶纤维素质量体积比为1:、5 — 1: 15 g /ml的DL-2-苯基丙酰氯，以无水甲苯和吡啶体积...
【专利技术属性】
技术研发人员：魏芸，张芳，
申请(专利权)人：北京化工大学，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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