一种强化黑曲霉高效生产及提取蛋白质的方法技术

本发明专利技术公开了一种强化黑曲霉高效生产及提取蛋白质的方法，本发明专利技术涉及生物工程技术领域，具体包括以下步骤：菌种活化：将黑曲霉3.316菌株在无菌的条件下接入斜面培养基，并置于28℃的恒温培养箱中培养5～6天；孢子悬浮液的制备：采用无菌生理盐水清洗，并加入0.05％的吐温80和玻璃珠，在250～350r/min的转速下摇1～2h，经振荡打散后，将孢子液过滤，然后将其置于30～40℃、180～200r/min的条件下孵育2～3h，进行吸水膨胀。该强化黑曲霉高效生产及提取蛋白质的方法，通过对黑曲霉的培养工艺进行改进，提高了黑曲霉的生产量，同时通过对蛋白质的提取方法进行改进优化，可最大程度上获得胞内胞外蛋白，同时也可有效降低提取蛋白过程中造成的损失。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程，具体为一种强化黑曲霉高效生产及提取蛋白质的方法。

技术介绍

1、黑曲霉(aspergillus niger)是一种重要的丝状子囊真菌，在自然生长过程中，黑曲霉是通过腐生方式进行繁殖，通过分泌大量的、多种用途的酶来降解环境中的有机生物大分子，获得营养物质供菌丝吸收和生长。根据菌丝形态可以分为两类：有孢和无孢黑曲霉。相比于酵母和细菌等其他微生物细胞工厂黑曲霉最大的优势是具有较强的耐受性，可以适应极端条件的培养1。黑曲霉能够在6-47℃、ph1.4-9.8较宽泛的温度和极端的ph范围内生长，最适生长温度为35-37℃，ph为3-7。黑曲霉是发酵工业领域的重要菌株，具有极端环境耐受性、高生产经济性、高食品安全性、蛋白折叠和修饰能力强以及蛋白分泌量大等特点。

2、黑曲霉的低成本发酵培养、优良的蛋白质分泌能力和食品加工安全性使其成为开发大规模同源或异源蛋白生产平台很有前途的候选物种。然而，蛋白质分泌的潜在瓶颈受到多种因素的影响，为了使黑曲霉成为高效表达分泌系统以满足工业和生产的需要，为此，本专利技术提供了一种强化黑曲霉高效生产及提取本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种强化黑曲霉高效生产及提取蛋白质的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种强化黑曲霉高效生产及提取蛋白质的方法，其特征在于：所述孢子液采用脱脂棉进行过滤，除去菌丝断片和没有打散的孢子团。

3.根据权利要求1所述的一种强化黑曲霉高效生产及提取蛋白质的方法，其特征在于：所述种子接种量为1×106个/mL，种子培养基温度为37℃，培养转速为230～250r/min，培养时间为48～72h；所述发酵培养基的温度为37℃，发酵转速为250～280r/min，发酵时间为48～96h。

4.根据权利要求1所述的一种强化黑曲霉高效生产及...

【技术特征摘要】

1.一种强化黑曲霉高效生产及提取蛋白质的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种强化黑曲霉高效生产及提取蛋白质的方法，其特征在于：所述孢子液采用脱脂棉进行过滤，除去菌丝断片和没有打散的孢子团。

3.根据权利要求1所述的一种强化黑曲霉高效生产及提取蛋白质的方法，其特征在于：所述种子接种量为1×106个/ml，种子培养基温度为37℃，培养转速为230～250r/min，培养时间为48～72h；所述发酵培养基的温度为37℃，发酵转速为250～280r/min，发酵时间为48～96h。

4.根据权利要求1所述的一种强化黑曲霉高效生产及提取蛋白质的方法，其特征在于：所述玻璃珠振荡提取法中，菌体与提取缓冲液的质量比为1:(8～10)，沸水浴5～8min，离心时间为30～40min。

5.根据权利要求1所述的一种强化黑曲霉高效生产及提取蛋白质的方法，其特征在于：所述玻...

【专利技术属性】
技术研发人员：李军，潘勇韬，侍朋宝，邓翔宇，石泽涵，
申请(专利权)人：河北科技师范学院，
类型：发明
国别省市：