一种高效稳定的萤火虫荧光素酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术属于基因工程领域，具体公开了一种新型萤火虫荧光素酶变体及其在微生物含量快速检测和作为报告基因的应用。本发明专利技术公开的新型萤火虫荧光素酶突变体的催化活力、热稳定性显著提高，并且发光波长更容易穿过细胞膜，对低浓度的微生物更加敏感，因此该新型萤火虫荧光素酶变体更适合用于微生物含量快速检测和作为报告基因使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种高活性和高热稳定性的萤火虫荧光素酶突变体，属于基因工程。

技术介绍

1、生物发光是生物体产生和发射光的现象，广泛存在于包括细菌、真菌、海洋和陆生动物在内的生物体内，具有多种生物功能。研究最广泛的生物发光系统之一是来自北美萤火虫( photinus pyralis)的荧光素酶（ photinus pyralis luciferase, ppyluc）。萤火虫荧光素酶在三磷酸腺苷(atp)、镁和氧的存在下催化 d -荧光素的氧化，产生氧荧光素并在波长 560nm 处发射黄绿色光。

2、北美萤火虫荧光素酶，作为研究基因表达和蛋白相互作用的报告基因，已广泛应用于生物技术和医学研究。它的优点包括高灵敏度、低背景噪声和非侵入性，使其成为各种应用中有价值的工具。此外，基于发光强度与 atp 量的正相关关系，北美萤火虫荧光素酶也常被用于微生物的快速定量检测。

3、然而，北美萤火虫荧光素酶的使用还存在诸多限制因素。荧光素酶在生物应用中的期望特性包括 atp本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种新型萤火虫荧光素酶变体，其特征在于，含有如（1）-（3）中任一项所述的氨基酸序列：

2.一种生物材料，其特征在于，包括（a）-（d）中任一项的生物材料，

3.根据权利要求 2 所述的生物材料，其特征在于，所述重组载体为原核系统表达载体或真核系统表达载体；所述原核系统表达载体为大肠杆菌表达载体；所述真核系统表达载体为酵母表达载体，或昆虫细胞表达载体，或哺乳类细胞表达载体；以及如权利要求 2 a)和 b）所述核酸分子的序列为报告基因的质粒载体。

4.根据权利要求 2 所述的生物材料，其特征在于，所述重组细胞为原核细胞或真核细胞，所述原核细胞为大肠杆...

【技术特征摘要】

1.一种新型萤火虫荧光素酶变体，其特征在于，含有如（1）-（3）中任一项所述的氨基酸序列：

2.一种生物材料，其特征在于，包括（a）-（d）中任一项的生物材料，

3.根据权利要求 2 所述的生物材料，其特征在于，所述重组载体为原核系统表达载体或真核系统表达载体；所述原核系统表达载体为大肠杆菌表达载体...

【专利技术属性】
技术研发人员：白宇，许勇，
申请(专利权)人：安徽省医学科学研究院，
类型：发明
国别省市：