【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及葡萄抗逆种质筛选领域，尤其涉及一种葡萄逆境胁迫装置及葡萄抗逆筛选方法。
技术介绍
1、葡萄是一种具有重要经济效益的多年生果树，在栽培生产中常受到盐碱、干旱、洪涝、低温等逆境胁迫，造成葡萄产量和品质下降甚至树体死亡，为此，选育具有抗逆性的葡萄种质是当前葡萄育种的重点方向之一。葡萄育种通常需要对种质资源进行抗逆性鉴定以及从巨量杂交后代中筛选具有目标性状的个体，工作量大。同时因土地资源限制，待筛选种质需要及时进行筛选鉴定以排除非目标个体，提高土地利用率。当前葡萄种质资源的抗逆筛选方法多以一年生幼苗或当年扦插营养钵苗为试材，在温室或人工气调室内，模拟逆境条件对其进行胁迫。如在对葡萄幼苗进行耐盐鉴定或筛选试验中，通常要花费50-60天将各种质枝段培养为3-5片叶植株，设置5-10个无性繁殖系重复，通过定量滴灌或者基部浸泡nacl溶液一定时间后，调查植株盐害指数，用以评价其耐盐能力。这类方法需花费较长时间培养幼苗，并且需要占据较大场地，同时试验操作与调查评价过程复杂。为此，本专利技术利用葡萄枝条扦插易生根这一特点，提供一种葡萄多抗筛选评价的装置与方法，用以解决当前葡萄抗逆筛选工作中存在的费时、费工、费地等问题。
技术实现思路
1、本专利技术目的在于克服现有技术存在的不足，提供了一种葡萄逆境胁迫装置及葡萄抗逆筛选方法。
2、所述葡萄逆境胁迫装置，包括：无盖半封闭容器，拎手、底部排水口、温度探头线进线口、电热线进线口、电热线出线、电热线、电热线固定基座、温度探头、温度探头
3、进一步地，底部排水孔由带螺纹的拧盖、带螺纹的出水口、纱网卡槽、纱网夹组成，其中，纱网夹由纱网上盖板、纱网和底板构成，使用时将纱网放至底板上，用盖板将纱网压入底板卡槽中，使用纱网夹插入纱网卡槽。
4、进一步地，电热线固定基座设置有固定电热线的卡扣。
5、进一步地，纱网为24目过滤网。
6、本专利技术另提供葡萄抗逆筛选方法，所述方法包括以下步骤：
7、步骤1.准备葡萄抗逆筛选的基质；
8、步骤2.准备葡萄抗逆筛选试材；
9、步骤3.葡萄抗逆筛选胁迫前准备工序；
10、步骤4.葡萄抗逆筛选胁迫处理；
11、步骤5.对种质进行抗逆性评价筛选。
12、进一步地，步骤1所述准备葡萄抗逆筛选的基质，具体包括：
13、步骤1.1将河沙过10目筛后，用0.25％的多菌灵水溶液浸泡后晒干或烘干，用做基质a，将河沙过18目筛后，用0.25％的多菌灵水溶液浸泡后晒干或烘干，与粒径为1-3mm的园艺蛭石以3:1的体积比混合均匀，作为基质b；
14、步骤1.2拧开底部排水孔上的盖子，将基质a均匀铺至水平放置的无盖半封闭容器内部，覆盖电热线后继续铺放2-3厘米厚，放置温控器配备的温度探头，继续铺放2厘米厚的基质a。
15、进一步的，步骤2所述准备葡萄抗逆筛选试材，具体包括：
16、步骤2.1将休眠后的葡萄一年生枝条，选择粗细均匀且顶部芽眼饱满的枝段，剪成长约20厘米的枝段，枝段上部剪留平口，下部剪留45°斜口，枝段上芽眼不少于2个，每个种质选取不少于40个均匀一致的枝段，每10个用皮筋或绑绳捆扎，用于胁迫试验；
17、步骤2.2对所有待胁迫种质的枝段做好标记，于0.25％的多菌灵水溶液中浸泡不少于12小时；
18、步骤2.3将浸泡后的枝段下部斜口浸入促根溶液a中6小时。
19、进一步地，步骤2.3中，配制促根溶液a步骤如下：
20、按照质量份比为10：10：1称取吲哚乙酸、萘乙酸、海藻精；
21、将10份吲哚乙酸与10份萘乙酸溶解于1-2份的无水乙醇，再加入1份海藻精均匀混合，最后用5000倍质量的蒸馏水稀释。
22、进一步地，步骤3所述葡萄抗逆筛选胁迫前准备工序，具体包括：
23、步骤3.1在人工气候室或温室等环境可控场地,室温控制在15±2℃。将成捆的枝段在电热线垂直覆盖范围内竖着码放，枝段应离无盖半封闭容器内壁不少于10厘米，码放过程中，在无盖半封闭容器内壁周围铺填基质b，以支撑枝段保持垂直状态；
24、步骤3.2码放完毕后，在枝段间与枝段周围继续填充基质b，使其充满枝段周围空间，用清水冲洗枝段顶部残留基质b，反复填充并冲洗，直至基质b表面位于枝段上部芽眼下3厘米左右，静置4-5小时直至全部排水孔无水排出，在枝段表面喷洒0.25％的多菌灵水溶液，随后在无盖半封闭容器1上部覆盖黑色塑料薄膜，拧上底部排水孔的盖子；
25、步骤3.3待24小时后，将电热线接入控温仪，并将控温仪连接电源，以3℃/日的速度升温，直至温度升至25℃±2℃左右，持续10天后，将温度升至30℃并保持6小时，关闭电源，将无盖半封闭容器上覆盖的黑色塑料薄膜换成透明塑料薄膜，调整室温至25±2℃，3-5天后，待枝段上部芽眼90％以上见绿后，开始胁迫处理。
26、进一步地，步骤4所述葡萄抗逆筛选胁迫处理方法，具体包括：
27、步骤4.1对枝段进行干旱胁迫处理；
28、步骤4.1.1揭开无盖半封闭容器上部覆盖的透明塑料薄膜，以4％聚乙二醇(peg-6000)溶液于无盖半封闭容器内侧无枝段处向基质b上缓慢浇灌，直至基质b表面出现积水，拧开底部排水口的拧盖，3小时后，至无水排出，拧上底部排水口上的拧盖，用透明塑料薄膜再次覆盖所述无盖半封闭容器；
29、步骤4.1.2 2天后，以6％ peg-6000溶液重复上述步骤4.1.1；
30、步骤4.1.3再过2天后，以8％ peg-6000溶液重复上述步骤4.1.1；
31、步骤4.1.4 6-8天后，待1/3的测试枝段出现芽眼萎蔫或死亡时，干旱胁迫处理停止；
32、步骤4.2盐胁迫处理：
33、步骤4.2.1揭开无盖半封闭容器1上部覆盖的透明塑料薄膜，以0.2％ nacl溶液于无盖半封闭容器内侧无枝段处向基质b上浇灌，直至基质b表面出现积水，拧开底部排水口的拧盖，3小时后，待无水排出，拧上底部排水口上的拧盖,用透明塑料薄膜再次覆盖所述无盖半封闭容器；
34、步骤4.2.2 2天后，以0.3％nacl溶液重复上述步骤4.2.1；
35、步骤4.2.3再过2天后，以0.4％nacl溶液重复上述步骤4.2.1；
36、步骤4.2.4 5-7天后，待1/3的测试枝段出现芽眼萎蔫或死亡时，盐胁迫处理停止；
37、步骤4.3水涝胁迫处理：
38、步骤4.3.1揭开无盖半封闭容器本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.葡萄逆境胁迫装置，其特征在于，包括：无盖半封闭容器1，拎手2、底部排水口3、温度探头线进线口4、电热线进线口5、电热线出线6、电热线7、电热线固定基座8、温度探头9、温度探头连接线10、上部排水孔11；其中，无盖半封闭容器1由A面、B面、C面、D面和位于底部的E面构成，A面与C面的上部设有拎手2，A面的下部设置底部排水口3，上部设置上部排水孔11，C面下部分别设置温度探头线进线口4、电热线进线口5、电热线出线口6，E面上设置有电热线7、电热线固定基座8、温度探头9、温度探头连接线10。
2.按照权利要求1所述葡萄逆境胁迫装置，其特征在于，所述底部排水孔3由带螺纹的拧盖31、带螺纹的出水口32、纱网卡槽33、纱网夹34组成，其中，纱网夹34由纱网上盖板341、纱网342和底板343构成，使用时将纱网342放至底板343上，用盖板341将纱网342压入底板343卡槽中，使用纱网夹34插入纱网卡槽33。
3.按照权利要求1所述葡萄逆境胁迫装置，其特征在于，所述电热线固定基座8设置有固定电热线7的卡扣。
4.按照权利要求1所述葡萄逆境胁迫装置，其特
5.使用权利要求1所述葡萄逆境胁迫装置的葡萄抗逆筛选方法，包括以下步骤：
6.按照权利要求5所述葡萄抗逆筛选方法，步骤1中，所述准备葡萄抗逆筛选的基质，具体包括：
7.按照权利要求5所述述葡萄抗逆筛选方法，步骤2所述准备葡萄抗逆筛选试材，具体包括：
8.按照权利要求5所述葡萄抗逆筛选方法，步骤2.3中，配制促根溶液A的具体步骤为：
9.按照权利要求5所述葡萄抗逆筛选方法，步骤3所述葡萄抗逆筛选胁迫前准备工序，具体包括：
10.按照权利要求5所述葡萄抗逆筛选方法，步骤4所述葡萄抗逆筛选胁迫处理方法，具体包括：
...【技术特征摘要】
1.葡萄逆境胁迫装置，其特征在于，包括：无盖半封闭容器1，拎手2、底部排水口3、温度探头线进线口4、电热线进线口5、电热线出线6、电热线7、电热线固定基座8、温度探头9、温度探头连接线10、上部排水孔11；其中，无盖半封闭容器1由a面、b面、c面、d面和位于底部的e面构成，a面与c面的上部设有拎手2，a面的下部设置底部排水口3，上部设置上部排水孔11，c面下部分别设置温度探头线进线口4、电热线进线口5、电热线出线口6，e面上设置有电热线7、电热线固定基座8、温度探头9、温度探头连接线10。
2.按照权利要求1所述葡萄逆境胁迫装置，其特征在于，所述底部排水孔3由带螺纹的拧盖31、带螺纹的出水口32、纱网卡槽33、纱网夹34组成，其中，纱网夹34由纱网上盖板341、纱网342和底板343构成，使用时将纱网342放至底板343上，用盖板341将纱网342压入底板343卡槽中，使用纱网夹34插入...
【专利技术属性】
技术研发人员：尹勇刚，韩斌，李敏敏，贾楠，孙艳，刘长江，王新宇，韩树立，郭勇，
申请(专利权)人：河北省农林科学院昌黎果树研究所，
类型：发明
国别省市：
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