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芽胞杆菌中β-酮酰基-ACP合酶Ⅲ在促进芽胞杆菌代谢产物分泌效率中的应用制造技术

技术编号:43274080 阅读:20 留言:0更新日期:2024-11-12 16:00
本发明专利技术属于微生物领域,公开了芽胞杆菌中β‑酮酰基‑ACP合酶Ⅲ在促进芽胞杆菌代谢产物分泌效率中的应用。本发明专利技术利用枯草芽胞杆菌PykzA、P43、PnadE三种启动子在地衣芽胞杆菌中整合过表达β‑酮酰基‑ACP合酶Ⅲ基因fabHB,将其应用于聚γ‑谷氨酸、碱性蛋白酶和纳豆激酶生产。通过摇瓶发酵,三种地衣芽胞杆菌的聚γ‑谷氨酸产量均有提高,至少提高了31.02%;以三种地衣芽胞杆菌为宿主表达碱性蛋白酶,其中P43启动子酶活提高了53.66%,其余两种启动子工程菌酶活与对照菌株无明显变化;以三种地衣芽胞杆菌为宿主表达纳豆激酶,其中PnadE启动子酶活提高37.91%,其余两种启动子工程菌酶活降低。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物领域,具体涉及芽胞杆菌中β-酮酰基-acp合酶ⅲ在促进芽胞杆菌代谢产物分泌效率中的应用。


技术介绍

1、地衣芽胞杆菌由于其强大的蛋白表达和分泌能力以及独特的遗传背景和安全特性使其在食品工业和制药等领域具有重要的生物应用,其不仅可以作为一种性能优良的工业菌株生产外源蛋白或酶制剂,还可以作为工业生产菌株发酵生产高附加值化学品如:聚γ-谷氨酸、抗生素、核苷酸和调味品等。而地衣芽胞杆菌高效表达系统仍限制很多蛋白的表达,目前仅限于少量工业化酶的生产。

2、聚γ-谷氨酸(γ-pga)是由d-谷氨酸和(或)l-谷氨酸单体经γ-酰胺键聚合而成的一种多功能生物高分子聚合物,已被应用于农业、化妆品、食品、水处理和医药等产业中。碱性蛋白酶apre作为工业上的主要水解酶,具有高催化活性和水溶性的优良特性,应用于洗涤剂、皮革加工甚至环境治理等领域。纳豆激酶aprn作为一种碱性丝氨酸蛋白酶,能在体内通过多种机制溶解血栓,达到预防或治疗心血管疾病的目的,已被开发为新型溶栓药物。生产成本高、酶表达水平低、热稳定性差等问题,限制其工业化生产。因此,进一步促进本文档来自技高网...

【技术保护点】

1. 芽胞杆菌中β-酮酰基-ACP合酶Ⅲ在促进芽胞杆菌代谢产物分泌效率中的应用,所述β-酮酰基-ACP合酶Ⅲ为SEQ ID NO.2所示。

2.根据权利要求1所述的应用,所述的芽胞杆菌为地衣芽胞杆菌。

3. 根据权利要求1所述的应用,所述的β-酮酰基-ACP合酶Ⅲ的编码基因为SEQ IDNO.1所示。

4.根据权利要求2所述的应用,所述的芽胞杆菌为地衣芽胞杆菌WX-02。

5.根据权利要求4所述的应用,所述的应用过程包括:将芽胞杆菌中β-酮酰基-ACP合酶Ⅲ的编码基因替换掉地衣芽胞杆菌WX-02中sigE基因。

<p>6.根据权利要求...

【技术特征摘要】

1. 芽胞杆菌中β-酮酰基-acp合酶ⅲ在促进芽胞杆菌代谢产物分泌效率中的应用,所述β-酮酰基-acp合酶ⅲ为seq id no.2所示。

2.根据权利要求1所述的应用,所述的芽胞杆菌为地衣芽胞杆菌。

3. 根据权利要求1所述的应用,所述的β-酮酰基-acp合酶ⅲ的编码基因为seq idno.1所示。

4.根据权利要求2所述的应用,所述的芽胞杆菌为地衣芽胞杆菌wx-02。

5.根据权利要求4所述的应用,所述的应用过程包括:将芽胞杆菌中β-酮酰基-acp合酶ⅲ的编码基因替换掉地衣芽胞杆菌wx-02中sige基因。

6.根据权利要求1所述的应用,所述的芽胞杆菌代谢产物为地衣芽胞杆菌的代谢产物γ-...

【专利技术属性】
技术研发人员:蔡冬波陈耀中陈守文付玉熹饶忆张凤娟祝志豪何鹏辉
申请(专利权)人:湖北大学
类型:发明
国别省市:

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