肺炎克雷伯菌用引物组及用于检测或鉴定肺炎克雷伯菌的试剂盒制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，涉及肺炎克雷伯菌用引物组及用于检测或鉴定肺炎克雷伯菌的试剂盒。本发明专利技术以肺炎克雷伯菌中具有高度保守性和特异性的LPTD基因和MERR基因为靶标进行引物和探针的设计，通过对二基因进行定量检测，从而达到对肺炎克雷伯菌的快速检测目的。其中，LPTD基因和MERR基因的检测灵敏度分别为5.28×10<supgt;1</supgt;copies/μL和5.78×10<supgt;1</supgt;copies/μL，可以满足双重PCR的检测要求。本发明专利技术能够在同一PCR体系中，同时完成对肺炎克雷伯菌两个靶标基因的检测，较单靶标基因检测更加准确，有效排除了假阳性与假阴性结果，对提升肺炎克雷伯菌的临床检测水平具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物检测或鉴定领域，涉及一种肺炎克雷伯菌用引物组及用于检测或鉴定肺炎克雷伯菌的试剂盒。

技术介绍

1、肺炎克雷伯菌属于肠杆菌科、克雷伯菌属，是一种需氧的革兰阴性杆菌。肺炎克雷伯菌是常见的机会性致病菌，在正常人的口咽部的检出率达1％-6％，在住院患者中的检出率则可高达20％，其常感染具有基础疾病的患者，包括酒精中毒者，患糖尿病者或者患慢性阻塞性肺疾病者，可致肠外感染，包括尿路感染、肺炎、肝脓肿、内源性眼内炎、手术切口感染和危及生命的感染，如感染性心内膜炎和败血症。准确快捷的检测病患是否感染肺炎克雷伯菌，对临床诊治和用药具有重大的意义。

2、在病原体检测中，pcr法由于其快速简便的特点逐渐呈现出替代细菌培养法和血清学法的态势。引物和探针的特异性是pcr法特异性和敏感性的基础。目前多款市售试剂盒中，均只有一对引物和一条探针，在一个反应中只检测肺炎克雷伯菌一个靶标基因，由于肺炎克雷伯菌基因组的多样性，单基因检测必定会造成漏检的情况发生。

技术实现思路

1、为了解决背景技术中存在的上述技术问本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种肺炎克雷伯菌用引物组，其特征在于：所述肺炎克雷伯菌用引物组包括两组双重荧光定量PCR引物组合，所述肺炎克雷伯菌用引物组的序列信息是：

2.根据权利要求1所述的肺炎克雷伯菌用引物组在检测或鉴定肺炎克雷伯菌时的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述肺炎克雷伯菌用引物组中的LPTD-F以及LPTD-R用于扩增肺炎克雷伯菌的LPTD基因；所述肺炎克雷伯菌用引物组中的MERR-F以及MERR-R用于扩增肺炎克雷伯菌的MERR基因。

4.一种肺炎克雷伯菌用探针，其特征在于：所述肺炎克雷伯菌用探针包括LPTD探针以及MERR探针；

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【技术特征摘要】

1.一种肺炎克雷伯菌用引物组，其特征在于：所述肺炎克雷伯菌用引物组包括两组双重荧光定量pcr引物组合，所述肺炎克雷伯菌用引物组的序列信息是：

2.根据权利要求1所述的肺炎克雷伯菌用引物组在检测或鉴定肺炎克雷伯菌时的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述肺炎克雷伯菌用引物组中的lptd-f以及lptd-r用于扩增肺炎克雷伯菌的lptd基因；所述肺炎克雷伯菌用引物组中的merr-f以及merr-r用于扩增肺炎克雷伯菌的merr基因。

4.一种肺炎克雷伯菌用探针，其特征在于：所述肺炎克雷伯菌用探针包括lptd探针以及merr探针；

5.根据权利要求4所述的肺炎克雷伯菌用探针，其特征在于：所述lptd探针的5'端标记有荧光报告基团6-fam，所述lptd探针的3'端标记有荧光淬灭基团bhq1；所述merr探针的5'端标记有荧光报告基团vic，所述merr探针的3'端标记有荧光淬灭基团bhq1。

6.根据权利要求4或5所述的肺炎克雷伯菌用探...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨波，李增辉，胡征，
申请(专利权)人：湖北工业大学，
类型：发明
国别省市：

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