一种饲料预混料及其专用枯草芽孢杆菌制造技术

本发明专利技术公开了一种饲料预混料及其专用枯草芽孢杆菌。本发明专利技术提供的枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ）Ｂｓ００６，其保藏号为ＣＧＭＣＣ　Ｎｏ．２４３４。本发明专利技术提供的饲料预混料，它的活性成分是用枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ）Ｂｓ００６　ＣＧＭＣＣ　Ｎｏ．２４３４发酵底物得到的培养物；所述底物为豆粕、蚕豆粕、棉籽粕、菜籽粕、豆粉和玉米粉中的至少一种。本发明专利技术提供的预混料具有无毒、无抗药性、无残料、无副作用的特点，可添加入多种动物饲料中，显著促进动物生长、提高饲料转化率、增强动物的免疫功能。本发明专利技术提供的预混料制备方法简单、成本较低。本发明专利技术具有巨大的经济价值和社会意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，涉及一种词料预混料及其专用枯草芽孢杆菌。
技术介绍
一般能被动物食用又能给动物某种或多种营养的物质统称为饲料。随着人口逐年增多及人类饮食习惯改变，对动物性食物需求量增加，使动物饲料需求也不断提升。根据《国际饲料》估计，2002年全球词料工业产量达6亿4百万吨。但畜牧业和饲料业的高速发展同时也带来一些副作用，滥用抗生素就是其中之一。抗生素的滥用容易引起畜禽内源性感染或二重感染；饲料中使用抗生素导致畜产品中的药物残留，直接威胁人类健康；动物产生的耐药性转移给人类，使人类的用药效果降低，各种疾病蔓延；有些药物通过粪便排泄出来，造成环境污染。抗生素在食品中的残留已成为全世界人们关注的热点。养殖业面临的形势，一方面是全社会对动物肉品安全、绿色的要求，另一方面是养殖农民面对猪、鸡、水产动物等动物疾病的困扰。寻找一种无毒副作用、无残留、无耐药性的新型抗菌剂是当前科学界的重大课题和紧迫任务。根据欧盟70-524号令，从2006年1月起全面禁止在饲料中添加抗生素，目前我国农业部也颁布了禁用药物的法令。生物科技饲料是解决畜产品安全问题的一把钥匙，唯有开发生物科技饲料替代抗生素可以满足出口市场对绿色肉品的需求。全价配合饲料也称全日粮配合饲料，能直接用于饲喂对象，全面满足词喂对象的营养需要，主要包括能量词料、蛋白质饲料和矿物质等营养物质。预混料是全价配合饲料的一种重要组分。预混料是添加剂预混合饲料的简称，它是将一种或多种微量组分(包括各种微量矿物元素、各种维生素、合成氨基酸、某些药物等添加剂)与稀释剂或载体按要求配比，均匀混合后制成的中间型配合饲料产品。绿色饲料添加物，广义来讲，指无污染、无残留、抗疾病和能促进生长的天然添加物，近年来先后已开发的种类包括微生物制剂、酵素制剂、酸化剂、调味剂、中草药制剂和纯天然萃取物等。微生物制剂就是生菌剂，又可称为益生菌，活菌制剂在国外已被广泛应用，1989年美国食品与药物管理局(FDA)公布了可以直接词喂且一般认为是安全的微生物种名单，共有41种，年使用量在8000吨以上。我国对绿色添加物的研究和应用一直高度重视，中央一号文件连续三年提出要大力推广健康养殖方式。在此政策引导下，我国益生菌的研究方兴未艾，许多科研单位和企业都在积极探索，有的己取得了突破性的进展，研究出的益生菌不仅完全可替代抗生素，而且大幅提高饲料蛋白的转化率，为农户节省饲料成本，并縮短动物饲养时间，改善肉蛋奶品性，科技水平居于世界领先。益生菌必将对提高我国养殖技术水平、增加农民养殖收入、去除畜产品中有害物质以及养殖过程的污染具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种饲料预混料及其专用枯草芽孢杆菌。本专利技术所提供的枯草芽孢杆菌(&ci77s s^tih's)，名称为Bs006，是从土壤中分离得到的，已于2008年4月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为北京市朝阳区大屯路)，保藏号为CGMCCNo.2434。本专利技术所提供的饲料预混料，它的活性成分是用枯草芽孢杆菌(&77m幼Z;7is) Bs006 CGMCC No. 2434发酵底物得到的培养物；所述底物为豆粕、蚕豆粕、棉籽粕、菜籽粕、豆粉和玉米粉中的至少一种。所述饲料预混料中枯草芽孢杆菌Bs006的含量为2X 104-4X 107CFU/kg，优选为2X106CFU/kg。本专利技术还提供了制备所述预混料的方法，包括如下制备活性成分的步骤以枯草芽孢杆菌(5acj77ws w力7j^) Bs006 CGMCC No. 2434发酵底物得到的培养物作为活性成分；所述底物为豆粕、蚕豆粕、棉籽粕、菜籽粕、豆粉和玉米粉中的至少一种。所述发酵条件为30-45。C培养18-48小时。枯草芽孢杆菌Bs006在进行所述发酵前可先进行活化。活化时可采用如下培养基每升培养基中含有肉膏提取物3g，蛋白胨5g;蒸馏水配制，pH7.0。还可以将活化的枯草芽孢杆菌Bs006先进行扩增再发酵。扩增枯草芽孢杆菌Bs006可采用如下培养基每升培养基中含有20-30g脱脂奶粉、5-15g焦糖蜜；蒸馏水配制，pH7. 0;可采用如下扩增条件30-45'C培养18-48小时。扩增枯草芽孢杆菌Bs006具体可采用如下培养基每升培养基中含有25g脱脂奶粉和10g焦糖蜜。本专利技术提供的预混料具有无毒、无抗药性、无残料、无副作用的特点，并且可以添加入多种动物饲料中，显著促进动物生长、提高饲料转化率、增强动物的免疫功能。本专利技术提供的预混料制备方法简单、成本较低。本专利技术具有巨大的经济价值和社会意义。以下的实施例便于更好地理解本专利技术，但并不限定本专利技术。具体实施例方式下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。实施例l、枯草芽孢杆菌(勘w77ws幼&ih's) Bs006 CGMCC No. 2434的获得一、 菌种的获得1、 自台湾省台中县取一克土壤，加入10ml Trypticase Soy Broth (TSB培养液；每升含胰蛋白胨20.0g，右旋糖1.0g，磷酸氢二钠2.0g，硝酸钾1.0g，将pH调至7.0，固态培养基加入1.5%琼脂)中震荡混合均匀后，以常规巴氏德消毒法消毒。2、 将TSB培养液进行10倍梯度稀释至10—4 ，每个梯度稀释液于37'C温度培养24小时，进行芽孢化菌株的初步增菌筛选。3、 再自各稀释管取100 u 1至TSA (胰酶大豆琼脂，Difco， Sparks, U. S. A.)平板上，并以L型玻棒涂抹均匀，同样37t:培养24小时，再以随机选取方式挑取单一菌落至一个新的TSA平板上，并以三步法划开，重复纯化继代三次以后，得到一株具有芽孢化特性和蛋白酶活性的菌株，将其命名为Bs006。二、 菌种的特性1、 形态特征菌落外观型态呈圆形或不规则状，表面黯淡，不透明，有皱折，为淡黄色或褐色。革兰氏染色阳性，产单孢杆菌，大小约(0.6-0.8nm) X (1.5-3um)，通常利用周生鞭毛移动。2、 生理特性化学异营，有氧代谢，接触酶(catalase)为阳性；具水解淀粉的能力，在20-45'C生长良好；具耐压、耐热、耐酸、耐碱特性。3、 热稳定性枯草芽孢杆菌(^ac^7ws犯Z 7h) Bs006 CGMCC No. 2434的热稳定性见表1。表1枯草芽孢杆菌Bs006 CGMCC No. 2434的热稳定性温度作用时间存活率温度作用时间存活率75 °C5min99%105°C5min98%510min99%lOmin90%15min99%15min78%90 °C5min99%110°C5min95%lOmin99%lOmin83%15min99%15min61%100°C5min99%lOmin98%15min95%4、耐酸碱性分别将枯草芽孢杆菌(^3ci77ws s^7A) Bs006 CGMCC No.2434在不同pH值的缓冲液中(pH2-7缓冲液为使用0. 2M的化2朋04溶液与0. 2M HCl进行调剂，pH8-10缓冲液为使用0.2M的磷酸氢二钠盐溶液与0.2MNOH进行调剂)，静置三冲时，然后统计存活率，结果见表2。表2枯草芽孢杆菌Bs006 CGMCC No. 2434的耐本文档来自技高网...

【技术保护点】
枯草芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ）Ｂｓ００６，其保藏号为ＣＧＭＣＣ　Ｎｏ．２４３４。

【技术特征摘要】
1、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Bs006，其保藏号为CGMCC No.2434。2、 一种饲料预混料，它的活性成分是用枯草芽孢杆菌(feciW^s^^7^s)Bs006CGMCC No.2434发酵底物得到的培养物；所述底物为豆粕、蚕豆粕、棉籽粕、菜籽粕、豆粉和玉米粉中的至少一种。3、 如权利要求2所述的预混料，其特征在于所述饲料预混料中枯草芽孢杆菌Bs006的含量为2X 104-4X 107CFU/kg。4、 如权利要求3所述的预混料，其特征在于所述饲料预混料中枯草芽孢杆菌Bs006的含量为2X106CFU/kg。5、 一种制备权利要求2至4中任一所述预混料的方法，包括如下制备活性成分的步骤以枯草芽孢杆菌(&w77i/s Bs006 CGMCC No. 2434发酵底...

【专利技术属性】
技术研发人员：邱云棕，干小英，曹君平，徐庆霖，程景章，汪志阳，张萍，
申请(专利权)人：北京欣博阳科技有限公司，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]