一种肝损伤相关的药物靶点及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种肝损伤相关的药物靶点及其应用，所述的药物靶点是硬脂酰辅酶Ａ去饱和酶１（Ｓｃｄ１），下调Ｓｃｄ１的表达可以显著缓解哺乳动物的肝损伤。本发明专利技术还公开了Ｓｃｄ１的拮抗剂的用途，用于制备抑制哺乳动物肝损伤的组合物。本发明专利技术还公开了筛选抑制哺乳动物肝损伤的潜在物质的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因
，更具体地，本专利技术涉及一种肝损伤相关的药物 靶点及其应用。
技术介绍
肝炎是严重危害人类健康的重大疾病。肝炎特别是病毒性肝炎在中国的发病率持续在较高水平，就乙型肝炎来说，全世界20亿人感染乙肝病毒，其中 6.9亿在中国，全球有乙肝病毒表面抗原(HBsAg)携带者3.5亿人，其中三分 之一在中国；全世界每年有75万人死于乙肝病毒染引起的疾病，其中28万人 来自中国。肝炎从病因看主要有病毒性肝炎，酒精性肝炎，自身免疫性肝炎等。但是 研究发现，不论其初始病因如何，炎症和免疫介导的肝细胞和肝组织损伤是这 些疾病的病理过程中共同的必经过程和影响疾病严重程度与预后的主要原因。 然而本领域对于究竟哪些因素或分子与炎症以及免疫介导的肝细胞和肝组织 损伤密切相关的研究还不够深入。因此，本领域非常有必要找到肝损伤相关的新的药物靶点，为肝损伤或相 关疾病的治疗提供新的途径。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种硬脂酰辅酶A去饱和酶1 (Scdl)的拮抗剂的用 途，用于制备抑制哺乳动物肝损伤的组合物。本专利技术的另一目的在于提供一种筛选抑制哺乳动物肝损伤的潜在物质的 方法。在本专利技术的第一方面，提供一种硬脂酰辅酶A去饱和酶1 (Scdl)的拮抗 剂的用途，用于制备抑制哺乳动物肝损伤的组合物。在另一优选例中，所述的肝损伤是炎症和免疫介导的肝细胞和肝组织损伤。在另一优选例中，所述的肝损伤包括肝炎，肝脏组织坏死。 在另一优选例中，所述的组合物还用于 降低肝损伤哺乳动物的谷丙转氨酶活性；或 降低肝损伤哺乳动物中炎性细胞因子的浓度。在另一优选例中，所述的炎性细胞因子选自TNF-a，或IFN-Y。 在另一优选例中，所述的硬脂酰辅酶A去饱和酶1的拮抗剂选自 特异性干扰硬脂酰辅酶A去饱和酶1基因表达的小干扰RNA分子或反义 核苷酸；或特异性与硬脂酰辅酶A去饱和酶1结合的抗体或配体。 在另一优选例中，所述的硬脂酰辅酶A去饱和酶1的拮抗剂是(a) SEQ ID NO: 1所示核苷酸序列的小干扰RNA分子；和/或(b) 核苷酸序列与SEQ ID NO: 1互补的小干扰RNA分子。 在另一优选例中，所述的小干扰RNA分子是双链分子，其正向链具有SEQID NO: l所示核苷酸序列；反向链具有SEQIDNO:2所示核苷酸序列。在本专利技术的第二方面，提供一种用于抑制哺乳动物肝损伤的小干扰RNA 分子，所述的小干扰RNA分子是(a) SEQ ID NO: 1所示核苷酸序列的小干扰RNA分子；和/或(b) 核苷酸序列与SEQ ID NO: 1互补的小干扰RNA分子。在本专利技术的第三方面，提供一种用于抑制哺乳动物肝损伤的组合物，所述 的组合物含有(1) 有效量的所述的小千扰RNA分子；和(2) 药学上可接受的载体。在本专利技术的第四方面，提供一种筛选抑制哺乳动物肝损伤的潜在物质的方 法，所述方法包括(1) 用候选物质处理表达硬脂酰辅酶A去饱和酵1的体系；和(2) 检测所述体系中硬脂酰辅酶A去饱和酶1的表达或活性；其中，若所述候选物质可降低硬脂酰辅酶A去饱和酶1的表达或活性，则 表明该候选物质是抑制哺乳动物肝损伤的潜在物质。在另一优选例中，步骤(l)包括在测试组中，将候选物质加入到表达硬脂 酰辅酶A去饱和酶1的体系中；和/或步骤(2)包括检测测试组的体系中硬脂酰辅酶A去饱和酶1的表达或活性， 并与对照组比较，其中所述的对照组是不添加所述候选物质的表达硬脂酰辅酶 A去饱和酶1的体系；如果测试组中硬脂酰辅酶A去饱和酶1的表达或活性在统计学上低于(优选显著低于，如低20%以上，较佳的低50%以上；更佳的低80%以上)对照组，就表明该候选物是抑制哺乳动物肝损伤的潜在物质。在另一优选例中，所述的体系选自细胞体系(如表达Scdl的肝脏细胞)； (或细胞培养物体系)、亚细胞体系、溶液体系、组织体系、器官体系或动物体 系。在另一优选例中，所述的方法还包括对获得的潜在物质进行进一步的细 胞实验和/或动物试验，以从候选物质中进一步选择和确定对于抑制哺乳动物肝 损伤有用的物质。另一方面，本专利技术还提供一种抑制哺乳动物肝损伤的方法，所述方法包括 下调所述哺乳动物体内硬脂酰辅酶A去饱和酶1的表达或活性。本专利技术的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而 易见的。附图说明图1.正常小鼠和Scdl缺陷小鼠由尾静脉注射剂量为15mg/kg的ConA。 17小时后取血清，检测血清中肿瘤坏死因子-a和Y-干扰素的浓度。A. ELISA法检测血清中7-干扰素的浓度；B. ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-a的浓度。图2.正常小鼠和Scdl缺陷小鼠由尾静脉注射剂量为15mg/kg的ConA，17小时后取血清测定谷丙转氨酶活。数据以平均数土标准差的形式表示。图3.肝脏的H&E染色和TUNEL染色。正常小鼠和Scdl缺陷小鼠由尾静 脉注射剂量为15mg/kg的ConA。 17小时后，取肝脏组织切片H&E染色或者 TUNEL染色。A. 正常小鼠诱导CIH后H&E染色结果；B. Scdl缺陷小鼠诱导CIH后H&E染色结果；C. 正常小鼠诱导CIH后TUNEL染色结果；D. Scdl缺陷小鼠TUNEL染色结果。图4.注射生理盐水后尾静脉注射剂量为15mg/kg的ConA的小鼠，注射 siRNA后尾静脉注射剂量为15mg/kg的ConA的小鼠(siRNA)分别在ConA注射17小时后取血清测定谷丙转氨酶活。Naive表示未注射ConA的正常小鼠的 丙转氨酶活。数据以平均数土标准差的形式表示。具体实施例方式本专利技术人经过广泛而深入的研究，首次揭示硬脂酰辅酶A去饱和酶1 (Scdl) 与肝损伤的发生或发展密切相关。事先在肝损伤动物模型的染色体中敲除Scdl 基因后，Scdl缺陷动物发生肝损伤的症状显著减轻，因此可知Scdl蛋白是一 种在肝损伤发病机制中发挥重要作用的因素，从而可以作为药物靶点开发预防 或治疗肝损伤的药物。Scdl及其用途Scd基因编码了定位于细胞内质网上的硬脂酰辅酶A脱氢酶，它能够催化 来源食物或者从头合成饱和脂肪酸脱氢生成单不饱和脂肪酸，是脂肪代谢的关 键酶，因此是能量代谢过程中的重要的调节因子。在小鼠中，Scdl是在成年小 鼠的脂类代谢中起最主要作用的Scd基因，人类基因组中两个Scd基因均与小 鼠的Scdl基因有85%以上的同源性，以往的研究显示Scdl在调节体重和胰岛 素敏感性方面有着重要的作用。任何适合的Scdl蛋白均包括在本专利技术中。所述的Scdl蛋白包括全长的Scdl 蛋白或其生物活性片段。优选的，所述的Scdl蛋白的氨基酸序列可以与GenBank 登录号NP 033153.2所示的序列基本上相同。编码所述的Scdl蛋白的核苷酸序列可以与GenBank登录号NM—009127.3所示的序列或该序列的简并的序列 基本上相同。经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的Scdl蛋白的氨基 酸序列也包括在本专利技术中。Scdl蛋白或其生物活性片段包括一部分保守氨基酸 的替代序列，所述经氨基酸替换的序列并不影响其活性或保留了其部分的活 性。例如，所述的Scdl蛋白可以是来自于鼠(如小鼠)的，也可以是来自于人或 其它哺乳动物的、氨本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种硬脂酰辅酶Ａ去饱和酶１的拮抗剂的用途，用于制备抑制哺乳动物肝损伤的组合物。

【技术特征摘要】
1.一种硬脂酰辅酶A去饱和酶1的拮抗剂的用途，用于制备抑制哺乳动物肝损伤的组合物。2. 如权利要求l所述的用途，其特征在于，所述的肝损伤包括肝炎或肝脏组织坏死。3. 如权利要求l所述的用途，其特征在于，所述的组合物还用于 降低肝损伤哺乳动物的谷丙转氨酶活性；或 降低肝损伤哺乳动物中炎性细胞因子的浓度。4. 如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述的炎性细胞因子选自TNF-a ， 或IFN- Y 。5. 如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的硬脂酰辅酶A去饱和 酶1的拮抗剂选自特异性干扰硬脂酰辅酶A去饱和酶1基因表达的小干扰RNA分子或反义 核苷酸；或特异性与硬脂酰辅酶A去饱和酶1结合的抗体或配体。6. 如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的硬脂酰辅酶A去饱和 酶1的拮抗剂是(a) SEQ ID NO: 1所示核苷酸序列的小干扰RNA分子；禾口/或(b) 核苷酸序列与SEQIDNO: 1互补的小干扰RNA分子。7. —种用于抑制哺乳动物肝损伤的小干扰RNA分子，其特征在于，所述 的小干扰RNA分子是(a) SEQIDNO: ...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐凌云，冯德春，
申请(专利权)人：中国科学院上海生命科学研究院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]