一种PCR试剂冻干球的制备方法技术

本发明专利技术涉及冻干制剂技术领域，公开了一种PCR试剂冻干球的制备方法，包括以下步骤：将冻干保护剂、PCR试剂和溶剂制成混合液；所述冻干保护剂包括海藻糖、葡聚糖、甘氨酸和明胶；将混合液预冻成球后，采用以下程序冷冻干燥：‑50~‑53℃保持1~1.5 h；升至‑25~‑30℃保持1~2 h；降至‑50~‑53℃保持1~2 h；开启真空；升至‑44~‑46℃保持12~15 h；升至‑39~‑41℃保持8~12 h；阶梯升温至‑19~‑21℃，期间每升4~5℃后保持1~1.5 h再继续升温；升至‑1~1℃保持1~2 h；升至24~26℃保持4~6 h；升至29~31℃保持3~4 h。本发明专利技术采用了特定的冻干保护剂组成和冷冻干燥程序，能够使制得的PCR试剂冻干球具有较好的外观形态，且能够提高冻干球的抗吸潮萎缩能力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及冻干制剂，尤其涉及一种pcr试剂冻干球的制备方法。

技术介绍

1、传统pcr检测试剂为液态状态，除相对稳定的缓冲液易于保存外，其他成分如dna聚合酶、rna逆转录酶、ung酶等在常温下稳定性极差，必须在低温-20℃左右的冷链环境中储运及保存，以确保试剂有效成分的生物活性。而冷链运输不仅成本高，且因环境温度变化若造成试剂反复冻融会直接影响检测试剂的性能和保质期。为了更方便安全地存储和运输，对液体试剂进行冷冻干燥是一个很好的选择，冻干试剂的优势包括可常温运输、储存，降低成本；且使用方便，性能稳定，特别适合于无低温储存条件的即时检测场景。

2、pcr试剂的冷冻干燥技术包括原位和非原位两种方式。原位冻干制剂是将添加冻干保护剂的pcr试剂分装于八连排管或对应耗材内，放入冻干机进行冻干，但因受管材的影响，不同耗材间冻干工艺差异较大，普遍只能实现小批量生产，且出舱后需真空密封保存，成品冻干形状不规则，使用过程中难以分装转移。非原位冻干制剂即冻干球，是将pcr试剂在液氮中预冻成球，转移至西林瓶或其它载体中，然后转移至真空干燥箱半压盖进行冷冻干燥，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种PCR试剂冻干球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述混合液中，海藻糖、葡聚糖、甘氨酸和明胶的浓度分别为0.12~0.15 g/mL、0.03~0.05 g/mL、0.008~0.01 g/mL和0.001~0.002 g/mL。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述冻干保护剂还包括甘露醇；所述混合液中，甘露醇的浓度为0.008~0.01 g/mL。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述混合液中，甘露醇与葡聚糖之间的质量比不低于1...

【技术特征摘要】

1.一种pcr试剂冻干球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤s1中，所述混合液中，海藻糖、葡聚糖、甘氨酸和明胶的浓度分别为0.12~0.15 g/ml、0.03~0.05 g/ml、0.008~0.01 g/ml和0.001~0.002 g/ml。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤s1中，所述冻干保护剂还包括甘露醇；所述混合液中，甘露醇的浓度为0.008~0.01 g/ml。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤s1中，所述混合液中，甘露醇与葡聚糖之间的质量比不低于1:6.25。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤s2.1中，所述升至-25~-30℃的速率高于0.5℃/min，所述降至-50~-53℃的速率低于1℃...

【专利技术属性】
技术研发人员：付亚丽，王婉婷，彭雅梅，叶嘉明，
申请(专利权)人：杭州霆科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：