一种甘薯G病毒RT-LAMP检测方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种甘薯G病毒RT‑LAMP检测方法与应用，属于甘薯病毒检测技术领域。检测引物由上游外引物F3、下游外引物B3、上游内引物FIP和下游内引物BIP组成，各引物核苷酸序列如SEQ ID No.1～4所示。检测方法包括以下步骤：以待测样品的叶片裂解上清液为模板，利用上述检测引物进行RT‑LAMP反应，得到RT‑LAMP扩增产物；若RT‑LAMP扩增产物显示黄色，则待测样品为阳性，若RT‑LAMP扩增产物显示玫红色，则待测样品为阴性。有益效果：本发明专利技术所提供的可视化检测方法明确了免核酸提取法获得的裂解上清液与常规提取的基因组提取液均能满足正常的SPVG RT‑LAMP检测需求，保证准确率的同时极大的缩短了样品的准备时间，提高了SPVG的检测效率并降低了检测成本。检测引物特异性强，检测效果好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及甘薯病毒检测，具体涉及一种甘薯g病毒rt-lamp检测方法与应用。

技术介绍

1、甘薯是一种具有藤蔓特征的草本一年生或多年生植物，属于旋花科(convolvulaceae)甘薯属(ipomoea)，以其耐瘠耐旱、高产、抗逆性强而被广泛种植，是世界上重要的粮食作物之一。同时，甘薯的茎、叶以及贮藏根都是可食的，也是甘薯属中唯一能够结出可食块茎的作物。

2、甘薯病毒病是影响甘薯生长和产量的重要因素之一。甘薯病毒病是由多种不同的病毒引起的一种疾病，病毒包括：甘薯g病毒(sweet potato virus g，spvg)、甘薯c病毒(sweet potato virus c，spvc)、甘薯病毒2(sweet potato virus 2，spv2)、甘薯羽状斑驳病毒(sweet potato feathery mottle virus，spfmv)、甘薯潜隐病毒(sweet potatolatent virus，splv)等，这些病毒可以单独感染甘薯，也可以与其他病毒共同感染，形成复合感染，导致病害症状更加严重对甘薯的生长和产量造成严重本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种甘薯G病毒的RT-LAMP检测引物，其特征在于，所述检测引物由上游外引物F3、下游外引物B3、上游内引物FIP和下游内引物BIP组成，各引物核苷酸序列为：

2.一种甘薯G病毒的RT-LAMP可视化检测方法，其特征在于，包括以下步骤：以待测样品的叶片裂解上清液为模板，利用权利要求1所述的检测引物进行RT-LAMP反应，得到RT-LAMP扩增产物；

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述RT-LAMP反应的体系，每25μL包括：WarmStart Colorimetric LAMP 2X Master Mix 12.5μL、检测引物2.5μL、模板...

【技术特征摘要】

1.一种甘薯g病毒的rt-lamp检测引物，其特征在于，所述检测引物由上游外引物f3、下游外引物b3、上游内引物fip和下游内引物bip组成，各引物核苷酸序列为：

2.一种甘薯g病毒的rt-lamp可视化检测方法，其特征在于，包括以下步骤：以待测样品的叶片裂解上清液为模板，利用权利要求1所述的检测引物进行rt-lamp反应，得到rt-lamp扩增产物；

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述rt-lamp反应的体系，每25μl包括：warmstart colorimetric lamp 2x master mix 12.5μl、检测引物2.5μl、模板1μl和h2o 9μl。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述检测引...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪章勋，代思雨，檀根甲，蒋开放，郭具成，宁克振，李一玉，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：