实时荧光定量PCR检测鱼类弹状病毒CAPRV2023的引物探针组、试剂盒及其应用制造技术

技术编号:42985211 阅读:33 留言:0更新日期:2024-10-15 13:18
本发明专利技术公开了一种实时荧光定量PCR检测鱼类弹状病毒CAPRV2023的引物探针组及试剂盒,还公开了一种非疾病诊断目的鱼类弹状病毒CAPRV2023的检测方法;以及上述引物探针组、试剂盒或方法在非疾病诊断目的的鱼类弹状病毒CAPRV2023检测中的应用。本发明专利技术引物探针组及试剂盒特异性强、灵敏度高,本发明专利技术方法检测时间短、可实时监控、操作简便、污染少。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于病毒分子检测,具体涉及一种基于实时荧光定量pcr检测鱼类弹状病毒carpione rhabdovirus(caprv2023)的引物探针组、试剂盒及其应用,尤其是一种基于taqman实时荧光定量pcr检测鱼类弹状病毒caprv2023的引物探针组、试剂盒及其应用。


技术介绍

1、弹状病毒为线性负链单链rna病毒,病毒粒子大小为(100~430)nm×(45~100)nm,形态似棒状或子弹状,通常具有5种主要结构蛋白(l,g,n,p,m)。弹状病毒科包括318种以上的成员,可感染脊椎动物、无脊椎动物及植物。鱼类弹状病毒因感染宿主广、毒株种类多、毒力强,严重危害各种淡水和海水鱼。迄今报道感染鱼类的弹状病毒已有20多种,其中危害较大的有鲤春病毒血症病毒(svcv)、病毒性出血性败血症病毒(vhsv)、传染性造血器官坏死病毒(ihnv)、牙鲆弹状病毒(hrv)和鳜鱼弹状病毒(scrv)等。分类上归属于弹状病毒科分为5个属,分别是诺拉弹状病毒属(novirhabdovirus)、鲈鱼弹状病毒属(perhabdovirus)、鳜鱼弹状病毒属(sinipe本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种实时荧光定量PCR检测鱼类弹状病毒CAPRV2023的引物探针组,其特征在于,所述引物探针组包括引物和探针,所述引物包括正向引物CAPRVFq和反向引物CAPRVRq,所述正向引物CAPRVFq的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述反向引物CAPRVRq的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.根据权利要求1所述的引物探针组,其特征在于,所述探针的5′端标记有荧光基团,3′端标记有淬灭基团,所述荧光报告基团为FAM、HEX、VIC、ROX、JOE、Cy3、TxR或Cy5,所述淬灭基团为BHQ1、BHQ2、...

【技术特征摘要】

1.一种实时荧光定量pcr检测鱼类弹状病毒caprv2023的引物探针组,其特征在于,所述引物探针组包括引物和探针,所述引物包括正向引物caprvfq和反向引物caprvrq,所述正向引物caprvfq的核苷酸序列如seq id no.1所示,所述反向引物caprvrq的核苷酸序列如seq id no.2所示,所述探针的核苷酸序列如seq id no.3所示。

2.根据权利要求1所述的引物探针组,其特征在于,所述探针的5′端标记有荧光基团,3′端标记有淬灭基团,所述荧光报告基团为fam、hex、vic、rox、joe、cy3、txr或cy5,所述淬灭基团为bhq1、bhq2、bhq3、tamra或mgb。

3.一种实时荧光定量pcr检测鱼类弹状病毒caprv2023的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1或2所述的引物探针组。

4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中正向引物、反向引物和探针的摩尔比为4.8:4.8:1。

5.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括qpcr mix反应液、阳性对照和阴性对照,其中所述qpcr mix反应液包含以下含量的组分:5u taq酶、2.5mmdntps、25mm mgcl2和2×pcr buffer;所述阳性对照为弹状病毒caprv2023g蛋白基因片段的t载体克隆,其制备方法为:提取弹状病毒caprv2023的rna并逆转录为cdna,利用正向引物caprvfq和反向caprvr...

【专利技术属性】
技术研发人员:黄郁葱孙恒蔡双虎杨世平
申请(专利权)人:广东海洋大学
类型:发明
国别省市:

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