一种农杆菌介导的原始小球藻遗传转化方法技术

本发明专利技术公开了一种农杆菌介导的原始小球藻遗传转化方法，包括使用含有重组质粒的农杆菌转染原始小球藻的步骤，所述重组质粒为包含待转入基因的表达载体。本发明专利技术建立了一种新的适合A.protothecoides的遗传转化方法，采用本发明专利技术方法进行农杆菌介导的原始小球藻遗传转化，能够获得稳定遗传的微藻转化株，用于原始小球藻基因功能的研究，为原始小球藻的基因工程操作拓宽了道路，同时能够更好地服务于微藻工业应用研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微藻基因工程，具体地，涉及一种农杆菌介导的原始小球藻的遗传转化方法。

技术介绍

1、原始小球藻(auxenochlorella protothecoides)为一种典型的单细胞产油微藻，属于绿藻门、四胞藻纲、绿球藻目、小球藻科，细胞直径2-10微米，无鞭毛结构，具有1个双层膜结构的杯状叶绿体。与大多数自养型的绿藻不同，a.protothecoides既能够利用光能进行自养生长，又能够利用外源有机物进行异养生长。在异养生长的情况下能够大幅提高a.protothecoides的生物量和油脂含量，并且a.protothecoides脂肪酸组分中油酸(c18:1)含量很高，约占总脂肪酸的48％，适合于生物柴油生产和各种工业应用。另外，原始小球藻抗逆性强，对高盐、温度及ph以及重金属离子等环境因素具有良好的适应性。尽管目前对原始小球藻的生理生化特性进行了广泛的研究，但是利用基因工程调控技术进行基因表达，研究基因功能报道较少。

2、微藻基因工程技术的关键是建立稳定高效的遗传转化体系，而遗传转化方法的建立则是实现外源基因在宿主细胞中表达的关键，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种农杆菌介导的原始小球藻遗传转化方法，其特征在于，包括使用含有重组质粒的农杆菌转染原始小球藻的步骤。

2.根据权利要求1所述的农杆菌介导的原始小球藻遗传转化方法，其特征在于，包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的农杆菌介导的原始小球藻遗传转化方法，其特征在于，所述步骤1中的重组质粒为包含待转入基因的表达载体。

4.根据权利要求3所述的农杆菌介导的原始小球藻遗传转化方法，其特征在于，所述表达载体为包含待转入基因和抗性基因的双元表达载体。

5.根据权利要求4所述的农杆菌介导的原始小球藻遗传转化方法，其特征在于，所述农杆菌为农杆菌EHA1...

【技术特征摘要】

1.一种农杆菌介导的原始小球藻遗传转化方法，其特征在于，包括使用含有重组质粒的农杆菌转染原始小球藻的步骤。

2.根据权利要求1所述的农杆菌介导的原始小球藻遗传转化方法，其特征在于，包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的农杆菌介导的原始小球藻遗传转化方法，其特征在于，所述步骤1中的重组质粒为包含待转入基因的表达载体。

4.根据权利要求3所述的农杆菌介导的原始小球藻遗传转化方法，其特征在于，所述表达载体为包含待转入基因和抗性基因的双元表达载体。

5.根据权利要求4所述的农杆菌介导的原始小球藻遗传转化方法，其特征在于，所述农杆菌为农杆菌eha105。

6.根据权利要求2所述的农杆菌介导的原始小球藻遗传转化方法，其特征在于，所述步...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨金水，刘奎，袁红莉，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：