突变体斑马鱼在制备头部恶性肿瘤的动物模型中的应用制造技术

本发明专利技术提供一种突变体斑马鱼在制备头部恶性肿瘤的动物模型中的应用，其采用CRISPR/Cas9基因编辑技术，通过敲低slc45a2得到slc45a2‑/‑突变体，再将线性化的rag2‑dsRED2（荧光追踪）质粒和rag2‑kRASG12D（癌基因）质粒共注入野生型（AB WT）或者突变型（slc45a2‑/‑）斑马鱼单细胞内，最终首次发现在淡水鱼类脊椎动物发育过程slc45a突变品系的斑马鱼胚胎可产生头部特异发生的恶性肌肉瘤，这一头部恶性肿瘤的斑马鱼模型可以为头部恶性肿瘤的研究提供模型支持。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及动物模型，具体是突变体斑马鱼在制备头部恶性肿瘤的动物模型中的应用。

技术介绍

1、近年来，随着社会环境和生活方式的发展，头部特异发生的恶性肌肉瘤在亚洲引起了广泛关注。脑部肿瘤可引起脑功能丧失、病人、肢体感觉和运动障碍、术后出现复发（部分良性肿瘤切除后还会继续增长）；不论是恶性肿瘤，还是良性肿瘤，因为生长在头部或者脊髓比较重要的器官上，所以对患者的生活质量都会产生影响，甚至会引起死亡。

2、斑马鱼具有完整的器官系统和与哺乳动物相似的基因，但目前比较缺乏头部特异发生的恶性肌肉瘤的斑马鱼动物模型，给头部特异发生的恶性肌肉瘤发病机制的研究和相关药物研发带来了困难。基于此问题，本专利技术人设计一种突变体斑马鱼，使其能在制备头部恶性肿瘤的动物模型中应用，以便于对头部特异发生的恶性肌肉瘤的发病机制进行研究和相关药物进行研发。

技术实现思路

1、本专利技术的目的是为了克服现有技术存在的缺点和不足，而提供一种突变体斑马鱼在制备头部恶性肿瘤的动物模型中的应用，并首次公开了在脊椎动物发育过程中slc45a本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.突变体斑马鱼在制备头部恶性肿瘤的动物模型中的应用，其特征在于：

2.根据权利要求1所述的突变体斑马鱼在制备头部恶性肿瘤的动物模型中的应用，其特征在于，包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的突变体斑马鱼在制备头部恶性肿瘤的动物模型中的应用，其特征在于，所述的gRNA为特异作用slc45a2的外显子1区域的gRNA，其序列为：GGCCATCGTGGTGGTGATGTT；

4.根据权利要求1所述的突变体斑马鱼在制备头部恶性肿瘤的动物模型中的应用，其特征在于，将线性化的rag2-dsRED2荧光追踪质粒和rag2-kRASG12D癌基因质粒共注入突变型斑...

【技术特征摘要】

1.突变体斑马鱼在制备头部恶性肿瘤的动物模型中的应用，其特征在于：

2.根据权利要求1所述的突变体斑马鱼在制备头部恶性肿瘤的动物模型中的应用，其特征在于，包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的突变体斑马鱼在制备头部恶性肿瘤的动物模型中的应用，其特征在于，所述的grna为特异作用slc45a2的外显子1区域的grna，其序列为：ggccatcgtggtggtgatgtt...

【专利技术属性】
技术研发人员：林坚，陈将飞，潘栋梁，孙震恺，杨亮，方黄毅，祝扬帆，尹玉莹，
申请(专利权)人：温州医科大学附属第二医院温州医科大学附属育英儿童医院，
类型：发明
国别省市：