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热稳定性提高的内切葡聚糖酶突变体及其制备方法技术

技术编号:43300879 阅读:37 留言:0更新日期:2024-11-12 16:16
本发明专利技术以地芽孢杆菌(Geobacillus sp.70PC53)来源的内切葡聚糖酶作为原始酶,公开了3种热稳定性提高的内切葡聚糖酶突变体,分别为V217L、N264Y和R170P/N264Y。本发明专利技术提供的内切葡聚糖酶突变体热稳定性优于原始酶,经95℃处理后,突变体相比原始酶的残留酶活可提高217%;本发明专利技术提供的内切葡聚糖酶突变体在65℃~95℃内的相对酶活均高于原始酶,能够在更高且更广的温度范围内保持良好的催化性能,工业应用前景较好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种内切葡聚糖酶突变体,尤其涉及一种热稳定性提高的内切葡聚糖酶突变体,属于基因工程。


技术介绍

1、纤维素是自然界中分布最广、含量最多的一种多糖,是环境友好、可生物降解的天然有机高分子材料。纤维素及其衍生物广泛用于生物医药、食品、电子元件、新能源等诸多领域,其水解产物是酿酒工程、生产纸张和纺织品、生物燃料和化学品等的重要原料。作为植物细胞壁的主要结构成分,纤维素通常与半纤维素、果胶和木质素结合在一起,因此对植物源产品的质地影响很大。例如在食品加工业中,纤维素的存在会降低果汁的提取率和品质,对生产效率和产品质量等造成负面影响。而在各种降解纤维素的方法中,利用纤维素酶的生物降解法凭借反应条件温和、环境友好等优点,成为与有关纤维素的工业生产中的关注焦点。

2、内切葡聚糖酶是一种重要的纤维素酶,能够随机剪切纤维素多糖链内部的无定形区域,水解糖苷键、打破纤维素链,产生不同长度的寡糖和新链的末端,在降解纤维素分子中发挥重要作用。不同来源的内切葡聚糖酶的酶学性质差异很大,目前已知的内切葡聚糖酶在高温条件下催化效率不高,无法满足工业生产的需求。中本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种内切葡聚糖酶突变体,其特征在于,所述内切葡聚糖酶突变体的氨基酸序列由如SEQ ID NO.1所示序列经突变得到,所述突变为V217L或N264Y或R170P/N264Y。

2.一种核酸分子,其特征在于,所述核酸分子编码权利要求1所述的内切葡聚糖酶突变体。

3.根据权利要求2所述的核酸分子,其特征在于,所述核酸分子的核苷酸序列由如SEQID NO.2所示序列经碱基突变得到。

4.一种载体,其特征在于,包含权利要求3所述的核苷酸序列。

5.根据权利要求4所述的载体,其特征在于,所述载体为克隆载体或表达载体。

<p>6.一种重组细胞...

【技术特征摘要】

1.一种内切葡聚糖酶突变体,其特征在于,所述内切葡聚糖酶突变体的氨基酸序列由如seq id no.1所示序列经突变得到,所述突变为v217l或n264y或r170p/n264y。

2.一种核酸分子,其特征在于,所述核酸分子编码权利要求1所述的内切葡聚糖酶突变体。

3.根据权利要求2所述的核酸分子,其特征在于,所述核酸分子的核苷酸序列由如seqid no.2所示序列经碱基突变得到。

4.一种载体,其特征在于,包含权利要求3所述的核苷酸序列。

5.根据权利要求4所述的载体,其特征在于,所述载体为克隆载体或表达载体。

6.一种重组细胞,其特征在于,所述重组细胞包含权利要求4所述的载体。

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【专利技术属性】
技术研发人员:任鑫坤余克洋曲展王瑾丰吴怡菲程冰洁
申请(专利权)人:南京大学
类型:发明
国别省市:

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