用于马个体识别和亲子鉴定的微卫星标记引物组及其18-plex快速分型检测方法技术

本发明专利技术一种用于马个体识别和亲子鉴定的微卫星标记引物组及其18‑plex快速分型检测方法，属于分子生物学领域。本发明专利技术应用多重PCR技术，通过筛选马高多态性四碱基重复微卫星位点，并结合引物设计,研发了一套基于四碱基重复微卫星标记的马个体识别和亲子鉴定快速检测方法。包括筛选出马的16个高多态性四碱基重复微卫星位点并结合2个性别鉴定位点，将所述16对微卫星引物和2对性别鉴定引物合成18对荧光引物，通过一次PCR扩增得到16个目标微卫星序列和2个性别鉴定结果。本发明专利技术简便、高效，同时可鉴定检测样品的性别。扩增结果稳定且具有更高的灵敏度，适用于马的个体识别、亲子鉴定，以及基于微卫星标记的马群体遗传学研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学领域，涉及荧光多重pcr技术和微卫星分型技术，具体为用于马个体识别和亲子鉴定的微卫星标记引物组及其18-plex快速分型检测方法。

技术介绍

1、微卫星(short tandem repeat,str)，是真核动物基因组中的串联重复序列，它是共显性标记，其符合孟德尔遗传规律。其串联的重复序列具有多态性，根据多个微卫星标记的分型结果，可以对个体进行区分从而实现个体识别；根据孟德尔遗传规律对比亲本与子代的个体识别分型信息，即可完成亲子鉴定。

2、微卫星标记可分为二碱基重复、三碱基重复和四碱基重复等多种类型。用于马个体识别检测的多为二碱基重复标记，但该类型标记具有分型易出错、分型效率低、stutter峰值高等问题，每一个分型结果都需通过人工审核获得，严重的影响了该工作的准确性和时效性。而用于人类和犬、猫等动物的个体识别技术均采用分型快速、准确的四碱基重复标记。因此，本研究拟通过ncbi公布的马基因组数据筛选高多态性四碱基重复标记，结合多重pcr技术研制基于四碱基重复标记的马匹快速个体识别和亲子鉴定新技术。</p>
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【技术保护点】

1.一个马个体识别和亲子鉴定的微卫星标记的引物组别，其特征在于：由16对微卫星引物序列及2对性别鉴定位点引物序列组成，18对引物序列及携带的荧光标记为：

2.采用如权利要求1所述用于马个体识别和亲子鉴定的微卫星标记引物组18-plex快速检测方法，其特征在于：按如下步骤进行：确定马的16个微卫星位点和2个性别鉴定位点，并将18对微卫星引物合成为18对荧光标记引物，PCR扩增得到18条目标微卫星序列及检测结果分析步骤。

3.根据权利要求1所述用于马个体识别和亲子鉴定的微卫星标记引物组18-plex快速检测方法，其特征在于：所述PCR扩增得到18条目标微卫星序列，按照...

【技术特征摘要】

1.一个马个体识别和亲子鉴定的微卫星标记的引物组别，其特征在于：由16对微卫星引物序列及2对性别鉴定位点引物序列组成，18对引物序列及携带的荧光标记为：

2.采用如权利要求1所述用于马个体识别和亲子鉴定的微卫星标记引物组18-plex快速检测方法，其特征在于：按如下步骤进行：确定马的16个微卫星位点和2个性别鉴定位点，并将18对微卫星引物合成为18对荧光标记引物，pcr扩增得到18条目标微卫星序列及检测结果分析步骤。

3.根据权利要求1所述用于马个体识别和亲子鉴定的微卫星标记引物组18-plex快速检测方法，其特征在于：所述pcr扩增得到18条目标微卫星序列，按照如下步骤进行：

4.根据权利要求1或2所述用于马个体识别和亲子鉴定的微卫星标记引物组18-p...

【专利技术属性】
技术研发人员：尚嵩洋，张俊鹏，张树义，王喆，张德夫，
申请(专利权)人：沈阳农业大学，
类型：发明
国别省市：