【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药领域,特别是涉及一种用于大规模培养的诱导性多能干细胞的冻存液及其制备方法。
技术介绍
1、潜在的临床应用需要大量的诱导性多能干细胞(induced pluripotent stemcells,ipscs)作为治疗性细胞(109-1010),其通过从主细胞库或工作细胞库中解冻和培养ipscs而制备。在这一过程中,大规模细胞库(4×109)的质量影响了ipscs解冻后的扩增和随后的谱系特异性分化的效率。因此,在细胞库建设中,一个稳健和高效的深低温(例如-196℃液氮环境)保存过程成为ipscs制备的关键一步。
2、传统的ipscs深低温保存技术中,包括玻璃化或慢冷技术等方法,虽然ipscs作为簇或贴壁细胞等显示出良好的细胞存活率,但这些方法由于可扩展性差,仅适合科研实验室少量培养,不适合工业化大规模生产。以往为了解决可扩展性,将ipscs深低温保存在rho相关激酶抑制剂(rocki)中,如y-27632分离单细胞,以提高细胞存活。然而,这些方案要求ipscs在贴附的单层培养中复苏,并且不能与大规模培养如生物
...【技术保护点】
1.一种用于大规模培养的诱导性多能干细胞的冻存液,其特征在于,所述冻存液包括溶剂和以所述冻存液的终体积计的如下含量的各组分:白桦脂醛4-6mM、沙苑子苷1.5-2.5mM和香草醇丁醚7-13mM。
2.如权利要求1所述的冻存液,其特征在于:所述溶剂为DMSO。
3.如权利要求1所述的冻存液,其特征在于:所述冻存液中,所述溶剂的体积分数为80%(v/v)。
4.如权利要求1所述的冻存液,其特征在于:所述冻存液包括以所述冻存液的终体积计的如下含量的各组分:白桦脂醛5mM、沙苑子苷2mM和香草醇丁醚10mM。
5.权利要求1-
...【技术特征摘要】
1.一种用于大规模培养的诱导性多能干细胞的冻存液,其特征在于,所述冻存液包括溶剂和以所述冻存液的终体积计的如下含量的各组分:白桦脂醛4-6mm、沙苑子苷1.5-2.5mm和香草醇丁醚7-13mm。
2.如权利要求1所述的冻存液,其特征在于:所述溶剂为dmso。
3.如权利要求1所述的冻存液,其特征在于:所述冻存液中,所述溶剂的体积分数为80%(v/v)。
4.如权利要求1所述的冻存液,其特征在于:所述冻存液包括以所述冻存液的终体积计的如下含量的各组分:白桦脂醛5mm、沙苑子苷2mm和香草醇丁醚10mm。
5.权利要求1-4任一项所述的用于大规模培养的诱导性多能干细胞的冻存液的制备方法,其特...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘佳,
申请(专利权)人:深圳市中佳生物医疗科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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