一种适用于MALDI-MS研究的植物样品电磁场辅助冷冻组织平面化方法技术

技术编号:43207553 阅读:17 留言:0更新日期:2024-11-01 20:25
本发明专利技术公开了一种适用于MALDI‑MS研究的植物样品电磁场辅助冷冻组织平面化方法。该方法涉及使用一对可调节的电磁铁置于植物组织的两侧。在优化的电磁场强度下,冷冻组织的非破坏性平面化和规则化被诱导并允许组织进行纵向切片,这有利于后续使用MALDI‑MSI对组织的内源性分子进行分析。为验证这一概念,我们选取了两种形态不规则的植物的花瓣和叶片,来评估EMFAFTP对植物样品中次生代谢产物、氨基酸、脂质和蛋白质等的MALDI‑MSI表征性能。结果显示MALDI‑MSI表征这些内源分子的能力显著增强,证明了EMFAFTP技术的稳定性并表明其有可能成为将MALDI‑MSI推进到植物空间组学新时代的标准技术。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于物质分析领域,具体涉及电磁场辅助冷冻组织平面化方法在制备用于植物学研究的maldi-msi样品中的应用。


技术介绍

1、基质辅助激光解吸/电离质谱成像(matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry imaging,maldi-msi)是一种有前景且强大的分子分析技术,可促进内源性和外源性化合物(如蛋白质、多肽、脂质、聚糖、神经递质、核苷酸、代谢物和药物分子)的无标签示踪,且具有高空间分辨率和高特异性。与免疫组化类似,maldi-msi能够实现组织样本中化合物的高通量原位检测,并且不需要抗体。尽管maldi-msi是一项成熟的技术,已广泛应用于生物学的各个领域,包括基础医学、动物学、微生物学和药学,但其在植物研究中的应用相对有限。原因之一是植物具有特定的结构如表皮蜡质、角质层和细胞壁,这些结构对于植物最大限度地减少水分流失和保护其免受生物和非生物侵害至关重要。嵌在外皮层的表皮蜡质和角质层通常被认为是植物的第一个亲脂性屏障。它们是植物在恶劣条件下生存的关键。然而,这些特本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种电磁场辅助冷冻植物组织平面化的方法,包括下述步骤:在冷冻的植物组织两侧施加一对磁场力可调节的平行电磁场以实现冷冻组织平面化。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于优选地,所述植物组织为不规则形状的植物组织;所述植物组织包括但不限于:花、叶;

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述方法通过下述步骤实现:

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述两个平板金属板的尺寸相同,每个金属板的尺寸可为7.5×7.5cm,厚度为0.5-1.5mm;

5.一种制备植物组织纵向切片的方法,包括下述步骤:

6.根据权利要...

【技术特征摘要】

1.一种电磁场辅助冷冻植物组织平面化的方法,包括下述步骤:在冷冻的植物组织两侧施加一对磁场力可调节的平行电磁场以实现冷冻组织平面化。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于优选地,所述植物组织为不规则形状的植物组织;所述植物组织包括但不限于:花、叶;

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述方法通过下述步骤实现:

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述两个平板金属板的尺寸相同,每个金属板的尺寸可为7.5×7.5cm,厚度为0.5-1.5mm;

5.一种制备植物组织纵向切片的方法,包括下述步骤:

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述切片方法更具体的步骤如下:首先将冰块固定并切除不平的部分以获得平整光滑的冰面;接下来,将ito导电玻片的非导电面用水湿润,并紧紧地贴在冰块的平面上直到两者结合在一起,用移液器向间隙缓慢加水进一步冷冻固定;随后,将合适尺寸的双面碳导电胶带粘附在ito导电玻片的导电侧;采用权利要求1-4中任一项所述的方法处理的植物组织被平稳地放置在导电胶带表面,然后轻轻按压以稳定组织,随后对组织进行纵向切片;切片过程通过旋转刀片小心...

【专利技术属性】
技术研发人员:王晓东秦亮胡浩
申请(专利权)人:华怡创生北京科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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