一种高表达转基因玉米草地贪夜蛾抗性评价方法技术

本发明专利技术涉及转基因作物转化功能表达评价技术领域。本发明专利技术提供了一种高剂量表达转基因玉米草地贪夜蛾抗性评价方法，包括如下步骤：S1分别采集不同时期转基因和对应的非转基因玉米的心叶、花丝、籽粒组织制成冻干粉样品；S2配置用于高表达量转基因作物抗草地贪夜蛾培养基底料；S3将待测转基因玉米与非转基因对照的组织干粉和培养基底料混合，得到待测样品；S4用待测样品和对照样品分别饲喂草地贪夜蛾幼虫；S56日后计算草地贪夜蛾幼虫的死亡率和校正死亡率，判断转基因玉米抗虫蛋白的表达状况。本发明专利技术的方法用于对新研发的转基因抗虫玉米转化体及其衍生品抗虫蛋白表达是否达到高剂量进行检测，并制定相应的转基因玉米种植策略。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及转基因作物转化功能表达评价，尤其涉及一种高表达转基因玉米草地贪夜蛾抗性评价方法。

技术介绍

1、转基因抗虫玉米于1996年开始在美国商业化种植，有效控制了玉米螟、草地贪夜蛾等害虫的发生危害，取得了显著的经济、社会和生态效益。国外在批准转基因抗虫玉米商业化时，都要求实施抗性基表大量估算策略。但是，转基因抗虫玉米产业化应用前，应根据转基因抗虫玉米的研发现状、不同玉米种植区的靶标害虫种类，制定适宜的转基因抗虫玉米目标蛋白高剂量表达评判技术，为转基因抗虫玉米产业化应用提供技术支撑。

2、转基因抗虫作物应用最失败的案例就是波多黎各和巴西对草地贪夜蛾的防治。2003年波多黎各开始种植表达cry1f蛋白的tc1507，该品种对草地贪夜蛾未达到高剂量的要求，至2006年，仅种植3年，就出现了抗性的问题，导致“tc1507”被召回，这是由田间害虫抗性种群产生导致转基因作物品种被强制召回的第一个事件。最主要的原因是没有种植足够的结构型庇护所，其次是岛内周年种植玉米，草地贪夜蛾发生世代多，选择压力过大。

3、巴西2008～2009年商业化种本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高表达转基因玉米草地贪夜蛾抗性评价方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)或(2)中所述组织冻干粉的材料选择为：

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)或(2)中所述培养基底料由如下重量份的原料组成：黄豆粉120～130份、玉米粉220～230份、酵母粉38～42份、琼脂23～27份、干酪素18～22份、肌醇0.08～0.12份、山梨酸5.5～6.5份、复合维生素B 6.5～7.5份、对羟基本甲酸甲酯7.3～7.7份、水1700～1900份；

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，...

【技术特征摘要】

1.一种高表达转基因玉米草地贪夜蛾抗性评价方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)或(2)中所述组织冻干粉的材料选择为：

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)或(2)中所述培养基底料由如下重量份的原料组成：黄豆粉120～130份、玉米粉220～230份、酵母粉38～42份、琼脂23～27份、干酪素18～22份、肌醇0.08～0.12份、山梨酸5.5～6.5份、复合维生素b 6.5～7.5份、对羟基本甲酸甲酯7.3～7.7份、水1700～1900份；

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)或(2)中所述培养基底料的制备方法为：

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)或(2)中所述组织干粉和培养基底料的质量比为1：23～25。

6.根据权利要求1所述的方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏超，熊梅，代晓航，刘文娟，杨强，李辉，
申请(专利权)人：四川省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，
类型：发明
国别省市：