一种用于肿瘤来源外泌体PD-L1定量检测的试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及肿瘤检测技术领域，具体涉及一种用于肿瘤来源外泌体PD‑L1定量检测的试剂盒。本发明专利技术提供的试剂盒，基于流式细胞术定量检测肿瘤来源外泌体PD‑L1，可实现高通量的样本检测，提高了检测结果的准确性。并且，本发明专利技术依托梯度浓度PD‑L1蛋白定量标准品，绘制流式平均荧光强度与PD‑L1蛋白浓度的标准曲线，可实现样品中PD‑L1的绝对定量，摆脱了传统步骤中过夜孵育过程，极大缩短了检测时间，提高了检测效率。因此，本发明专利技术能够为肿瘤来源外泌体PD‑L1的快速检测以及相关癌症的诊断、治疗及预后评估提供有效的技术支撑。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及肿瘤检测，具体涉及一种用于肿瘤来源外泌体pd-l1定量检测的试剂盒。

技术介绍

1、肿瘤来源外泌体(tumor-derived exosomes)是一种由肿瘤细胞以自分泌或旁分泌的方式分泌到肿瘤微环境中的囊泡状小体，其直径在50～200nm，密度为1.13～1.19g/ml。肿瘤来源外泌体含有多种来源于肿瘤细胞的核酸、脂质及膜表面蛋白，肿瘤细胞可以通过外泌体作为调控元件，与肿瘤微环境中的免疫细胞进行通信并重新编程，参与多种生物学过程。

2、细胞程序性死亡-配体1(programmed cell death 1ligand 1，pd-l1)是由cd274基因编码的第一型跨膜蛋白，蛋白质全长约33kda，可以与程序性死亡-受体1(programmeddeath receptor 1，pd-1)相互作用，是著名的免疫检查点。表达于外泌体膜表面的pd-l1(后续简称外泌体pd-l1)在肿瘤发生和发展过程中有着十分重要的影响。外泌体pd-l1是pd-l1的一种重要形式，外泌体pd-l1这种远距分泌模式在肿瘤转移发生过程中发挥重要作用，可以直本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于肿瘤来源外泌体PD-L1定量检测的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的检测靶标为肿瘤来源外泌体PD-L1蛋白；

2.根据权利要求1所述的用于肿瘤来源外泌体PD-L1定量检测的试剂盒，其特征在于，CD63亲和外泌体捕获磁珠、EpCAM亲和肿瘤来源外泌体捕获磁珠、抗His抗体磁珠均具有四氧化三铁基质。

3.根据权利要求1所述的用于肿瘤来源外泌体PD-L1定量检测的试剂盒，其特征在于，所述外泌体洗脱液中含有400～600mM咪唑。

4.根据权利要求3所述的用于肿瘤来源外泌体PD-L1定量检测的试剂盒，其特征在于，所述外泌体洗脱液的组成为：400～60...

【技术特征摘要】

1.一种用于肿瘤来源外泌体pd-l1定量检测的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的检测靶标为肿瘤来源外泌体pd-l1蛋白；

2.根据权利要求1所述的用于肿瘤来源外泌体pd-l1定量检测的试剂盒，其特征在于，cd63亲和外泌体捕获磁珠、epcam亲和肿瘤来源外泌体捕获磁珠、抗his抗体磁珠均具有四氧化三铁基质。

3.根据权利要求1所述的用于肿瘤来源外泌体pd-l1定量检测的试剂盒，其特征在于，所述外泌体洗脱液中含有400～600mm咪唑。

4.根据权利要求3所述的用于肿瘤来源外泌体pd-l1定量检测的试剂盒，其特征在于，所述外泌体洗脱液的组成为：400～600mm咪唑，260～320mm氯化钠，40～60mm磷酸二氢钠，基质为超纯水。

5.根据权利要求1所述的用于肿瘤来源外泌体pd-l1定量检测的试剂盒，其特征在于，所述人源pdl1重组蛋白的氨基酸序列如seq id no.3所示。

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【专利技术属性】
技术研发人员：郑一超，张熙雅，王博，高雅，刘宏民，皮特·海德文，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：