一种脂质体、cfDNA提取处理液及其制备方法和应用技术

技术编号:42996257 阅读:46 留言:0更新日期:2024-10-15 13:25
本发明专利技术公开了一种脂质体、cfDNA提取处理液及其制备方法和应用,该脂质体由5~30mM胆固醇和100~600mM磷脂组成;所述磷脂为1,2‑二棕榈酰基‑sn‑甘油‑3‑磷酸乙醇胺‑N‑(琥珀酰)、1,2‑二棕榈酰基‑sn‑甘油‑3‑磷酸乙醇胺‑N‑(琥珀酰)的钠盐、1,2‑二硬脂酰磷脂酰甘油、1,2‑二硬脂酰磷脂酰甘油的钠盐、1,2‑二硬脂酰基‑sn‑丙三基‑3‑磷酸胆碱中的一种或多种。本发明专利技术的cfDNA提取处理液提取效率高,操作简单、成本低廉。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及循环游离dna检测炼狱,具体涉及一种脂质体、cfdna提取处理液及其制备方法和应用。


技术介绍

1、循环游离dna(circulating free dna,cfdna)是在外周血中发现的游离于细胞外的dna,是核小体凋亡dna在细胞内循环核酸酶的作用下天然断裂形成的平均长度为180~200bp的小片段。cfdna释放到血液循环中的机制目前主要有两种:第一种是通过凋亡或坏死的细胞死亡被动释放dna。在正常的生理状态下,由于有吞噬细胞能够对凋亡和坏死的细胞碎片进行清除,因此健康个体血浆中cfdna含量较低。而在某些特定情况下,如癌症患者中,这些清除机制不能有效的发挥作用,导致包括dna在内的细胞碎片积累,随后被一同释放到血液中。cfdna释放的第二种机制是通过主动分泌,cfdna的分泌是通过释放细胞外小泡来进行的。人体cfdna的含量受肥胖、运动及肿瘤等多种因素影响。有研究表明cfdna广泛存在于人体血液、尿液、脑脊液、胸腹水、卵泡液、唾液等各类体液中。在健康人外周血中cfdna含量均值约为30ng/ml,几乎都来自凋亡或坏死细胞,肿瘤患者体内本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种脂质体,其特征在于,由5~30mM胆固醇和100~600mM磷脂组成;所述磷脂为1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-琥珀酰、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-琥珀酰的钠盐、1,2-二硬脂酰磷脂酰甘油、1,2-二硬脂酰磷脂酰甘油的钠盐、1,2-二硬脂酰基-sn-丙三基-3-磷酸胆碱中的一种或多种。

2.一种脂质体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

3.一种cfDNA提取处理液,其特征在于,包括权利要求1中的脂质体,还包括50~75mMTris-HCl、5~25mM EDTA、10~20mM DTAP、0.05~0.1%P...

【技术特征摘要】

1.一种脂质体,其特征在于,由5~30mm胆固醇和100~600mm磷脂组成;所述磷脂为1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-n-琥珀酰、1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-n-琥珀酰的钠盐、1,2-二硬脂酰磷脂酰甘油、1,2-二硬脂酰磷脂酰甘油的钠盐、1,2-二硬脂酰基-sn-丙三基-3-磷酸胆碱中的一种或多种。

2.一种脂质体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

3.一种cfdna提取处理液,其特征在于,包括权利要求1中的脂质体,还包括50~75mmtris-hcl、5~25mm edta、10~20mm dtap、0.05~0.1%proclin 300;优选地,所述cfdna提取处理液还包括50~60mm tris-hcl、10~15mm edta、15~20mm dtap、0.05~0.08%proclin 300。

4.一种权利要求3所述的cfdna提取处理液在cfdna提取试剂盒中的应用,其特征在于,在抗凝全血样本中加入权利要求3中的cfdna提取处理液,培养、分离得到血浆后,再检测cfdna。

5.根据权利要求3所述的cfdna提取处...

【专利技术属性】
技术研发人员:李岩付亚成唐先友王佳宁
申请(专利权)人:可孚医疗科技股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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