梨小食心虫钠离子通道L1014F突变位点的LAMP检测引物组及方法技术

本发明专利技术涉及分子生物技术领域，具体公开了一种梨小食心虫钠离子通道L1014F突变的LAMP检测引物组及方法，LAMP检测引物组包括正向外引物F3、反向外引物B3、正向内引物FIP、反向内引物BIP和环状引物LooP‑B。利用上述引物组对梨小食心虫钠离子通道进行扩增，扩增结束后可对结果进行判定。利用本发明专利技术提供的检测引物组建立的检测梨小食心虫钠离子通道L1014F突变位点的方法，灵敏度高、检测范围大，扩增效果好，检测结果准确可靠，适用于梨小食心虫的快速检测，对鳞翅目有害昆虫抗药性监测和抗药性早期预警具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物，特别涉及一种梨小食心虫钠离子通道l1014f突变位点的lamp检测引物组及利用该引物组建立的检测方法。

技术介绍

1、梨小食心虫grapholita molesta(busck)属鳞翅目lepidoptera卷蛾科tortricidae，是一种危害严重的世界性果树害虫，主要以幼虫蛀食桃、梨、苹果、李等多种蔷薇科果树的嫩梢和果实。其在东北等地一年发生3-4代，往南变为一年4-5代；随着气候逐渐变暖，世代数呈现增加趋势。第1、2代幼虫蛀食桃梢，少量危害梨、苹果梢。接近夏季，果树折梢率增高，显著影响树形树势，随着果实出现，幼虫开始蛀食果实的幼嫩部分。梨小食心虫危害严重影响果实的品质和质量，对果树产业造成重大的经济损失。

2、目前对于梨小食心虫的防治主要依赖化学防治，而长期大量的使用化学药剂造成了害虫抗药性的产生。目前已有研究表明梨小食心虫对拟除虫菊酯类农药产生了抗药性，如高效氯氟氰菊酯等。拟除虫菊酯类杀虫剂产生的靶标抗性，被称为击倒抗性，而靶标抗性是昆虫抗药性产生的重要机制之一。钠离子通道基因与击倒抗性紧密连锁，其基因的突变与本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种梨小食心虫钠离子通道L1014F突变的LAMP检测引物组，其特征在于，所述引物组包括正向外引物F3、反向外引物B3、正向内引物FIP、反向内引物BIP和环状引物LooP-B；

2.一种包含权利要求1所述引物组的试剂盒。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括DNA提取试剂和LAMP反应的必要试剂。

4.一种权利要求1所述的引物组或权利要求2所述的试剂盒在检测梨小食心虫钠离子通道L1014F突变中的用途。

5.一种利用权利要求1所述的引物组检测梨小食心虫钠离子通道L1014F突变的方法，其特征在于，包括下面这些步骤...

【技术特征摘要】

1.一种梨小食心虫钠离子通道l1014f突变的lamp检测引物组，其特征在于，所述引物组包括正向外引物f3、反向外引物b3、正向内引物fip、反向内引物bip和环状引物loop-b；

2.一种包含权利要求1所述引物组的试剂盒。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括dna提取试剂和lamp反应的必要试剂。

4.一种权利要求1所述的引物组或权利要求2所述的试剂盒在检测梨小食心虫钠离子通道l1014f突变中的用途。

5.一种利用权利要求1所述的引物组检测梨小食心虫钠离子通道l1014f突变的方法，其特征在于，包括下面这些步骤：

6.根据权利要求5所述的检测梨小食心虫钠离子通道l1014f突变的方法，其特征在于，利用荧光染料显色法对扩增结果进行判定的过程为：在扩增产物中加入染料，观察颜色变化，若出现天蓝色，表明待测样品中存在钠离子通道l1014f位点突变；若出现紫罗兰色，表明待测样品中无钠离子通道l1014f突变。

7.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈茂华，彭雄，唐红成，侯文华，苏莎，张晓赫，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：