GT酶突变体和MA酶突变体、催化合成D-手性肌醇用工程菌及其制备方法技术

本发明专利技术公开了GT酶突变体和MA酶突变体、催化合成D‑手性肌醇用工程菌及其制备方法，涉及生物技术领域，GT酶突变体和MA酶突变体，GT酶突变体是将核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的肌醇脱氢酶进行突变而得；所述MA酶突变体是将核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示的酮基异构酶进行突变而得；所述肌醇脱氢酶氨基酸序列的突变位点为D127、P155和Y235，所述酮基异构酶氨基酸序列的突变位点为F41、P99，对肌醇的转化率提高明显。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及gt酶突变体和ma酶突变体、催化合成d-手性肌醇用工程菌及其制备方法。

技术介绍

1、手性肌醇(d-chiro-inositol，简称dci)是肌肉肌醇(myo-inositol，mi)的一种差向异构体，在自然界中主要存在于苦荞以及豆科植物等中。d-手性肌醇具有多种生理功能，可用于治疗ii型糖尿病、多囊卵巢综合征和抑制肝纤维化的发展；亦可作为保健品原料及膳食补充剂。目前美国已有多个品牌的d-手性肌醇保健品上市，具有广阔的市场前景。

2、d-手性肌醇可从荞麦等植物中提取，但是d-手性肌醇在这些植物中的含量很低，导致分离提取的成本较高。d-手性肌醇也可以通过化学合成法进行制备，但由于步骤繁琐，副产物难以分离，同时会有毒性物质的残留，影响产品的品质；另外需要用到大量的有机溶剂，对环境不友好性。此外d-手性肌醇可通过水解d-松醇或春日霉素生产，然而原料d-松醇或春日霉素的价格昂贵，因而经济性差。而目前生物转化法由于其温和、安全、环保等优势合成d-手性肌醇具有广阔的应用前景，但目前生物转化法合成d-手性肌醇筛选到的肌醇脱氢酶和本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.GT酶突变体和MA酶突变体，其特征在于：GT酶突变体是将核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的肌醇脱氢酶进行突变而得；

2.如权利要求1所述的GT酶突变体和MA酶突变体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

3.催化合成D-手性肌醇用工程菌的制备方法，其特征在于：将权利要求1-2中任一项所述的GT酶突变体和MA酶突变体分别进行PCR扩增反应、DpnI消化模板和转化，培养，得催化合成D-手性肌醇的工程菌，分别命名为BW25113-pYB1s-GT工程菌和BW25113-pYB1s-MA工程菌。

<p>4.如权利要求3...

【技术特征摘要】

1.gt酶突变体和ma酶突变体，其特征在于：gt酶突变体是将核苷酸序列如seq id no.1所示，氨基酸序列如seq id no.2所示的肌醇脱氢酶进行突变而得；

2.如权利要求1所述的gt酶突变体和ma酶突变体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

3.催化合成d-手性肌醇用工程菌的制备方法，其特征在于：将权利要求1-2中任一项所述的gt酶突变体和ma酶突变体分别进行pcr扩增反应、dpni消化模板和转化，培养，得催化合成d-手...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱理平，申莹莹，徐良平，魏萍萍，
申请(专利权)人：诸城市浩天药业有限公司，
类型：发明
国别省市：