一种胰蛋白酶亲和材料及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种胰蛋白酶亲和材料及其制备方法与应用，属于胰蛋白酶分离纯化技术领域，本发明专利技术对配体BTI进行优化，构建了串联2BTI和3BTI蛋白，以串联蛋白为新的配体，Fe<subgt;3</subgt;O<subgt;4</subgt;@PDA为载体材料，制备了两种新的亲和材料：Fe<subgt;3</subgt;O<subgt;4</subgt;@PDA@2BTI和Fe<subgt;3</subgt;O<subgt;4</subgt;@PDA@3BTI。本发明专利技术制备的胰蛋白酶亲和材料Fe<subgt;3</subgt;O<subgt;4</subgt;@PDA@2BTI和Fe<subgt;3</subgt;O<subgt;4</subgt;@PDA@3BTI对胰蛋白酶吸附量逐渐显著增大。本发明专利技术制备的胰蛋白酶亲和材料使用方便、稳定性好、能够高容量纯化胰蛋白酶，可通过高效纯化获得高纯度的胰蛋白酶。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及胰蛋白酶分离纯化，具体涉及一种胰蛋白酶亲和材料及其制备方法与应用。

技术介绍

1、胰蛋白酶是一种相对分子量约为24kda的丝氨酸蛋白水解酶，对精氨酸和赖氨酸残基羧基侧的肽键具有特异性水解作用。胰蛋白酶有两个大小几乎相等的结构域，每个结构域包含一组六条反向平行的多肽链，通过氢键形成β-折叠。his-57、asp-102和ser-195是胰蛋白酶的三个催化活性位点。作为一种特异性很强的蛋白酶，胰蛋白酶在食品、医药、纺织、皮革、洗涤剂和现代生物技术等领域具有广泛的应用。在食品加工方面，胰蛋白酶可提高蛋黄的乳化性能，增强蛋清蛋白的发泡能力，改善蛋清蛋白的加工性能，赋予食物均匀细腻的味道以及出色的质地特性。胰蛋白酶可用于去除鱼皮，或从鱼皮中提取明胶。胰蛋白酶在纺织工业中主要用于丝绸脱胶，改善蚕丝的表面性能。在制革加工中，胰蛋白酶主要用于皮革脱灰软化，去除非胶原蛋白和松散胶原纤维，使皮革更柔软、皮面更光滑富弹性。胰蛋白酶还可用作洗涤剂，去除织物污渍。在医药方面，胰蛋白酶可用于治疗胃肠道疾病、胰腺炎和营养不良等疾病。在现代生物技术方面，胰蛋白酶用于蛋白质消本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种胰蛋白酶亲和材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述n为2或3。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，将所述nBTI加入20mM pH＝8的Na2HPO4-KH2PO4缓冲液，得到浓度为0.2mg/mL的nBTI的配体溶液。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述聚多巴胺修饰的磁性Fe3O4纳米粒子与nBTI的配体溶液的用量比为1g:8～30mL。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述搅拌的时间为10min～4h。

<p>6.根据权利要求...

【技术特征摘要】

1.一种胰蛋白酶亲和材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述n为2或3。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，将所述nbti加入20mm ph＝8的na2hpo4-kh2po4缓冲液，得到浓度为0.2mg/ml的nbti的配体溶液。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述聚多巴胺修饰的磁性fe3o4纳米粒子与nbti的配体溶液的用量比为1g:8～30ml。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述搅拌的时间为10min～4h。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述聚多巴胺修饰的磁性fe3o4纳米粒子的制备方法为：取fe3o4磁性粒子于去离子水中超声20min，加入盐酸多巴胺，采用naoh溶液调节ph至8.5，于37℃搅拌，洗涤...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晨，李娇，崔晓东，刘昕，
申请(专利权)人：山西大学，
类型：发明
国别省市：